液质联用分析金钱草醇提物中的化学成分

通过建立一种快速、精确、灵敏度高、耗用量低的LC-ESI-MS分析方法,用于分析金钱草粗提物这类多组分的复杂体系,拟为建立金钱草的指纹图谱提供依据.结果显示:共检测到物质峰295个,在排除空白样品峰、一级质谱中所包含的二级质谱碎片峰及无活性的糖类物质峰后,确定分子式的化合物峰有43个,其中,已报道的成分有12个,未报道的新化合物31个(包括有黄酮类活性物质2个),针对这些未报道的物质的分析,有助于后期进一步有选择地分离提取金钱草的活性新成分.     

体外诊断试剂有证标准物质研究现状和趋势

本文简述了研制、使用体外诊断试剂有证标准物质的必要性，介绍了国际上美国国家标准和技术研究院NIST、欧盟IRMM等发达国家及地区体外诊断试剂有证标准物质研制现状，综述了国内体外诊断试剂、尤其是具有良好互换性的血清基质有证标准物质研发情况，展望了今后体外诊断试剂有证标准物质的研发重点。     

人血小板多态性抗原HPA-1a／PA-1b在CHO细胞中的表达及功能研究

为了在体外研究HPA-1抗原的多态性，同时建立一种更简便灵敏的检测抗HPA-1同种(异型)抗体的方法，将含有HPA-1a和HPA-1b的DNA质粒分别转染CHO细胞(中国仓鼠卵巢细胞)并获得稳定表达陆HPA-1a和HPA-1b的细胞株．流式细胞分析结果表明，CHO细胞结合抗HPA-1a同种(异型)抗体的能力与细胞表面融整合素表达量直接相关．同时，针对HPA-1a表位的单克隆抗体SZ21仅能抑制CHOβ3HPA-1a细胞的粘附，对CHOβ3HPA-1b细胞却没有影响,抗HPA-1a参照血清能阻断C-HOβ3HPA-1a细胞的粘附，但对C-HOβ3HPA-1a细胞却影响甚微．结果表明，CHO细胞模型可以成功地用来表达并研究HPA-1a的多态性及其抗原特性，同时可以作为用于临床检测抗HPA-1a同种(异型)抗体的一种替代方法．     

MTMR14基因缺失促进小鼠成肌细胞增殖和分化

为研究磷酸肌醇磷酸酶肌管相关蛋白14(MTMR14)在骨骼肌发生中的作用,通过组织切片和细胞培养技术研究了MTMR14敲除对骨骼肌的组织结构、成肌细胞分化和增殖的影响.结果表明:MTMR14敲除小鼠的腓肠肌和比目鱼肌的结构较同窝野生型小鼠产生了明显变化,MTMR14敲除小鼠的成肌细胞的分化和增殖成肌小管过程较野生型显著加快.MTMR14基因敲除后小鼠肌管细胞中平均细胞核数显著增加.故MTMR14基因缺失/敲除导致骨骼肌组织结构异常,干扰了骨骼肌肌肉发生过程中的成肌细胞的增殖和分化.     

hb1f广泛表达转基因小鼠品系的建立及其组织形态学分析

人核受体hB1F是核受体超家族Ftz-F1亚家族的新成员, 对其同源基因的研究提示它可能在生物体的胆固醇代谢平衡调节中有重要作用. 在通过显微注射法获得携有hb1f转基因的Founder小鼠后, 各Founder小鼠分别与正常C57小鼠杂交, 同一Founder小鼠经PCR鉴定阳性的F1代间再相互杂交建系. 经F1, F2以及测交子代的分子鉴定, 已成功完成了hb1f广泛表达转基因小鼠品系的建立, 同时也对建系小鼠做了初步的组织形态学分析.     

血红蛋白M的毫微秒荧光的研究

血红蛋白M是导致遗传性高铁血红蛋白血症的一种异常血红蛋白。据现已报道的有五种血红蛋白M,本文研究的是在我国上海发现的血红蛋白M,通过一级结构分析表明,它是属于HbMlwat[α_(87)(F8)His→Tyr]。这个异常血红蛋白的α链第87位的组氨酸被酪氨酸所替代,其血红素中的铁原子处于三价状态,形成高铁血红蛋白故不能与氧分子结合,因而不能进行正常生理活动,使患者呈青紫症状,对此已有较多的研究,但未见对这分子进行毫微秒荧     

多药物性耐药的分子机制及其与P^53的关系

对多药性耐药分子机制的探讨与阐明,将为耐药性的逆转,提高化疗药物疗效提供理论基础并有潜在的实际意义．     

肿瘤基因治疗新策略—RNA干扰

RNA干扰(RNAi)是一种由双链RNA介导的基因沉默现象. 目前介导RNAi的方法很多, 包括采用非病毒性和病毒性载体介导. 最近研究发现, 以病毒为载体介导RNAi具有显著的优越性. 病毒载体通过表达70 bp左右的发夹结构RNA (shRNA), 在Dicer酶的催化作用下, 切割成21 bp左右的双链小分子干扰RNA (siRNA), 从而有效沉默靶向基因. 运用RNAi技术可设计一系列有效的抗癌策略, 如沉默癌基因、促进调亡、调控细胞周期、抗血管生成以及提高传统化疗、放疗的疗效等. 这一技术开辟了肿瘤基因治疗的新途径. 本文就RNAi技术在肿瘤基因治疗中的应用与研究作一评述.     

重组肠激酶催化亚基在毕氏酵母中的高密度发酵、纯化及活性鉴定

应用RT-PCR和搭桥PCR技术,扩增肠激酶催化亚基的cDNA,测序正确后克隆至酵母分泌型表达质粒p9K中.将重组质粒p9K/EKLC转化至表达宿主pichia pastoris GS115,筛选得到高效表达重组牛肠激酶催化亚基工程菌.经甲醇诱导,目标蛋白肠激酶催化亚基(EKLC)表达并分泌至酵母培养基中.高密度发酵后,经超滤浓缩,采用SP Sepharose F.F一步纯化得到纯度达98%以上的重组目的蛋白,活性达到2.3 U/uL.上述结果表明,本实验成功获得了肠激酶催化亚基,它是一种能将融合蛋白中目标蛋白与载体蛋白裂解释放的有效工具酶.