芽殖酵母细胞周期过程不同时期的定量观测

在芽殖酵母中构建CDC10-mCherry和SPC42-mCherry荧光蛋白, 作为酵母细胞周期不同时期的报告系统。根据酵母细胞中芽环(CDC10-mCherry)的产生和消失以及纺锤体极体(SPC42-mCherry)的复制和分离,可以测量细胞周期中 G1期、S期、Early M期和Late M期的时间长度。在此报告系统的基础上, 分别构建S期细胞周期蛋白CLB5-GFP和M 期细胞周期蛋白CLB2-GFP菌株, 实现单细胞观测, 检验报告系统工作的稳定性和准确性。该报告系统可作为研究酵母细胞周期不同时期时间长度等定量生物学问题的背景菌株。     

酵母抽提物在方便面调味中的应用

酵母抽提物是一种优良的天然调味料,在食品行业中用途广泛。简述了酵母抽提物的性能特点及呈味增鲜原理,并对其在方便面调味料中部分或完全替代味精的应用做了重点阐述。     

橙色粘球菌四型菌毛膜复合物的发现

细菌四型菌毛(T4P)不仅在生物膜形成、DNA吸收和侵染致病等生物过程中发挥着重要的作用,同样也能够介导固体界面的滑动运动。尽管T4P具有非常重要的作用,但橙色粘球菌T4P系统中蛋白间组装机制的研究仍处于初级阶段。T4P系统pil N/O/P/Q单基因的敲除与回补实验显示敲除菌株导致橙色粘球菌群体运动完全丧失,而pil N/O/P/Q相应基因回补则恢复突变株群体运动。Pil N/O/P/Q蛋白通过酵母双杂交(Y2H)检测蛋白间的相互作用发现,定位于周质空间的Pil P不仅与外膜蛋白Pil Q的C末端相互作用,也与内膜蛋白Pil O相互作用。遗传学与酵母双杂实验结果显示着Pil P蛋白是联通内外膜的桥梁,暗示着Pil N/O/P/Q蛋白形成跨越内膜、细胞周质和外膜的整合复合物结构,并在菌毛延伸和收缩过程中发挥着重要的作用,为阐明橙色粘球菌菌毛的延伸与收缩的分子机制奠定坚实基础。     

几种废啤酒酵母细胞破壁方法的比较

以废啤酒酵母为原料,根据实验室条件及试验要求,采用研磨法、冻融法、微波法、超声波法破碎废啤酒酵母细胞壁。利用紫外分光光度计测定上清液中可溶性蛋白质的含量为标准,来评价不同破壁方法对细胞内含物的释放程度。为进一步探索经济、高效的废啤酒酵母的破壁方法提供理论依据。结果表明,废啤酒酵母细胞破壁效果为超声波法﹥微波法﹥冻融法﹥研磨法。     

对皖北地区白酒曲粉中酵母菌的分离筛选

本研究针对皖北地区某酿酒企业提供的中温大曲进行了分离、纯化,采用涂布法、划线法对微生物菌群进行恒温培养并对其中的酵母菌进行形态学和生理学的测定后,得到两株酵母菌F1与F2。将得到的菌株F1、F2转接至液体发酵瓶中摇床培养,在此发酵周期中提取发酵液进行各项生化指标的测定,数据分析后得知F1酵母菌的适宜生长p H范围为4.0~6.0,F2酵母菌在发酵过程中p H值呈现上升趋势;在发酵第3d时,两种酵母菌发酵液中残糖含量开始迅速减少,在实际生产过程中则需要及时填补料液以保证发酵过程的顺利进行,该研究为企业生产提供了有效的数据支撑,具有一定的现实指导意义。     

烟草尼古丁去甲基酶基因CYP82E4启动子结合蛋白的鉴定与分析

 以尼古丁去甲基酶编码基因（CYP82E4）上游的启动子功能元件作为诱饵,使用酵母单杂交方法从喷施乙烯利叶片的cDNA融合表达文库中钓取与之相互作用的结合蛋白.研究结果表明,诱饵载体pHIS2/pE4和cDNA融合表达载体pGADT7-Rec2共转化到酵母细胞中的效率为1×10⁶.对文库的筛选结果表明,本研究共获得39个阳性克隆,且阳性克隆的插入片段在850～2500bp之间.将获得的39个阳性克隆进行测序,其中发现1个可能参与基因(CYP82E4）表达调控的锌指蛋白转录因子.下一步将对其功能进行分析,为通过分子育种手段培养低含量去甲基尼古丁的烟草提供实验基础.     

热预处理对细胞分裂效率的影响

以发酵酵母为研究对象，采用超声波空蚀和高压均质方法对细胞进行机械细胞分裂，研究了热预处理对微生物细胞分裂效率的作用。结果表明：酵母悬浮液的温度经热预处理从室温（22±1）℃上升到40-50℃时，达到相同程度的细胞分裂效率所需的能量降低了；当酵母悬浮液的温度经热预处理上升到50℃时，蛋白质浓度达到最大值，蛋白质发生变质的热预处理温度≥52℃。     

甘蔗糖蜜发酵生产麦角固醇的研究

报道麦角固醇产生菌编号ＧＤ－９５－６１的培养优化条件。实验结果表明，培养基组分、甘蔗糖蜜浓度、培养时间，培养基起始ＰＨ值和培养温度等对该菌细胞生物量和麦角固醇含量均有影响。     

Lipid transport in microorganisms

Summary Microorganisms are useful model systems for the study of intracellular transport of lipids. Eukaryotic microorganisms, such as the yeastSaccharomyces cerevisiae, are similar to higher eukaryotes with respect to organelle structure and membrane assembly. Experiments in vivo showed that transport of phosphatidylcholine between yeast microsomes and mitochondria is energy independent; transfer of phosphatidylinositol to the plasma membrane and the flux of secretory vesicles take place by different mechanisms. Linkage of transfer and biosynthesis of phospholipids was demonstrated in the case of intramitochondrial phospholipid transfer. A yeast phosphatidylinositol/phosphatidylcholine transfer protein, which is essential for cell viability, was isolated and characterized. Another phospholipid transfer protein present in yeast cytosol, which has a different specificity, is currently under investigation. Transfer of phospholipids between cellular membranes was also demonstrated with prokaryotes. The cytoplasm and the periplasma of the gram-negative facultative photosynthetic bacteriumRhodopseudomonas sphaeroides contain phospholipid transfer proteins; these seem to be involved in the biosynthesis of prokaryotic membranes.