Curcin和curcin C与腺嘌呤互作位点的比较分析

麻疯树核糖体失活蛋白curcin和curcin C均具有抗肿瘤活性，但后者的活性水平显著高于前者，为了探索造成这一差异的结构基础，本文采用在线的同源建模预测软件SWISSMODEL，对两种麻疯树核糖体失活蛋白curcin、curcin C的三维结构模型进行预测，采用SYBYL对预测模型进行能量最小化优化，采用PROCHECK、VERIFY 3D和ERRAT软件对优化前后的模型进行质量评估，随后采用AutoDock软件将预测的模型与腺嘌呤进行分子对接分析.结果显示，两种蛋白采用与Ricin A类似的方式与腺嘌呤相互作用，但在相互作用的氨基酸残基种类、数量以及形成的氢键和疏水相互作用上还是存在差异，其中，curcin C与腺嘌呤具有最强的结合能力，curcin则最低.     

高黎贡山南段单型科属分析

通过单型科与单型属来分析高黎贡山南段种子植物区系,结果显示其属于东亚植物区系,在起源上与古热 带亚洲植物区系有一定历史渊源.单种科与单属科在界定区系性质过程中起重要作用,数据分析显示高黎贡山南 段完全符合区系热带边缘和北温带成分南延的性质.     

合成的西红花糖苷体外抗肿瘤活性研究

西红花提取物(saffron extract,SE)具有潜在的抗肿瘤活性.通过以下方法比对SE及合成的西红花糖苷体外抗肿瘤活性的差异并由此分析后者抗肿瘤机制:MTT法比较肿瘤细胞增殖活性,流式细胞术检测合成的西红花糖苷处理后肿瘤细胞的凋亡及其细胞周期的变化,Western blot法探究合成的西红花糖苷对p53基因表达的影响.实验发现,与天然SE比较,合成crocetin、crocin I~crocin III体外抑制肿瘤细胞增殖的能力增强,而HCT116、A549两种细胞对其较为敏感;另外,与空白对照比较,合成的crocetin、crocin I~crocin IV可诱导肿瘤细胞凋亡、阻止细胞周期进程,其机制可能与促进p53基因表达相关.本研究部分揭示了合成的西红花糖苷的体外抗肿瘤活性,并对相关机制进行了一定的探索,为探寻更理想的西红花类抗肿瘤药物提供了体外研究的依据.     

间接酶联免疫法检测麻疯树核糖体失活蛋白

建立了基于单克隆抗体的间接非竞争酶联免疫法用于检测麻疯树核糖体失活蛋白的含量.优化单克隆抗体最佳工作浓度为312.5ng/mL,辣根过氧化物酶标记山羊抗小鼠IgG最佳工作浓度为200ng/mL.该方法的线性范围为25~300ng/mL,线性回归方程为y=0.0024x+0.0322,相关系数R2=0.9985,定量检测限25ng/mL,定性检出限3.0336ng/mL.试验证明该方法准确度较高,且具有较好的重复性和特异性,可以用于实际检测麻疯树种仁核糖体失活蛋白的含量.     

一个麻疯树C2H2型锌指蛋白基因JcZFP1的克隆与表达分析

从麻疯树胚乳cDNA文库中克隆得到一个C2H2型锌指蛋白基因,JcZFP1,全长931bp,开放阅读框全长735bp,编码244个氨基酸残基,等电点pI=7.0,分子量PA=27.38kD.C2H2型锌指结构位于第81至103个氨基酸残基中,包括植物锌指蛋白特有的保守氨基酸序列QALGGH.在该基因的顺式作用元件上发现了与生长发育和逆境胁迫相关的启动元件.荧光定量PCR(qPCR)检测发现,JcZFP1基因在麻疯树各器官中的表达量依次为:绿果皮花叶根茎种仁,且幼嫩器官表达量高于成熟器官;对麻疯树幼苗进行低温、干旱胁迫时,JcZFP1基因的表达量明显增加,表明该基因可能在麻疯树的生长发育及逆境胁迫应答过程中起重要作用.     

