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1.
贺秉军 《天津科技》2005,32(4):60-60
膜片钳技术是一种以记录通过离子通道的电流来反映细胞膜上离子通道分子活动的技术。离子通道存在于几平所有细胞的质膜里,是细胞膜上的特殊蛋白质大分子形成的对适当大小和带有适当电荷的离子具有高度选择性的孔道,是多种药物的作用靶标。药物作用于离子通道后,通道蛋白的构型或开与关的状态会发生变化,从而引起细胞乃至机体的一系列反应。  相似文献   
2.
用膜片钳技术分析了棉铃虫三氟氯氰菊酯抗性品系(R)及其同源对照品系(S)不同龄期幼虫神经细胞电压门控Na^ 通道的电生理特性.结果表明,S幼虫神经细胞Na^ 通道的激活电压介于-50~-30mV,约70%细胞的Na^ 通道在-40mV左右激活.Na^ 通道电流(1Na)的峰值电压介于-30~0mV,约72%细胞的1Na在-20mV左右达峰值.R幼虫Na^ 通道的激活电压介于-50~-20mV,约60%细胞的Na^ 通道在-40mV左右激活,约30%的在-30~-20mV激活.2龄幼虫(R2)约76%细胞的1Na在-20mV左右达峰值.R3和R4均有60%以上细胞的INa在-10~OmV达峰值,即R3和R4多数细胞1Na的峰值电压向正电位方向移动.上述结果表明R幼虫神经细胞Na^ 通道功能发生了变异,同时也提示R幼虫在不同发育阶段其Na^ 通道的表达不同.  相似文献   
3.
用全细胞膜片钳技术分析了棉铃虫Helicoverpa armigera(Hübner)幼虫中枢神经细胞电压门控Ca~(2+)通道的电生理学特性,并检测了三氟氯氰菊酯(cyhalothrin,Cyh)对Ca~(2+)通道功能特性的影响.结果表明,Ca~(2+)通道电流(I_(Ca))激活阈值-40 mV,峰值电压介于-10 mV-10 mV.约82%细胞的I_(Ca)在-20 mV激活,93%细胞的I_(Ca)在0 mV左右达峰值.棉铃虫表达高电压激活、对Cd~(2+)敏感的Ca~(2+)通道和高电压激活、对Cd~(2+)不敏感的Ca~(2+)通道.Cyh作用后,I_(Ca)在幅值减小的同时,I-V曲线和激活曲线均向超极化方向移动10-20 mV,表明Cyh不仅对I_(Ca)有抑制作用,对Ca~(2+)通道的激活也有影响,棉铃虫幼虫腹神经索中枢神经细胞高电压门控Ca~(2+)通道也是Cyh的作用靶标之一.  相似文献   
4.
蟋蟀同工酶的比较研究   总被引:3,自引:0,他引:3  
用聚丙烯酰胺凝胶电泳技术分析了蟋蟀科3属共计7种蟋蟀的酯酶(EST)同工酶,对其中两种的苹果酸脱氢酶(MDH)和乳酸脱氢酶(LDH)同工酶进行了研究.结果表明,EST酶谱可分为迁移率快和慢的两个区.EST在属间具有明显差异,属内种间具有某些共性.形态近似种间的酶谱极为相似,表明其亲缘关系较近.在实验基础上讨论了用同工酶方法分析近缘种时,应调查大量个体以找出酶谱变化规律,同时还应结合形态学、生态学等资料,以使分析结果更趋于客观实际.  相似文献   
5.
旨在明确棉铃虫Helicoverpa armigera(Hübner)神经细胞上是否存在大电导钙激活钾通道(Largeconductance calcium-activated potassium channels,BKCa),进而探究BKCa通道是否为七氟菊酯(I型)和溴氰菊酯(II型)的作用靶标.应用全细胞膜片钳技术首次记录了棉铃虫中枢神经细胞BKCa通道电流并分析了七氟菊酯和溴氰菊酯对BKCa通道的影响.结果显示,棉铃虫神经细胞膜上表达BKCa通道,其电流为一串快速激活、有快失活成分的电流,在-40 m V左右激活,电流幅值随刺激电位的增加而增强.七氟菊酯和溴氰菊酯均能显著抑制BKCa通道的峰值电流,使BKCa通道激活的电压依赖性发生改变,使激活曲线向去极化方向移动,其中七氟菊酯使半数激活电压(V1/2)向去极化方向移动约8 m V,溴氰菊酯使V1/2向去极化方向移动约16 m V.七氟菊酯和溴氰菊酯均能显著缩短BKCa通道快失活时间常数.上述结果表明BKCa通道是七氟菊酯和溴氰菊酯的作用靶标.  相似文献   
6.
