牡蛎共生细菌的分离、鉴定及次级代谢产物生物活性研究

对日照海域野生牡蛎共生细菌进行分离鉴定,研究其次级代谢产物的生物活性.采用常规平板分离方法对牡蛎共生细菌进行分离、培养并进行分子生物学鉴定;采用改良Ellman法和DPPH自由基清除法对共生菌的次级代谢产物进行抑制乙酰胆碱酯酶(AChE)和抗氧化活性筛选.结果表明,从日照海域野生牡蛎中共分离得到62株共生细菌,其中,4株属于孤菌属,6株属于芽孢杆菌属,4株为鲁杰式菌属,3株为黄杆菌属,3株为交替单胞菌属,1株为嗜热脂肪芽孢杆菌属,其余均为交替假单胞菌属。共生细菌中对AChE具有较强抑制活性的有13株,尤其是菌株HYML-1-11和HYML-1-62,抑制AChE的IC_(50)值分别为5.01和4.53μg·mL~(-1);具有一定抗氧化活性的有22株,其中HYML-1-6、HYML-1-11、HYML-1-18、HYML-1-24、HYML-1-39、HYML-1-47和HYML-1-62号菌株的次级代谢产物(5μg·mL~(-1))对DPPH自由基的清除率均达40%以上.     

曲面响应法探讨牡蛎壳制备丙酸钙的工艺流程

以牡蛎壳为原料,从中制备丙酸钙,并对其进行工艺优化。以丙酸钙的产率为指标,在单因素的研究基础上通过曲面响应实验得到制备过程的最佳工艺条件:反应的回调p H为7～8,反应时间为91. 83 min,壳酸比为1. 08,液固比为15. 08,所得丙酸钙产率为88. 66%。通过实验得出其优点是:回收了废弃物变废为宝,有利于环境的保护。实验通过曲面响应法探究得出最佳工艺,其周期短,线性回归方程精确度高。通过考察反应时间、液固比、壳酸比3种因素对丙酸钙制备产率的直接影响,应用曲面响应法探究展示的结果更为直观。     

牡蛎多糖制备工艺研究及体外抗氧化活性评价

以新鲜牡蛎为原料，通过酶解法制备牡蛎粗多糖，再经Sevage法脱蛋白和Sephadex G-200凝胶柱层析分离，浓缩、冷冻干燥后，制得纯化牡蛎多糖.对牡蛎多糖制备中各个阶段的组分进行体外抗氧化活性检测，最后利用傅里叶红外光谱(FTIR)分析纯化牡蛎多糖的化学键和官能团.结果表明，酶解法提取的牡蛎粗多糖得率达到3.69%,纯化操作并不会显著改变牡蛎多糖的抑制羟自由基能力，但纯化牡蛎多糖具有较好的抗超氧阴离子自由基能力(64.97 U·L^-1),且含有吡喃糖苷3个特征吸收峰(1 154.84、1 080.63、1 021.93 cm^-1),为一种α型吡喃糖，研究结果可为今后牡蛎多糖的制备与应用奠定基础.     

太平洋牡蛎肌肉蛋白的模拟胃肠液消化研究

采用美国药典提供的模拟胃液、肠液配方,通过十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)和免疫印迹法(Western blot),分析了太平洋牡蛎肌肉过敏蛋白和非过敏蛋白在体外模拟胃液、肠液消化稳定性的差异.结果表明:在模拟胃液中,非过敏蛋白均能被胃蛋白酶快速降解,而主要过敏蛋白原肌球蛋白在60 min时仍未被...     

用牡蛎制备高温吸碳材料的研究

牡蛎白垩层是一种天然方解石质多孔微结构材料,以其为原料在900℃、950℃和1000℃三个温度下制得吸碳材料。产物通过X射线粉末衍射（XRD）、差热-失重（DTA-TG）进行分析,以950℃煅烧条件时吸碳效果最好。高温下吸碳反应温度范围较宽,约从400℃开始到890℃结束;释放CO2的温度范围较短,约从890℃到935℃。高温吸碳过程可以分成两个阶段,第一阶段从400℃到氢氧化钙分解结束,第二阶段从氢氧化钙分解结束到碳酸钙开始分解。其中在第一阶段吸碳反应速度比第二阶段要快。     

紫外辐射诱导牡蛎细胞DNA损伤的单细胞凝胶电泳检测

以牡蛎为研究对象,建立了水产动物DNA损伤的单细胞凝胶电泳检测方法.分别以20W紫外灯距离30 cm照射牡蛎血液细胞30、60和120 s,然后用单细胞凝胶电泳技术检测细胞DNA的损伤.结果表明:未照射的细胞未受损伤,在电场中核DNA几乎不泳动,染色后呈圆形的荧光团,无拖尾现象.紫外照射后细胞核DNA均不同程度受损,且拖尾率、尾长、尾矩、Olive尾矩等指标值均随着照射时间加长而增加,DNA损伤程度与紫外照射时间之间存在明显的时间效应关系.研究结果为我国海洋环境中辐射防护研究和辐射毒理学检测提供新的研究方法和思路.     

太平洋牡蛎精子形成的研究

透射电镜下研究了太平洋牡蛎（Crassostrea gigas Thunberg)的精子形成过程，精子细胞中含有前顶体颗粒，线粒体，高尔基体，中心粒等多种细胞结构，线粒体，前顶体颗粒的数量较多，在精子形成过程中，前顶体颗粒逐渐汇集，愈合成顶体泡，顶体泡覆盖在细胞核的一端逐渐发育为顶体，线粒体则向顶体相反的方向移动，最后移到核后端形成4个较大的线粒体球；中心粒移到核后端由远端中心粒径形成轴丝，细胞核发生致密，形态发生变化，最后形成杯状的精子核，多余的细胞质被抛弃。     

特蛎口服液抗疲劳作用的研究

以小鼠负重游泳时间、血尿素氮和血乳酸浓度为指标，探讨了牡蛎口服液的抗疲劳功能。结果显示，以１．６７，８．３３和２５．０ｍＬ／ｋｇ．ｄ低中高三个剂量级喂养小鼠２２天，低和中剂量组可显著延长小鼠重游泳时间（Ｐ〈０．０５）；低中高三个剂量均可显著降低血尿互氮和血乳酸含量（Ｐ〈０．０５）。根据保健食品评审标准，牡蛎口服液具有抗疲劳保健功能。     

牡蛎酶解物对慢性不可预知温和应激斑马鱼抑郁行为改善作用研究

为探究牡蛎酶解物的抗抑郁作用,采用慢性不可预知温和应激斑马鱼模型,将牡蛎酶解物分为低、中和高浓度三个剂量组,检测其对斑马鱼行为学、体重指数产生的影响,进而通过酶联免疫法测定斑马鱼外周皮质醇含量和脑部细胞因子表达水平。结果表明,经过5周慢性不可预知温和应激后,斑马鱼出现了明显的抑郁样行为,而牡蛎酶解物可以有效改善斑马鱼抑郁样行为,并能有效改善应激后斑马鱼体重减小的现象;同时,牡蛎酶解物可降低斑马鱼外周皮质醇的水平,降低TNF-α在脑部的表达。研究结果表明,牡蛎酶解物可以通过调节应激激素水平以及抑制慢性不可预知温和应激诱导的炎症细胞因子的表达来改善慢性不可预知温和应激诱导抑郁样行为。本研究旨在深入探究牡蛎酶解产物的神经保护作用,并为其活性成分的进一步开发提供理论依据。