首页 | 本学科首页   官方微博 | 高级检索  
文章检索
  按 检索   检索词:      
出版年份:   被引次数:   他引次数: 提示:输入*表示无穷大
  收费全文   1027篇
  国内免费   41篇
  完全免费   155篇
  综合类   1223篇
  2017年   13篇
  2016年   14篇
  2015年   24篇
  2014年   43篇
  2013年   26篇
  2012年   48篇
  2011年   58篇
  2010年   80篇
  2009年   80篇
  2008年   93篇
  2007年   105篇
  2006年   80篇
  2005年   68篇
  2004年   72篇
  2003年   68篇
  2002年   72篇
  2001年   49篇
  2000年   47篇
  1999年   37篇
  1998年   35篇
  1997年   18篇
  1996年   26篇
  1995年   11篇
  1994年   16篇
  1993年   15篇
  1992年   7篇
  1991年   5篇
  1990年   1篇
  1989年   6篇
  1988年   3篇
  1986年   1篇
  1985年   2篇
排序方式: 共有1223条查询结果,搜索用时 31 毫秒
1.
文蛤(Meretrix meretrix)地理种群ISSR分子标记的初步研究   总被引:28,自引:0,他引:28  
利用ISSR(InterSimpleSequenceRepeate)技术对文蛤(Meretrixmeretrix)江苏和辽宁两个地理种群进行了PCR扩增.从100条ISSR引物中筛选出引物13条,每条引物检测出位点数1到8.平均每条引物可检测到位点数4 6个.实验结果表明:江苏文蛤的位点多态性(80 7%)高于辽宁文蛤的位点多态性(68 4%);种群内平均遗传距离分别为0 3105±0 090和0 2658±0 044,江苏文蛤也高于辽宁文蛤.从筛选得到的引物可以发现,文蛤简单重复序列中A、G碱基含量较高.通过对不同实验条件的对比,对ISSR PCR反应体系进行了优化.  相似文献
2.
食品中单增李氏菌实时荧光PCR检测鉴定方法的建立   总被引:27,自引:0,他引:27  
运用实时荧光PCR(Real-time PCR)技术建立了对食品中单增李氏菌进行检测的快速方法,设计的引物和探针的序列特异性强,省去凝胶电泳的繁琐,降低了污染的可能性,在对26种病原菌进行检测过程中,运用实时荧光PCR法和经典培养法进行比较,结果表明用实时荧光PCR法检测单核细胞增多李斯特氏菌,更快速、敏感、特异性更高。  相似文献
3.
面向生物工程实验的微操作机器人   总被引:24,自引:0,他引:24  
本文讨论了一台面向生物工程应用的微操作机器人系统的结构、功能和关键技术.首先,给出了它的硬件体系结构和逻辑结构,它由传感系统,控制系统和操作系统组成.其中传感系统由显微镜和CCD摄象系统组成.其次,对微操作机器人系统的关键技术进行详细讨论.显微视觉是最主要的一项技术,基于此技术完成了两项功能,即微针的纵向定位和自动寻针.最后,给出了微操作机器人在生物PCR反应实验中的一个成功的应用实例,证明了上述系统的有效性.  相似文献
4.
苦瓜愈伤组织诱导的多因子正交试验研究   总被引:18,自引:0,他引:18  
采用正交设计方法,研究了不同外植体以及培养基中添加植物生长物质ZT、KT对苦瓜愈伤组织诱导和生长的影响.试验结果统计分析表明,ZT是苦瓜愈伤组织诱导的最主要因素;苦瓜愈伤组织诱导的最佳培养基为MS (4 0~6 0)mg/LZT 1 0mg/LKT,最佳外植体为子叶;苦瓜愈伤组织生长的最佳培养基为MS 6 0mg/LZT 1 0mg/LKT.  相似文献
5.
