水蛭素-RGD序列融合蛋白基因在枯草芽孢杆菌中的克隆及表达

水蛭素是从医用水蛭唾液腺中分离纯化的一种多肽,分子量约为7 kD.它是天然存在的最专一有效的凝血酶抑制剂,无明显毒副作用,用量低,因此可作为抗栓药物用于治疗血栓性疾病[1～2].RGD序列是纤维蛋白原等粘附因子上以Arg-Gly-Asp为核心的小肽序列[3],通过与活化血小板上纤维蛋白原受体GPⅡb/Ⅲa结合而导致血小板聚集.因此外源RGD序列可通过竞争性结合该受体而阻断血小板的聚集,抑制血栓的形成[4].RGD序列与水蛭素融合可获得同时具有抗凝血酶和抗血小板聚集双功能的新型抗栓剂.本文首次报道重组水蛭素HV3与RGD序列融合蛋白基因克隆并在枯草芽孢杆菌中表达的结果.     

高效褐藻胶降解菌的筛选与产酶条件优化

以海藻酸钠为唯一碳源,从天然腐烂海带中筛选得到一株高效褐藻胶降解菌株53#,经形态学观察和16S r RNA鉴定,确定为类芽孢杆菌Paenibacillus agaridevorans。采用正交试验方法,以p H、温度、Na Cl浓度和海藻酸钠初始浓度为影响因素,对该菌株的产酶条件进行优化,得到53#菌的最佳产酶条件:p H=8,25℃,Na Cl浓度15 g/L,海藻酸钠初始浓度15 g/L。在最佳产酶条件下,褐藻胶裂解酶最大酶活可达390.53±17.32U/m L。筛选得到的类芽孢杆菌Paenibacillus agaridevorans 53#具有易于培养、产酶速度快和酶活力高等优点,能够实现褐藻胶的高效糖化,在褐藻生产生物乙醇领域具有潜在利用价值。     

Hg~(2+)对日本沼虾的毒性作用

研究了Hg2+对日本沼虾的急性毒性,在24℃下,测定了Hg2+对日本沼虾(Macrobrachiumnipponnensis)的24,48,72和96 h的LC50值分别为60.2,52.4,47.6和38.0μg/L.在几个Hg2+质量浓度梯度胁迫下,超氧化物歧化酶(SOD),Na+-K+-ATPase,谷丙转氨酶(GPT)、谷草转氨酶(GOT)活性均受到不同程度的抑制,随Hg2+质量浓度的升高,抑制作用越明显.     

水蛭素-RGD序列融合蛋白基因在枯草芽孢杆菌中的克隆及表达(简报)

水蛭素是从医用水蛭唾液腺中分离纯化的一种多肽,分子量约为7 kD．它是天然存在的最专一有效的凝血酶抑制剂,无明显毒副作用,用量低,因此可作为抗栓药物用于治疗血栓性疾病．RGD 序列是纤维蛋白原等粘附因子上以 Arg-Gly-Asp 为核心的小肽序列,通过与活化血小板上纤维蛋白原受体 GPⅡb/ Ⅲa 结合而导致血小板聚集．因此外源 RGD 序列可通过竞争性结合该受体而阻断血小板的聚集,抑制血栓的形成．RGD 序列与水蛭素融合可获得同时具有抗凝血酶和抗血小板聚集双功能的新型抗栓剂．本文首次报道重组水蛭素 HV3与 RGD 序列融合蛋白基因克隆并在枯草芽孢杆菌中表达的结果．     

rH2AX核内斑点在不同成胶质瘤细胞中的剂量时间效应研究

将成胶质瘤细胞MO59K和MO59J两种细胞分别给予1Gy,2Gy,4Gy和8Gy的6MV-X线照射,并分别于0.5h、1h、2h、4h、8h、12h、24h收集细胞,检测rH2AX核内斑点时间及剂量效应特点.结果发现,MO59K细胞和MO59J细胞随着照射剂量的增加rH2AX核内斑点数量增加;并且MO59K细胞接受8Gy照射后rH2AX斑点在24h内能够恢复到放疗前的水平,而MO59J细胞内rH2AX斑点不能恢复到照射前水平.提示MO59J细胞较MO59K细胞敏感,照射后rH2AX核内斑点更难恢复到未照射水平.     

利用固定化微生物细胞羟基化左旋乙基甾烯双酮

研究了海藻酸钙包埋法固定化技术在甾体化合物的生物转化中的应用.利用固定化 Penicillium raistrickii 细胞实现对左旋乙基甾烯双酮（13-ethyl-estr-4-ene-3,17-dione）的15α 位羟基化作用，合成了重要的药物中间体15α-羟基左旋乙基甾烯双酮.优化了固定化孢子浓度，固定化孢子接种量，投料浓度，投料时间，转化时间等转化条件.结果表明：在摇瓶发酵生物转化中，固定化 Penicillium raistrickii 细胞可重复利用5次而转化能力没有明显下降.     

石墨炉原子吸收光谱法测定昆明鼠器官铂含量

研究高分子顺铂(PGA-Asp-CDDP)腹腔给药昆明鼠,1h后取出脏器检测其铂含量.石墨炉原子吸收光谱测定获得的铂浓度标准曲线,其相关系数为0.997 5,特征浓度为2.4μg·L-1;并考察了消解液用量和消解温度对测定铂浓度的影响;回收率实验表明该消解方法在测定铂浓度上具有可行性和可靠性.在此基础上,昆明鼠的心脏、肝脏、脾脏、肺和肾脏的铂含量检测结果分别为(5.46±0.89)、(28.65±13.45)、(45.30±4.07)、(16.90±4.74)和(76.31±2.59)μg·g-1.     

马来酰亚胺聚谷氨酸天冬氨酸聚合物偶联性能研究

马来酰亚胺聚谷氨酸天冬氨酸(Mal-PGA-Asp)是在天然高分子聚谷氨酸(PGA)基础上化学修饰而获得,能够偶联含巯基的多肽;成为新型药物载体.波长分析和双键鉴定反应显示Mal-PGA-Asp带有马来酰亚胺基团;电泳检测表明Mal-PGA-Asp可以有效偶联P40(还原型多肽)及mGLP-1(TCEP还原氧化型多肽);这为Mal-PGA-Asp药物载体广泛应用奠定了基础.