抗条纹叶枯病基因qSTV11~(KAS)新分子标记建立及23种香型水稻qSTV11~(KAS)基因的调查分析

根据抗条纹叶枯病品种"秀水123"与易感品种"日本晴"抗条纹叶枯病基因qSTV11~(KAS)在距离起始密码子第一个脱氧核苷酸+640处的差异,建立了一种能够更便于区分qSTV11~(KAS)基因型的CAPS(BtgⅠ)分子标记及检测方法,并对23种香型水稻的qSTV11~(KAS)基因进行调查分析.结果表明,CAPS(BtgⅠ)分子标记可以用来区别水稻是否含有抗条纹叶枯病基因qSTV11~(KAS)及基因型;在检测的23种香稻中,仅有"中香1号"、"青香软粳"和"泰国香稻"3种水稻含有与"秀水123"相同的qSTV11~(KAS)抗性基因.本研究为今后分子标记辅助选育抗条纹叶枯病香型水稻新品种和筛选条纹叶枯病新的抗性基因资源应用奠定了基础.     

利用安全性转基因技术导入反义蜡质基因降低稻米直链淀粉含量

利用安全性转基因技术中的共转化法, 将分别含有p13W₄双元载体(含有潮霉素抗性基因、gus报告基因以及反义蜡质基因片段)和p13W₈双元载体(无潮霉素抗性基因和gus报告基因, 只含有反义蜡质基因片段)的根癌农杆菌以1:9的比例混合导入超2-10高产水稻新品系中, 获得34棵转基因植株. PCR分析转基因T₀代植株, 结果显示, 有15株是共转化植株, 共转化率为44.1%. 利用p13W4双元载体上的gus报告基因从T₁代种子中淘汰具有报告基因及抗性标记基因的转基因后代, 再利用PCR检测从T₁代植株中获得只有反义蜡质基因的植株. Southern blot杂交分析证实, p13W₈双元载体T-DNA已整合进入无抗性标记及报告基因的转基因后代基因组中. T₂代成熟种子直链淀粉含量分析显示, 转基因植株糙米直链淀粉含量比对照有不同程度的下降, 幅度最大的比对照降低28.61%. 由于获得的转基因后代只有目的基因而无抗性选择标记基因和报告基因, 而且水稻中的稻米直链淀粉含量已降低, 它们既可被用于筛选软米材料, 也可视为是能够用于其他水稻稻米食味品质改良的水稻新资源.     

总蛋白含量不同的水稻品种谷蛋白含量分析及Gt1启动子序列比较

选取3种总蛋白含量差异较大的水稻为材料，在分析其谷蛋白含量的基础上，克隆它们的Gt1启动子，并采用vector NTI软件对这3个Gt1启动子序列进行比较．结果显示，在不同总蛋白和谷蛋白含量的水稻品种中，Gt1谷蛋白基因启动子是有差异的．     

四个杂交粳稻的蛋白质、赖氨酸、直链淀粉含量和MDH活性测定

本文分析比较了正在大面积推广种植的杂交粳稻寒优１０２７以及３个新选育的杂交粳稻８优１６１、寒优１９５和寒优３５６的蛋白质含量、赖氨酸含量、赖氨酸相对合量、直挂淀粉含量和苹果田脱氢酶（ＭＤＨ）活性．结果显示了３个新选育的杂交粳稻分别在不同的方面胜过对照寒优１０２７．寒优１９５的直链淀粉合量（１２．１％）明显低于对照寒优１０２７（１７．０％），赖氨酸的相对合量（３．６８％）高于对照寒优１０２７（３．１８％），统计分析两方面的差异都达极著水平（Ｐ＜０．０１）；８优１６１的蛋白质含量（９．６９％）比对照寒优１０２７（８．７８％）高１１．１％，统计分析差异达极显著（Ｐ＜０．０１）；寒优３５６４白质含量（９．１５％）比对照寒优１０２７高．出５．５％，两者差异也达极显著（Ｐ＜０．０１），而且寒优３５６在苗期的ＭＤＨ活性高于对照寒优１０２７，统计分析两者差异显著（Ｐ＜０．０５），这表明寒优３５６在生长后期的每生日穗总粒数，每穗实粒数和每实粒重可能会超过对照寒优１０２７．建议有关部门在今后的水稻生产中，可根据各自不同的需要，推广利用不同的杂交粳稻．     

水稻抗条纹叶枯病分子标记在不同品种中的扩增比较

以感水稻条纹叶枯病品种＂日本晴＂、高抗品种＂kasalath＂以及14个目前在我国长三角地区水稻生产中被认为在抵抗条纹叶枯病方面具有较好效果的水稻品种为材料,分析比较了14对分子标记引物扩增16个水稻品种基因组获得的DNA产物.结果显示：在14对分子标记引物中,有8对在扩增感病品种＂日本晴＂和高抗品种＂Kasalath＂水稻基因组时可获得多态性条带.因此推断这8个标记可在以这两个品种为亲本的抗条纹叶枯病选育中使用;并且,本研究结果还将为利用本试验收集的14个水稻品种为亲本的分子标记辅助育种提供重要的背景信息.     