多重荧光PCR同时检测转基因成分35S和Nos方法的建立   总被引:18,自引:0,他引:18  
根据商品化转基因作物中常用的花郴花花叶病毒启动子(CaMV35S)和根癌农杆菌终止(Nos)的序列特点,设计并合成了两对引物和相对应的荧光双链探针,建立一种应用荧光双链探针的多重荧光PCR同时检测转基因成分35S启动子和Nos终止子的方法,并利用该方法对马铃薯、大豆、玉米、甜椒、番茄等11份实物样品进行了检测,其中有5份样品结果阳性,结果表明所建立的多重荧光PCR方法能同时检测了35S方法同时检测出35S和Nos双组分,较常规PCR技术更为简便、快速、准确,有很很好的应用前景。  相似文献
6.
正交设计法在白三叶组织培养中的应用   总被引:17,自引:0,他引:17  
以白三叶的叶片为外植体,采用正交设计法,对愈伤组织生长和细胞悬浮培养的培养基进行了优化筛选。实验结果表明,白三叶叶片愈伤组织生长的最佳培养基配方为MB+0.5mg/L 2,4-D+0.2mg/L NAA+1mg/L BA+2mg/L甘氨酸+100mg/L肌醇+3%蔗糖+0.7%琼脂;细胞悬浮培养的最佳培养基的配方为MB+4mg/L 2,4-D+0.2mg/L NAA+0.5mg/L BA+2mg/  相似文献
7.
不同纬度野生大豆种群间的遗传变异   总被引:16,自引:2,他引:14  
选用了经初步筛选的20个短随机序列引物和2个长随机序列引物对5个不同纯度来源的野生大豆进行了DNA随机扩增,其中有19个引物扩增出多态性片段,区获得70个RAPD多态性片段,平均每个引物3.68条,运用自编的计算机程序对扩增进行聚类分析。  相似文献
8.
一种DNA侧翼序列分离技术--TAIL-PCR   总被引:15,自引:0,他引:15  
在分子生物学研究中,基因克隆和分子杂交的探针制备等操作常需分离与已知DNA序列邻近的未知序列,热不对称交错PCR(简称TAIL—PCR)反应技术能够较好地解决上述难题。该技术通过3个嵌套的特异性引物分别和简并引物组合进行连续的PCR循环,利用不同的退火温度选择性地扩增目标片段,所获得的片段可以直接用做探针标记和测序模板。TAIL—PCR技术简单易行,反应高效灵敏,产物的特异性高,重复性好,能够在较短的时间内获得目标片段,已经成为分子生物学研究中的一种实用技术。笔综述了TAIL-PCR反应的原理、引物设计、反应条件设置及产物分析。  相似文献
9.
不同破壁方法对活性污泥总DNA提取效果的影响   总被引:15,自引:0,他引:15  
分别采用酶法、化学法、珠磨匀浆法和反复冻融法对活性污泥样品进行破壁,提取总DNA,并通过提取的核酸总量、纯度、片段分布情况、是否含有聚合酶链反应抑制剂以及基因间隔序列(ITS)扩增产物多态性等5个指标来评价不同的细胞破壁方法对活性污泥总DNA提取效果的影响。结果表明,化学法的优势最明显,提取的总量最多,大片段提取效果好,虽然杂质较多,但不影响聚合酶链反应,方法的偏倚性最小。  相似文献
10.
灰飞虱共生菌Wolbachia引起的细胞质不亲和性   总被引:14,自引:3,他引:11  
对我国6个地区和日本3个地区灰飞虱的Wolbahia感染率,用PCR技术进行了检测,结果表明中国的辽宁、北京、上海和云南的灰飞虱的Wolbachia感染率均接近100%;四川为59.6%;而宁夏为0。各地区灰飞虱间的交配实验证明了在Wolbachia引起的细胞质不亲和现象的存在,Wolbachia16SrDNA的部分测序分析表明,上海、云南和日本出云的灰飞虱发的同为Wolbachia pipien  相似文献
设为首页 | 免责声明 | 关于勤云 | 加入收藏

Copyright©北京勤云科技发展有限公司  京ICP备09084417号