藏药材纤毛婆婆纳乙酸乙酯提取物的抗癌活性及其机制研究

采用MTT法检测纤毛婆婆纳(Veronica ciliata Fisch.)乙酸乙酯提取物(ethyl acetate extract,VEAE)对五种不同癌细胞(A549,Hela,U20S,MCF-7和SMMC-7721)的增殖抑制作用,筛选出对VEAE最敏感的细胞,并进一步运用DAPI染色、Annexin V/PI双染及荧光定量PCR(qRT-PCR)来探究其作用机制.MTT结果显示,VEAE对五种癌细胞的增殖均有抑制作用,并呈现时间和剂量的依赖效应,其中对MCF-7细胞的抑制作用最为显著,处理48h后其IC50达到最低,为63.42±0.19μg/mL;DAPI染色和Annexin V/PI双染结果发现,VEAE处理MCF-7细胞后,细胞皱缩变圆,凋亡细胞的数量增加,从对照组的5.00%上升到47.45%;qRT-PCR结果表明;VEAE处理MCF-7细胞后,凋亡基因Caspase-3,Caspase-9和Bax的表达上调,抗凋亡基因Bcl-2的表达下调.由此表明VEAE能抑制癌细胞的增殖,诱导细胞发生凋亡,其机制可能是通过调控与细胞凋亡相关基因的表达来实现.     

黑果枸杞花色苷提取工艺优化及抗氧化研究

为探究黑果枸杞花色苷最佳提取工艺和抗氧化活性,采用超声酶辅助提取法、乙醇/硫酸铵双水相萃取法、乙醇/磷酸二氢钠双水相萃取法提取黑果枸杞花色苷,通过响应面优化提取工艺,并使用t-BHP诱导BRL 3A细胞建立抗氧化模型来探索黑果枸杞花色苷的氧化应激保护作用.结果表明,超声酶辅助提取得率为：（17.92±0.04） mg/g;乙醇/硫酸铵双水相萃取得率为：（15.46±0.31） mg/g; 乙醇/磷酸二氢钠双水相萃取得率为：（15.02±0.19） mg/g.体外抗氧化实验表明,乙醇/硫酸铵双水相萃取的花色苷(LRN)抗氧化活性最强,纯化后的乙醇/硫酸铵双水相萃取的花色苷(LRNA)可通过减少细胞中ROS的产生来缓解t-BHP诱导的氧化损伤.综上所述,该工艺便捷、稳定可用于黑果枸杞花色苷的提取,同时证明了LRN抗氧化活性最强.     

利用响应面优化固态发酵生产毛叶山桐子脱脂果渣发酵饲料

文章利用响应面法对毛叶山桐子发酵饲料的发酵条件进行了优化.实验菌种采用了产朊假丝酵母,实验材料为毛叶山桐子的脱脂果渣.首先利用单因素实验对五个影响发酵的指标进行了研究,然后在单因素的基础上利用Plackett-Burman实验设计筛选出其中显著的三个因子并利用Box-Behnken响应面设计对其进行优化.优化后的条件为发酵温度30℃,料液比1∶1.2,接种量10.5%,硝酸铵添加量8.8%,发酵时间4d.经优化条件发酵后,毛叶山桐子脱脂果渣发酵饲料的粗蛋白由发酵前的8.49%提升到19.13%,脱脂果渣的营养组成变得更加合理.     

UPLC测定纤毛婆婆纳主要环烯醚萜苷成分的含量

建立超高效液相色谱法(UPLC)同时测定纤毛婆婆纳中梓醇、梓苷、胡黄连苷Ⅱ和6-O-藜芦酰梓苷4种主要环烯醚萜苷类成分含量.采用Waters ACOUITY T3色谱柱(100 mm×2.1 mm,1.8μm);柱温为40℃;流动相为乙腈-水(0.1%甲酸+2.5 mmol甲酸铵);流速为0.4 mL/min;检测波长为260 nm.结果表明梓醇、梓苷、胡黄连苷Ⅱ和6-O-藜芦酰梓苷4种主要环烯醚萜苷类成分含量.结果表明梓醇、梓苷、胡黄连苷Ⅱ和6-O-藜芦酰梓苷分别在1.562～50μg/mL(R~2=0.9987)、1.562～50μg/mL(R~2=0.9989)、4.689～143μg/mL(R~2=0.9996)、1.562～50μg/mL(R~2=0.9998)范围内呈现良好的线性关系,平均回收率分别为100.21%(RSD=1.3%)、99.43%(RSD=1.8%)、100.6%(RSD=2.5%)、102.7%(RSD=0.65%).该方法简便、灵敏、经济、可靠,可用于纤毛婆婆纳的质量控制和评价.