重要籼型杂交稻亲本“93-11”稻米食味品质的改良

以目前两系杂交稻大量应用的籼型水稻"93-11"和实验室已转化只含双份反义蜡质基因无抗性基因和报告基因纯合水稻"B3"为亲本,通过杂交和多次与"93-11"水稻回交以及分子标记辅助选择反义蜡质基因,将双份反义蜡质基因渗入到"93-11"水稻品种中,获得两种改良类型"93-11"水稻新材料.主要农艺性状考察、拷种以及糙米重量和体积分析显示,除了千粒重、糙米重量和体积,两种改良后水稻的株高、有效穗、每穗实粒数和结实率都与"93-11"对照水稻差异不显著(P0.05).两种改良后水稻蜡质糙米的直链淀粉含量(5.39%和5.01%)均比"93-11"对照(14.06%)极显著下降(P0.01);同时糙米胶稠度分别为93 mm和101 mm,与"93-11"对照(48 mm)比较也达到极显著差异水平(P0.01).研究为今后改良以"93-11"配组的两系杂交水稻食味品质奠定了重要基础.     

分子标记辅助选育含有抗稻瘟病基因和软米基因两系不育系水稻新品系

以"浦软粳S"为转育亲本,利用分子标记辅助常规育种技术成功培育出含有Pi9,Pita,Pib和Pigm稻瘟病抗性基因及软米基因(Wx~(mq)),同时表现柱头外露率高的两系不育系水稻新品系"2179S"."2179S"不育系茎秆粗壮,矮杆大穗,株高为63.8 cm,柱头外露率平均为60%.研究结果为今后培育具有稻瘟病抗性的优质两系杂交水稻新组合提供不育系亲本.     

“黑农35”和“黑生101”两种大豆品种胚尖再生体系的建立

以高蛋白大豆品种"黑农35"和"黑生101"为供试品材料,采用在分化及伸长培养基中分别添加0.2 mg/L 6-BA和0.2 mg/L IBA浓度激素配比,建立了胚尖再生体系,并分别在芽诱导、不定芽伸长和生根3个环节对两种大豆品种进行了比较.结果显示:"黑农35"大豆芽诱导率高于"黑生101"大豆22.15%,两者在已出芽外植体上的平均出芽数比较接近;"黑农35"大豆不定芽伸长速度大于"黑生101"大豆,同时"黑农35"大豆大于1 cm的芽个数也多于"黑生101"大豆;"黑生101"大豆生根率以及根系生长状态好于"黑农35"大豆.本研究为今后以"黑农35"和"黑生101"大豆为材料进行遗传转化研究奠定了基础.     

两种不同花色矮牵牛快繁体系的建立

为了建立紫红花和紫花矮牵牛诱导不定芽途径,以这两种矮牵牛为材料,在MS基本培养基基础上,添加不同浓度的6-BA和IBA激素,共设计了9种培养基组合,对两种花色矮牵牛叶片进行快繁研究．试验结果表明：不同品种矮牵牛快繁的激素组合是有差异的,紫红花矮牵牛叶片诱导不定芽的最适培养基为MS4-1．0mg／L6-BA4-0．2mg／LIBA,紫花矮牵牛叶片诱导不定芽最适培养基为MS＋2．0mg／L6-BA＋0．5mg／LIBA．为今后以紫红花和紫花矮牵牛为受体进行遗传转化获得转基因植株的无性快繁建立有效再生体系．     

分子标记辅助选育香型软米水稻“上师大18号”

以香型软米水稻"青香软粳"作为软米基因供体亲本,以香型非软米水稻"光明粳2号"作为转育亲本,结合软米基因分子标记辅助筛选,成功培育出香型软米水稻"上师大18号"."上师大18号"水稻全生育期约148 d,早于"青香软粳"水稻约5 d."上师大18号"水稻主要农艺性状和产量性状都与"光明粳2号"接近."上师大18号"稻米直链淀粉质量分数为8. 2%,符合软米特征."上师大18号"水稻的成功选育有助于上海地区推广生育期相对较短的香型软米水稻.