蓝莓不可萃取多酚的纯化及组分分析

对蓝莓果实中不可萃取多酚进行了提取、分离和纯化,并利用高效液相色谱对其组成成分进行了分析。结果表明,7种大孔树脂中HPD-100C对蓝莓不可萃取多酚的吸附率和解吸率都相对较高;采用大孔树脂HPD-100C进行动态纯化,再利用高效液相色谱分析其组分,得出蓝莓不可萃取多酚中主要物质为飞燕草色素、矢车菊色素、牵牛花色素、芍药花色素、锦葵色素,与可萃取多酚相似,说明两者具有相似组分。     

北京棒杆菌天冬氨酸激酶M372I-T379S双突变体的构建及其酶学性质

为构建高酶活力天冬氨酸激酶(aspartokinase, AK), 并削弱或解除Lys(lysine)反馈抑制作用突变体, 通过定点突变和高通量筛选技术构建突变体M372I,T379S和M372I-T379S, 对野生型（WT）和突变体分别进行诱导表达、 纯化及酶学性质表征. 结果表明： 突变体M372I,T379S和M372I-T379S AK与WTAK相比, V_max分别提高了13.77,15.02,15.60倍, K_m和n值均降低； 最适pH值分别升高为8.0,8.5,8.5, 且半衰期分别延长了1.0,0.9,2.3 h； M372I-T379S AK最适温度为30 ℃, 比WT AK高2 ℃； 当浓度为1~10 mmol/L时, 突变体均削弱或部分解除了抑制剂Lys的反馈抑制作用.     

蓝莓不可萃取多酚的酸法提取工艺优化

研究了蓝莓中不可萃取多酚的提取工艺. 以新鲜蓝莓为实验材料,去除其中的可萃取多酚,制成不含可萃取多酚的原材料,采用酸水解的方法分离不可萃取多酚. 在单因素实验基础上,选择温度、时间、料液比等3个影响因素进行响应面设计. 采用Box-Behnken中心组合实验设计和响应面分析法,建立以蓝莓不可萃取多酚萃取率为响应值的二次回归方程. 结果表明温度、时间、料液比对多酚萃取率的影响显著,最佳萃取条件为温度74℃,时间225h,物料质量浓度1∶21g/mL,在此条件下不可萃取多酚在蓝莓粉中的萃取率为27.25mg/g.     

北京棒杆菌天冬氨酸激酶M372I-T379S双突变体的构建及其酶学性质

为构建高酶活力天冬氨酸激酶(aspartokinase, AK), 并削弱或解除Lys(lysine)反馈抑制作用突变体, 通过定点突变和高通量筛选技术构建突变体M372I,T379S和M372I-T379S, 对野生型（WT）和突变体分别进行诱导表达、 纯化及酶学性质表征. 结果表明： 突变体M372I,T379S和M372I-T379S AK与WTAK相比, V_max分别提高了13.77,15.02,15.60倍, K_m和n值均降低； 最适pH值分别升高为8.0,8.5,8.5, 且半衰期分别延长了1.0,0.9,2.3 h； M372I-T379S AK最适温度为30 ℃, 比WT AK高2 ℃； 当浓度为1~10 mmol/L时, 突变体均削弱或部分解除了抑制剂Lys的反馈抑制作用.