克隆世界的自我救赎

<正>十年前,黄禹锡正值研究事业的顶峰,却不料生命伦理行为中的造假和欺诈使得他的职业脱离原有的轨道。这个科学的弃儿能否自我救赎?韩国Sooam生物技术研究基金会位于首尔西南郊古罗区的一个林木茂密的山坡上。这个冬日寂静又寒冷,灰白的外表掩饰了山里各种活动的嘈杂,还有其中斯巴达式的生活。     

扬子鳄肝脏、心脏和肌肉细胞系构建

扬子鳄属国家一级保护的珍稀濒危动物. 细胞系的构建和保存是濒危野生动物离体保护工程的主要内容之一. 本研究构建了扬子鳄肝脏、心脏和肌肉细胞系. 结果表明, 从3 种不同来源组织块中原代细胞的生长速度表现出明显差异, 分别为11~12, 13~14 和17~18 d; 而传代细胞的生长速度在3 种组织来源的细胞之间没有明显差异, 均在6~7 d, 细胞倍增时间为36 h. 扬子鳄的染色体核型为2n = 32, 无明显的性染色体. 该研究所建立的3 种不同组织来源的细胞系将为扬子鳄的相关保护及研究工作提供可靠的材料平台, 也将为其他两栖爬行动物的细胞系构建提供有益参考.     

维甲酸激活新基因RA28及其编码蛋白的定位

基因ＲＡ２８是用全反式维甲酸诱导肺腺癌细胞系ＧＬＣ－８２,用消减杂交方法分离得到的一个新的ｃＤＮＡ序列。作为体内报告分子的绿色荧光蛋白（ｇｒｅｅｎ ｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｔ ｐｒｏｔｅｉｎ,ＧＦＰ）,在激发光４８８ｎｍ,不加任何底物时,能发出绿色荧光。     

基质金属蛋白酶-28在人细胞滋养层细胞与绒毛膜癌细胞系JEG-3细胞中的表达

细胞滋养层细胞和肿瘤细胞的侵入行为具有惊人的相似性,其中基质金属蛋白酶（MMPs）是滋养层细胞和肿瘤细胞侵入的非常重要的介导因素。近来,MMPs家族的一个新成员－MMP－28被克隆并确定下来,采用反转录－聚合酶链式反应（RT－PCR）、酶谱分析和Northern blot等方法,检测了妊娠早期细胞滋养层细胞和绒毛膜癌细胞系JEG－3细胞中MMP－28的基因表达和蛋白分泌情况。RT－PCR显示,细胞滋养层细胞JEG－3细胞均有MMP－28mRNA的表达;Northern blot研究显示,JEG－3细胞中MMP-28mRNA的表达强于细胞滋养层细胞中MMP－28mRNA的表达,具有时间依赖关系;酶谱分析显示,JEG－3细胞中MMP－228蛋白分泌 活性高于细胞滋养层细胞中MMP－28蛋白分泌活性,呈时间依赖关系,这与MMP－28的基因表达结果相一致。进一步证明了MMP－28可能在正常妊娠和肿瘤发展等一些与组织重建有关的过程中发挥一定的作用。     

杆状病毒诱导凋亡昆虫细胞中的线粒体反应和Ca2+的变化

以罗丹明123作为线粒体跨膜电位荧光标记探针, 流式细胞术和激光共聚焦显微镜研究显示, SfaMNPV诱导凋亡的斜纹夜蛾SL-1细胞, 线粒体跨膜电位(&#8710;Ψm)产生明显改变, 病毒接种后4 h, 膜电位开始下降, 随着病毒感染进程的延续, 线粒体膜电位&#8710;Ψm持续降低. 利用Western 杂交分析定位于线粒体的Bcl-2蛋白, 结果表明, 线粒体Bcl-2蛋白含量随病毒感染逐渐减小, 表达水平降低, 病毒感染下调了Bcl-2蛋白的表达. Western杂交检测到显示细胞色素c从线粒体向细胞质中释放, 并在细胞质逐渐积累, 呈时间依赖性特征. 病毒感染诱发的线粒体反应, 提示杆状病毒诱导昆虫细胞凋亡, 可能存在线粒体介导的凋亡信号转导途径. 以Ca²⁺荧光探针Fluo-3/AM负载, 激光共聚焦显微镜观察和荧光分光光度计测定凋亡细胞 [Ca²⁺]_i浓度的变化, 检测到病毒诱导凋亡细胞内的[Ca²⁺]_i浓度明显升高, 细胞外Ca²⁺内流; 在EGTA抑制胞外钙离子内流和细胞质Ca²⁺钳制状态下, PI染色后流式细胞仪检测显示细胞凋亡不受影响, 说明胞质内游离Ca²⁺升高和胞外钙离子内流不是细胞凋亡的主要诱因, 提示内质网钙库Ca²⁺排空可能是SfaMNPV诱导SL-1细胞凋亡信号转导通路中的重要媒介.     

不同品系黑腹果蝇细胞系的建立(Ⅰ)——影响细胞系建立的某些因素

果蝇细胞作为真核细胞基因表达的载体和受体系统是生物工程的一个重要研究内容。为着这一目的,我们对不同品系的黑腹果蝇(D.melanogaster)细胞进行了广泛的细胞培养试验。结果表明:繁殖世代在3～40代之内,发育6±2h的果绳胚胎是建立细胞系的最好材料。     

小麦耐盐细胞系脯氨酸SOD酶核酸和蛋白质合成动态分析

对已筛选出的小麦耐盐细胞系的耐盐稳定性进行有关生理、生化分析。结果表明：耐盐细胞系脯氨酸含量不仅稳定,而且高于对照;ＳＯＤ活性在耐盐系增加,耐盐系对一定的盐浓度损伤ＤＮＡ修复能力大于对照系,耐盐系ＲＮＡ和蛋白质合成量分别是对照的５．４和４．５倍,并对小麦耐盐性的有关问题进行了讨论。     

黑腹果蝇NDA修复功能缺陷型细胞系的建立及其培养特性

通过低温(18℃)培养方法,成功地建立了黑腹果蝇DNA修复功能缺陷型细胞系。该细胞系的特点是只能进行开放培养而不能进行封闭培养,为研究真核生物细胞DNA修复机理提供了一个有用的实验材料。     

ω-3转基因克隆绵羊诞生

我们构建了含有bfat-1表达载体pIE-bF1,通过脂质体介导转染获得转基因细胞系,再以核移植技术获得转基因克隆胚胎。胚胎移植后,于2010年10月27日出生两只克隆羊。经检测均为转ω-3基因克隆绵羊。