模块化工程大肠杆菌从头合成丁香酚

丁香酚是一种绿色生物农药,主要用于防治番茄灰霉病、葡萄霜霉病和马铃薯晚疫病等主要的农业病害．目前丁香酚是从丁香和罗勒等植物中提取制备,其规模和产能受到限制,还存在废渣排放影响生态环境的问题．本研究采用合成生物学和模块化工程策略,设计构建工程大肠杆菌,以期微生物从头合成丁香酚．将丁香酚异源合成途径分成3个模块,分别是上游的阿魏酸合成模块、中游的松柏醇合成模块和下游的丁香酚合成模块,对每个模块进行不同来源基因的组合筛选和表达优化．利用His标签、敲除甲基供体合成途径中的全局调控基因metJ,优化了上游模块(Pc TAL-Hpa BC-At COMT),减少了中间产物咖啡酸的积累,提高了阿魏酸合成．筛选了4CL和醇脱氢酶基因来源,研究了表达模式,获得最优的中游模块是双顺反子表达At4CL1-AtCCR1,单顺反子表达YahK,松柏醇产量最高．对3个酰基转移酶基因和4个丁香酚合成酶基因进行组合筛选,获得最优的下游模块是单顺反子Ph CFAT和GdlEGS2,丁香酚合成最多．最后,在酪氨酸高产底盘中表达丁香酚合成途径,对初始葡萄糖、酵母提取物和诱导剂浓度等进行优化．在适宜的培养基和发酵条件下,丁...     

校企合作工程实践教育基地的建设

为培养适应行业企业需求的工程人才,教育部实施了卓越工程师教育培养计划。工程实践是卓越工程型人才培养的重要环节,校企合作工程实践教育基地建设是实施工程实践教育的稳定保障。天津大学制药工程专业经过多年的探索与实践,结合学校的办学定位和专业特色,从组织管理体系建设、工程实践教育条件建设、双师型师资队伍建设、保障措施与制度等方面提出建设方案,以促进我国高校工程实践教育发展提供参考。     

强化工业大肠杆菌生长特性的研究

大肠杆菌是制药工业中的重要蛋白质药物生产菌株。然而乙酸积累、中心碳代谢负担过重等不良因素严重制约着大肠杆菌的高密度生长。利用Red同源重组技术,构建icd和ptsG双基因敲除大肠杆菌菌株,以分流碳代谢流,提高碳利用效率,最终增加菌体生物量。同时构建ppc过表达质粒,减少乙酸积累。发酵结果显示,构建的重组菌株产酸量大幅减少,pH值平均升高20%,菌体浓度增加了50%,生长特性得到了强化。     

当归多糖的提取分离研究进展

当归多糖具有增强免疫、抗肿瘤和抗辐射等显著生物活性,在医药领域有极其广阔的应用前景。本文综述了当归多糖的提取、蛋白和色素的脱除以及分离纯化的研究进展,为其进一步开发利用提供参考。