家蚕非编码RNA Bm-152功能初探

Bm-152是前期研究中发现的一个在家蚕丝腺中高表达的非编码RNA.采用实时荧光定量PCR技术对Bm-152在家蚕5龄到预蛹期不同发育天数丝腺中的表达谱进行检测.同时,在个体中过表达Bm-152,检测Bm-152可能参与的信号通路.结果显示,Bm-152在家蚕5龄幼虫丝腺发育过程中无明显的变化规律,但在吐丝第1天表达量较高,随后表达量又下降.通过在血淋巴中注射2μg piggyBac[A3-EGFP-A3-Bm-152]过表达载体,48h后发现Bm-152在丝腺组织中无明显过表达,但在非丝腺组织中可实现明显过表达,且表达量上调1.66倍;蜕皮激素信号通路基因Usp在非丝腺组织中上调1.95倍,E75A在非丝腺组织中上调2.26倍,保幼激素信号通路基因Met在非丝腺组织中上调1.79倍.表明非编码RNA Bm-152可能通过蜕皮激素和保幼激素信号通路参与家蚕发育,该结果为进一步探索Bm-152的功能提供了方向.     

利用pGenesil-1.0构建人Dna2真核表达干扰载体

目的:构建人基因Dna2干扰(RNAi)的真核表达载体.方法:根据GenBank上人Dna2的cDNA序列设计并合成两条单链寡核苷酸,退火以后,插入质粒pGenesil-1.0多克隆位点的BamH I和Hind III之间进行重组,构建重组干扰载体,转化DH5α后测序鉴定出阳性菌株.重组质粒以脂质体法转染HeLa细胞,提取Dna2蛋白以免疫印迹法检验干扰效果.结果:设计的目的干扰序列5’-catagccagtagtattcgatg-3’可明显抑制Dna2在HeLa细胞的表达.结论:利用pGenesil-1.0构建的人Dna2干扰载体适用于该基因功能研究.     

靶向survivin基因的shRNA慢病毒载体的构建及其对膀胱癌EJ细胞凋亡的影响

目的:构建survivin基因特异性shRNA慢病毒干扰载体,转染膀胱癌EJ细胞,研究survivin基因在膀胱癌细胞株中的表达抑制情况,观察survivin shRNA慢病毒载体对EJ细胞凋亡的影响.方法:以survivin基因为靶标设计shRNA干扰序列,克隆至p SIH1-H1-cop GFP慢病毒载体.干扰载体鉴定正确后转染膀胱癌细胞株EJ细胞,荧光显微镜下观察GFP表达情况,实时荧光定量PCR检测survivin基因mRNA含量变化,Western blotting法检测survivin蛋白表达,Annexin V-FITC/PI双染法检测EJ细胞凋亡情况.结果:PCR扩增鉴定、DNA测序证实survivin慢病毒干扰载体构建成功;EJ细胞经干扰载体处理后,EJ细胞survivin基因mRNA水平下调了73.33%,蛋白表达受到显著抑制,EJ细胞凋亡率达到24.39%.结论:成功构建了靶向survivin基因的shRNA重组慢病毒干扰载体,可以显著降低转染细胞survivin基因的表达水平,并有效提高膀胱癌细胞凋亡率.     

首例RNA人工结构物

日本京都大学斋藤博英准教授所在的一个科研组，用核糖核酸（RNA）和蛋白质复合体成功组对出人工结构物。一种将RNA弯曲成60度角的蛋白质引起该科研组的极大关注，将这种蛋白质粘着在RNA的特殊碱基排列上．     

新疆阜康市阜试1井煤层气产气分析及小井网布设建议

本文通过对新疆阜康市东40km处白杨河西阜试1井钻井、排采情况的分析,44号煤层洞穴完井和42号煤层高能气体射孔压裂效果不明显,导致该生产试验井产气量很低。本文建议对阜试1井采用清水加沙压裂,以提高其产气能力,并根据高倾角地层的特点,提出布设"梯形井网"的方式,来提高综合产气能力。     

Noncoding RNAs: Different roles in tumorigenesis

A major portion of the mammalian genome is transcribed to produce large numbers of noncoding RNAs(ncRNAs).During the past decade,the discovery of small RNAs,including the microRNAs(miRNA) and small interfering RNAs(siRNA),has led to important advances in biology.The breadth of the ncRNA field of study has substantially expanded and many recent results have revealed a range of functions that can be attributed to the miRNAs and other ncRNAs.For example,H19 RNA,HOTAIR RNA,transcribed ultraconserved regions(T-UCRs),natural antisense RNA,transfer RNA and mitochondrial noncoding RNA have been suggested to play important roles in cancers and other diseases as well as in diverse cellular processes.In this review,we focus on the current status of several classes of ncRNAs associated with cancer with the emphasis on those that are not microRNAs.     

徐有贞及其水箱放水实验

徐有贞（１４０７～１４７２年）是明代一位历正统、景泰、三顺三朝的大臣，就其政治表现，史家多将他列入奸传，但他又是一位博学多才的学者。景泰四年（１４５３年）底，徐有贞命往山东张秋治水，为说服明代宗及众朝臣同意其“开分水河”的治水主张，他做了水箱放水实验。已有学者注意到《物理小识》中有关此实验的记载，但或不解其意，或言之有误。该文通过史料分析和对徐有贞水箱放水实验的物理学解释，得出以下结论：徐有贞的确     

小企业发展与就业

小企业发展对于促进就业起着举足轻重的作用。中国就业面临着严峻的形势 ,这种形势不仅是短期的而且是长期的。同时 ,小企业的发展也存在着许多问题。通过发展小企业促进就业 ,不仅国内如此 ,国际上也是如此。中国未来就业的新增长点在于小企业的发展 ,小企业发展与就业增长有着极其密切的关系。由此提出了促进小企业发展的若干措施     

地高辛掺入法检测HCV RNA含量在肝病诊断中的应用

目的：研究血清HCVRNA含量与HCV感染者肝病程度的关系。方法：应用地高辛掺入法检测血清HCVRNA含量。在PCR过程中将DIG－dUTP掺入到PCR产物中去，再用PCRELISA法检测PCR产物，结合标准参考样本而达定量目的。结果：丙肝后肝硬化组血清HCVRNA含量显著高于丙型肝炎组。结论：地高辛掺入法检测血清HCVRNA含量可以为HCV感染者的病情判断提供科学依据。