抗氧化活性肽的研究进展

研究表明,不少疾病的起因与自由基有关,而抗氧化活性肽可有效清除体内过剩的活性氧自由基,保护细胞和线粒体的正常结构和功能,在预防治疗自由基诱发的疾病和抗衰老方面有着广阔的应用前景。食品工业通过添加具有抗氧化活性的物质可以增加食品体系的稳定性。本文综述抗氧化活性肽的不同来源、活性检测方法、作用机理、应用前景及面临的一些问题,以期为后续的相关研究提供参考。  

文蛤蛋白水解制备抗氧化活性肽的研究

以文蛤蛋白为原料，通过蛋白酶水解制备抗氧化活性肽．利用体外清除DPPH活性评价酶解产物的抗氧化活性，采用超滤、葡聚糖凝胶柱层析和HPLC对相应的活性肽进行分离纯化，通过HPLC—MS进行结构鉴定．结果表明：木瓜蛋白酶水解产物的DPPH清除活性明显高于碱性蛋白酶、风味蛋白酶、中性蛋白酶和复合蛋白酶，产物质量浓度为1mg·mL^-1时，DPPH清除率为55．74％；以DPPH清除率为筛选指标，对木瓜蛋白酶酶解产物进行逐级分离，得到4个具有抗氧化活性的目的肽段，氨基酸序列分别为LNFNLEKSR（1120．3U）、SWLRPR（814．4U）、RIGNIISQY（1063．3u）和LNFNLEK（877．2U）．  

蛋清抗氧化肽增效剂的优化

以DPPH自由基清除率为评价指标，考察了单独添加NaCl、糖类、柠檬酸以及两两或三者合用时对蛋清抗氧化肽活性的影响，并在此基础上运用响应面分析法，优化出增效剂最佳组合。结果表明，NaCl、麦芽糖及柠檬酸均能显著提高蛋清抗氧化肽的活性（P<0.05），可作为蛋清抗氧化肽的抗氧化增效剂单剂，三者合用时增效效果最佳，最佳组合为1.4%NaCl+3.0%麦芽糖+2.4%柠檬酸，在此条件下蛋清抗氧化肽对DPPH自由基的IC50值为0.27mg/ml，增效比SR可达3.96。  

基于蛋清抗氧化肽增效因子的优化研究

以DPPH自由基清除率为评价指标，考察了单独添加NaCl、糖类、柠檬酸以及两两或三者合用时对蛋清抗氧化肽活性的影响，并在此基础上运用响应面分析法，优化出增效剂最佳组合。结果表明，NaCl、麦芽糖及柠檬酸均能显著提高蛋清抗氧化肽的活性（P<0.05），可作为蛋清抗氧化肽的抗氧化增效剂单剂，三者合用时增效效果最佳，最佳组合为1.4%NaCl+3.0%麦芽糖+2.4%柠檬酸，在此条件下蛋清抗氧化肽对DPPH自由基的IC50值为0.27mg/ml，增效比SR可达3.96。  

紫苏籽抗氧化肽的制备工艺研究

采用碱提酸沉法从紫苏籽粕中提取蛋白质，进行蛋白酶筛选发现紫苏籽蛋白经碱性蛋白酶酶解后有最好的抗氧化活性和水解度(DH)。在单因素试验的基础上，采取响应面分析方法，并建立数学模型，确定最佳酶解工艺。试验结果表明：各因素影响紫苏籽粗蛋白酶解液DPPH自由基清除率的主次顺序是：加酶量>时间>pH，最佳条件是：时间5.00h，加酶量3000U/g，pH值9.80，温度50℃，此时DPPH自由基清除率为73.64%，说明紫苏籽蛋白质酶解多肽拥有很高的抗氧化活性。  

胡萝卜籽抗氧化肽的分离纯化及活性研究

本论文采用凝胶过滤色谱Sephadex G-50和反相高效液相色谱（reverse-phase high performance liquid chromatography，RP-HPLC）对胡萝卜籽中的抗氧化肽进行分离纯化.以DPPH自由基（2，2-二苯基-1-苦肼基，2，2-diphenyl-1-picrylhydrazyl）清除率为指标，测定多肽的抗氧化活性.采用电喷雾电离质谱法（electrospray ionization mass spectrometry，ESI-MS）测定该多肽的相对分子质量.研究结果表明：经过分离纯化，得到一个具有较强抗氧化活性的多肽，在浓度为1mg/mL时，其DPPH自由基清除活力达到92.02±0.47%，分子量为339.3Da，由3个氨基酸残基组成.