抗性棉铃虫神经细胞的离体培养和超微结构分析   总被引:6,自引:0,他引:6  
对棉铃虫幼虫神经细胞进行了离体培养,并建立了其体外培养的实用方法。神经细胞在增补棉铃虫幼虫血淋巴的TC-100培养基中可贴壁生长,存活5-7d,培养基中不加血淋巴,而增补谷氨酰胺时,细胞也可贴壁生长,但接种24h后出现老化现象,增补适量葡萄糖,细胞可存活22-28d。细胞存活的最适pH值为6。4.90%的细胞具多条突起,与在体内生长有明显区别。棉铃虫抗性种群、对照种群、同种群不同龄期幼虫以及同一个体胸、腹神经节的神经细胞体外培养时形态无明显差异,但抗生品系幼虫运动神经元内线粒体明显增多,且神经围鞘与神经世膜厚度之比明显增加。  相似文献   
7.
两种蟋蟀同工酶的比较研究   总被引:3,自引:0,他引:3  
用聚丙烯酰胺凝胶电泳方法分析石首棺头蟋(Loxoblemmusequestris)与泰康棺头蟋(L.taicoun)的酯酶(EST)和苹果酸脱氢酶(MDH)同工酶.两种蟋蟀的EST和MDH同工酶酶谱极为相似.其中EST酶谱可分为4个区带组,推测受4个位点控制.因这两种蟋蟀的形态特征极为相似,两种同工酶酶谱也比较相似,而且控制EST的位点数相同,因此推测两者的亲缘关系比较接近,极有可能为近缘种  相似文献   
8.
通过催化抑制性G蛋白α亚基(Gαi/o)的ADP核糖基化,百日咳毒素(PTX)使Gαi/o不能活化,继而抑制Gαi/o-腺苷酸环化酶(AC)-cAMP-蛋白激酶A(PKA)-L型电压门控钙(Ca(L)2 )通道.Ca(L)2 通道可能是拟除虫菊酯类杀虫剂的靶标.本实验观察了PTX对三氟氯氰菊酯(Cy)抗性及敏感棉铃虫神经细胞Ca(L)2 通道的影响, 以期从Ca(L)2 通道动力学的角度探讨棉铃虫对拟除虫菊酯类杀虫剂产生抗性的机制.急性分离并经12-16 h无菌培养3-4龄棉铃虫神经细胞.实验分4组:①Cy敏感组(Cy-S组);②Cy抗性组(Cy-R组);③Cy-S-PTX组; ④Cy-R-PTX组.400 ng/mL PTX加入培养基中.采用全细胞膜片钳技术记录各组,ICa(L).结果显示:(1)各组 Ca(L)2 通道的激活电压均是-35--30 mV,最大激活电压是0 mV,但Cy-S-PTX组的最大激活电压是 -10 mV;(2)分别与Cy-S组和Cy-R-PTX组峰值电流密度相比,Cy-S-PTX组峰值电流密度分别增高52.06 %和44.81%(P<0.01),提示Cy-S-PTX组Ca(L)2 通道电导可能增大.Cy-S组和Cy-R组间的峰值电流密度无统计学差异;(3)与Cy-S组相比,Cy-S-PTX组神经细胞Ca(L)2 通道的半数激活电压向超极化方向移动5.1 mV (P<0.05),半数失活电压向超极化方向移动5.93 mV(P<0.05),提示PTX使敏感组神经细胞的Ca(L)2 通道更容易激活和失活;(4)与Cy-R组相比,Cy-R-PTX神经细胞Ca(L)2 通道的半数激活电压几乎未变,半数失活电压向去极化方向移动2.42 mV(P>0.05),提示PTX对抗性组神经细胞的影响不明显;(5)Cy-R组与Cy-S组神经细胞Ca(L)2 通道的半数激活电压和半数失活电压无显著性差异.结果提示:(1)棉铃虫神经细胞存在(Gαi/o)-AC- cAMP-PKA-Ca(L)2 通道信号传导途径;(2)PTX敏感的抑制性Gi/o蛋白的基础活性对棉铃虫神经细胞Ca(L)2 通道有影响;(3)PTX对敏感虫神经细胞的Ca(L)2 通道的影响较对抗性棉铃虫神经细胞Ca(L)2 通道的影响明显,提示抗性棉铃虫对拟除虫菊酯类杀虫剂产生抗性的机理可能与其Ca(L)2 通道对Gαi/o-AC-cAMP-PKA-Ca(L)2 通道调控不敏感有关.  相似文献   
9.
两种蟋蟀同工酶的比较研究   总被引:5,自引:0,他引:5  
用聚丙烯酰胺凝胶电泳方法分析石首棺头蟋与泰康棺头蟋和酯酶和苹果酸脱氢酶同工酶。两种蟋蟀的EST和MDH同工酶酶谱极为相似。其中EST酶谱可分为4个区带组,推测受4个位点控制,因这两种蟋蟀的形态特征极为相似,两种同工酶酶谱也比较相似,而且控制EST的位点数相同,因此推测两者的亲缘关系比较接近,极有可能为近缘种。  相似文献   
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