影响麻疯树叶片离体再生条件的优化

为建立高效稳定的麻疯树离体再生体系,优化了诱导和分化培养基及培养条件.以无菌苗叶片为外植体,以MS为基本培养基,6-BA 2.0mg/L+2,4-D 0.02mg/L的激素组合对愈伤组织的诱导最有利,6-BA 0.5mg/L+KT 0.5mg/L+IBA 0.1mg/L+GA30.1mg/L的激素组合对不定芽分化最有利.在此基础上针对外植体培养、愈伤组织继代的培养条件和继代次数3个因素进行优化.结果表明:采用麻疯树的无菌苗叶片为外植体,黑暗条件下诱导出愈伤组织,再在黑暗条件下继代一次后转入分化培养基中对不定芽诱导最为有利,分化率达72.59%.分化后得到的不定芽在含IBA 0.2mg/L的MS培养基上生根率达75%.生根苗在添加蛭石的含IBA 0.05mg/L的改良生根培养基中驯化培养后,再经过以蛭石∶腐殖土=1∶1(V/V)为培养基质的套袋培养,移栽后成活率达93%.     

￣（45）Ca跨膜流动测定技术用于中药钙拮抗作用的研究

应用￣（４５）Ｃａ跨膜流动测定技术研究钙拮抗剂ｖｅｒａｐａｍｉｌ、中药西红花（ＣｒｏｃｕｓＳａｔｉｖｕｓＬ．）、“地奥心血康”（ＤＡＸＸＫ）、川红花（ＣａｒｔｈａｍｕｓｔｉｎｃｔｏｒｉｕｓＬ．）及银杏叶（ＧｉｎｋｇｏｂｉｌｏｂａＬ．）等对大鼠主动脉￣（４５）Ｃａ跨膜内流的作用，以确定其对细胞膜Ｃａ￣（２＋）通道影响。实验结果表明：西红花、川红花、ＤＡＸＸＫ对平滑肌细胞膜上电压依赖Ｃａ￣（２＋）通道（ＰＤＣ）和受体操纵Ｃａ￣（２＋）通道（ＲＯＣ）都有阻滞作用，并以西红花的阻滞作用最强；而银杏叶对细胞膜Ｃａ￣（２＋）通道无阻滞作用。     

密蒙花愈伤组织培养研究

密蒙花 ,别名老蒙花、水锦花、虫见死、黄饭花 ,为马钱科 (Ｌｏｇａｎｉａｃｅａｅ )醉鱼草属 (Ｂｕｄｄｌｅｊａ)植物 ,其花蕾及花序是常用中药 ,清热养肝、明目退翳 .用于目赤肿痛、多泪羞明、眼生翳膜、肝虚目暗、视物昏花 .密蒙花富含黄色色素 ,该色素色泽鲜艳 ,着色力强 ,稳定性好 ,而且安全性高 ,因此近年在我国广泛应用于食品生产中 ,特别是近年来国际、国内对密蒙花的需求量急剧增加 ,但是 ,该植物资源受时空限制 ,种子细小如粉末 ,人工栽培量有限 ,生长其需几年时间 ,因此 ,从密蒙花中提取黄色素还远不能满足需求 ,应用植物细胞大…     

创新视野中的“温故”与“知新”探析

"温故而知新",从方法论的角度去认识,把"温故"作为过程意义去理解,"知新"作为盘升飞跃的意义去认识;"温故"是方法,"知新"是目的。任何新知和创新都不是孤立出现的,而是由研究已知的基础上,去探讨未知所得来的,是传承的结果。     

西红花酸合成酶（7，8-二加氧酶）片段的克隆及在大肠杆菌中的表达与检测

根据已发表西红花酸合成酶（7,8-二加氧酶）基因序列设计PCR特异性引物,从西红花柱头总RNA中扩增并克隆到一段长为1.2 kb的片段.测序结果表明该片段含有两个序列.一个与已知西红花酸合成酶基因序列高度同源(同源性99％),命名为CsZCD;另一个的同源性为96%,命名为CsZCD-NEW.将CsZCD-NEW片段克隆到表达载体pQE31上,得到重组质粒CsZCD-NEW-pQE31.经IPTG诱导,重组质粒在E.coli M15中表达.