菊粉内切酶在毕赤酵母中的表达及酶学性质测定

为了实现菊粉内切酶在毕赤酵母(Pichia pastoris)中的高活性表达并对表达的菊粉内切酶酶学性质、水解菊粉的产物进行分析。通过下载无花果曲霉菊粉内切酶基因的编码序列,做了密码子优化后进行全基因合成,然后在毕赤酵母GS115中表达。对表达的菊粉内切酶的酶活、最适反应温度、最适pH值、热稳定性进行了分析,最后对酶水解菊粉的产物进行了高效液相色谱(HPLC)分析。摇瓶表达的酶活力为420 U/mL,酶的最适反应温度为55℃,最适反应pH为6.0。HPLC分析表明:表达的菊粉内切酶酶解底物菊粉的主要产物为低聚果糖,聚合度为3～5之间。构建的工程酵母可以高效表达菊粉内切酶,可以用于生产低聚果糖。     

菊粉珍珠奶茶的研制

将一种功能性食品基料—菊粉,分别添加到珍珠奶茶中,制备新型珍珠奶茶产品;以茶叶与水的比例、浸提温度、一次浸提时间、二次浸提时间进行正交试验,优化茶汁的浸提条件;以珍珠感官评定得分为指标,考察菊粉的添加量、红糖的添加量、淀粉糊化温度、淀粉糊化时间、进行单因素和正交试验选出珍珠的优化配方和制作工艺.     

分解菊粉微生物的筛选和初步鉴定

应用富集培养定向筛选技术，从菊芋根际土壤中分离到１８０余株分解菊粉的各类微生物。通过透明圈法初筛及摇瓶复筛。获得产菊粉酶能力是最高的霉菌菌株ＡＪ１４０５，最高酶活可达１３．２℃ｍｏｌ．ｍｉｎ＾－１，初步鉴定为黑曲霉。     

高效液相色谱法测定菊粉酶解产物

采用高效液相色谱法以Shim-pack CLC-NH₂ 柱为分析柱，乙腈与水(体积比为7∶3)为流动相，以RID-6A示差折光仪为检测器，测定了菊粉酶解产物中的葡萄糖、果糖和蔗糖 ,为菊粉酶解产物的测定提供了科学依据。     

产菊粉酶丝状真菌菌株的筛选及产酶发酵条件的研究

经初筛和复筛,从菊芋周围土壤中筛选出酶活力较高的1株丝状真菌A24,经进行菌种鉴定,确定为黑曲霉.经单因子试验和多因子的正交试验分析,确定了产酶最高的最适条件为:3%菊芋汁、0.5%牛肉膏、2%(NH4)2HPO4、1?CO3、、初始pH 6.5,摇瓶转速160 r/min,28℃培养96 h,菊粉酶活力最高为30.2 U/ml.     

从菊芋制备菊粉糖液的方法和菊芋干片成分分析

通过多种方法开展试验并对其结果进行比较，建立了用菊芋制备菊粉糖液的最佳方法。对菊芋干片主要的成分的分析表明：含菊粉５４．０７％，蛋白质８．８６％，脂肪１．４５％，粗纤维３．５６％，灰分３．６５％，水分８．３９％。     

克鲁维酵母y—85菊粉酶水解菊粉的研究及其中试

克鲁维酵母（Ｋｌｕｖｅｒｏｍｙｃｅｓｓｐ．）Ｙ－８５在菊粉提取液培养基中生长产菊粉酶，其细胞和胞外和炙粉酶活力分别约占菊粉酶总活力的７６％和２４％，试验中以酶发液酶液，该酶的Ｓ／Ｉ值为１５．２酶液在５０，５５与６０℃下保温１ｈ，活力分别残留１００％，９６％和６５％，在８℃下放置７ｄ１４ｄ酶活力分别残留９８％和９６％，在ｐＨ３．６～７．０内，酶活性十发稳定，５ｍｍｏｌＬ－半胱氨酸和Ｆｅ＾＋２分别可使     

分解菊粉微生物的筛选和初步鉴定

应用富集培养定向筛选技术，从菊芋根际土壤中分离到１８０余株分解菊粉的各类微生物．通过透明圈法初筛及摇瓶复筛，获得产菊粉酶能力最高的霉菌菌株ＡＪ１４０５，最高酶活可达１３·２μｍｏｌ·ｍｉｎ－１，初步鉴定为黑曲霉     

菊芋的酶降解及其综合利用

菊芋富含菊粉,菊粉经菊粉酶一步酶解,可生产高果糖浆．报道了菊芋发酵生产菊粉酶、高果糖浆、酒精等研究结果,国内外研究进展以及酶解产物的综合利用．经诱变选育出的高产突变株ＡＬ１５４ 菊粉酶的活力达１４６ ．３ μ／ｍＬ,比出发株提高近３ 倍,菊粉酶酶解菊芋提取液的最适工艺条件为：ｐＨ５ ．０ ,６０ ℃,底物总糖浓度１０％ ～２０ ％ ,酶用量３ ．０ μ／ｇ菊糖,酶解时间１０ ｈ ,底物降解率达９７ ．２ ％ ,酶解产物中果糖占总糖的８６ ．１ ％ ．     

酶法水解菊粉生产果糖

本文综述了微生物菊粉酶作用特点,底物结构和性质,酶和细胞固定化及酶法水解菊粉的一些动力学参数.