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91.
采用异硫氰酸胍酚氯仿法分离铁胁迫玉米根总RNA,然后采用寡聚dT 纤维素层析柱法纯化Poly(A) + RNA.用含有XhoI位点的linkerprimer 锚定合成cDNA 第一条链后,采用替代法合成第二条链,接着连接上EcoRIAdapter 以便定向重组到载体上.cDNA 经过XhoI消化和分级分离后,带有XhoI和EcoRI粘性末端的cDNA 定向重组到λZAP表达载体的XhoI和EcoRI位点上.经体外包装,重组的噬菌体转导宿主菌XL1Blue MRF,最终获得滴度为4-5 ×105 pfu/ug 的λZAP 表达cDNA 文库.通过差异筛选法和质膜双向电泳验证了缺铁和加铁条件下cDNA 和质膜蛋白的差异 相似文献