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1.
乳糖诱导pET载体表达重组蛋白的研究   总被引:33,自引:4,他引:29  
以重组人B淋巴细胞刺激因子(hBLyS)蛋白表达宿主菌株BL21(DE3)(pET30(a)/hBLyS)作为研究对象,借助SDS-PAGE分析方法,对于用乳糖诱导由T7lac启动子控制的重组目的产物的表达规律进行了优化研究。分析比较了诱导的起始阶段、所需的乳糖浓度和诱导持续时间等参数对重组产物表达的影响。实验结果表明,对T7lac启动子控制的重组目的产物,乳糖可以作为诱导剂;在对诱导条件进行优化控制的前提下,乳糖诱导目的产物的绝对表达量虽然不及IPTG,但相对成本却比IPTG低得多。研究结果为乳糖作为诱导剂应用于重组基因工程药物工业化生产提供了一定的参考。  相似文献
2.
植物水孔蛋白研究进展   总被引:21,自引:0,他引:21  
植物水孔蛋白在植物体内形成水选择性运输通道,在植物种子萌发、细胞伸长、气孔运动、受精等过程中调节水分的快速跨膜运输。有些水孔蛋白还在植物逆境应答中起着重要作用,因此研究水孔蛋白与植物抗旱性的关系引起了广泛关注。对水孔蛋白的发现、结构、分类、分布、调控及研究方法等方面进行了综述。  相似文献
3.
高等植物启动子及其应用研究进展   总被引:20,自引:0,他引:20       下载免费PDF全文
高等植物基因的表达调控已成为分子生物学研究领域的热点和前沿,启动子是基因表达调控的重要元件.深入研究启动子的结构和功能,建立可用于植物转基因表达的时、空、量三维调控系统,可为功能基因组学研究及通过基因工程技术精确地调节植物代谢提供全新的思路.文中从高等植物启动子的类型、结构和功能入手,着重介绍了启动子研究及应用的最新进展.  相似文献
4.
RBM13 cDNA的克隆及其表达谱分析   总被引:19,自引:19,他引:0  
从人胎脑cDNA文库中克隆到一条长3479bp的cDNA,它含一个长903bp的开放阅读框架,拟编码一个300个氨基酸的蛋白质,其分子质量为35397u,等电点为5.35,与酵母MAK16蛋白的同源性为41%,该编码蛋白有一个双侧核定位信号motif和一个RNA结合motif,将这一新cDNA序列推导的蛋白命名为RNA结合基序蛋白13(RBM13),基因定名为RBM13,用RBM13基因的cDNA探针进行Northern杂交,检测到3.6kb和2.2kb二种长度的转录本。在心脏,骨骼肌,肾脏和肝脏中有较高表达。  相似文献
5.
植物体细胞胚胎发生机理的研究进展   总被引:19,自引:0,他引:19  
介绍了植物体细胞胚胎发生技术的产生历史及国内外的研究进展;从细胞学、生物化学和分子生物学等方面综述了体细胞胚胎发生机理的研究现状;分析了体胚再生植株的遗传稳定性以及体胚系统作为遗传转化系统的重要应用价值和最新研究成果;同时对植物体胚发生研究中试验设计的重要性作了述评。  相似文献
6.
影响根癌农杆菌介导的香蕉基因转化早期的主要因素   总被引:19,自引:1,他引:18  
用含质粒载体pCAMBIA2301的根癌农杆菌(Agrobacterium inoculation)转化“641”香蕉(Musa AAA Cavendish subgroup cv.64-1)的薄片外植体,通过测定GUS基因瞬时表达率,对转化早期的主要影响因素进行了研究。结果表明:农杆菌EHA105较适合于介导转化,将薄片置于固体高渗培养基上培养4h后,通过真空减压法使农杆菌接种于其上,获得了较高的瞬时表达率(41.67%),是对照(8.33%)的5倍,农杆菌悬液稀释5倍用于转化较好,共培养3d为宜,薄片外植体越靠近根部,瞬时表达率越高。而外植体预培养会降低瞬时表达率。  相似文献
7.
胡萝卜抗冻蛋白在大肠杆菌中的高效表达   总被引:18,自引:1,他引:17  
以pET—11a为载体构建了胡萝卜抗冻蛋白非融合表达的重组质粒,并在大肠杆菌菌株BL21(DE3,pLysS)中成功地进行了高效表达。表达的蛋白质以包涵体的形式存在,相对分子质量为36800。经正交试验得到了优化的诱导表达条件。包涵体经各种缓冲液洗涤纯化、溶解、复性和超滤浓缩后,经SDS—PAGE电泳检测,纯度达单一带水平。生物学活性研究表明,重组表达的胡萝卜抗冻蛋白具有很强的热滞活性和提高细菌耐寒性的作用。  相似文献
8.
人类“锌指”蛋白基因ZNF191 cDNA的分离与克隆   总被引:16,自引:1,他引:15  
9.
电针对佐剂性关节炎大鼠炎症局部阿片肽基因表达的影响   总被引:14,自引:2,他引:12  
以佐剂性关节炎大鼠为炎症痛模型,选择悬钟,昆仑穴位,采用原位杂交组织化学方法,观察电针(EA)对大鼠炎症局部阿片肽前体物质前阿黑皮素(POMC)和前脑啡肽原(PENK)mRNA的表达,结果EA可以促进炎症局部免疫细胞中POMC和PENK mRNA的表达,使阿片肽的合成和释放增加,以实现外周炎症局部的镇痛作用。  相似文献
10.
棉花类耐盐锌指蛋白基因的克隆与结构分析   总被引:14,自引:0,他引:14  
从棉花花瓣cDNA文库中随机挑选部分克隆,经测序发现一个与拟南芥耐盐锌指蛋白基因同源的cDNA(CSTZ),CSTZ序列全长1012bp,开放阅读框共编码272个氨基酸,含典型的植物双锌指(Cys2/His2)结构区,Northern杂交证实,CSTZ的表达随棉花幼苗钠盐处理浓度的升高而增强,在棉花花龄期,CSTZ基因在叶片,根,花瓣和花药组织中大量表达,在柱头组织中表达相对较弱。  相似文献
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