重组人巨细胞病毒(HCMV)嵌合肽在毕赤酵母中的表达

目的：在巴期德毕赤酵母中表达人巨细胞病毒gp52C末端和pp150C末端串联片段的嵌合肽，方法：用SacI和BglⅡ分别酶切CMVp-pPIC9K重组质粒，电打孔法导入毕赤酵母GS115后，在缺组氨酸的MD板上筛选出转化子，然后根据甲醇利用快速型（Mut^ ）和甲醇利用缓慢型(Mut^s）菌株的不同生长特点，筛选出Mut^ 和Mut^s型转化子，用PCR法进一步鉴定阳性克隆，分别用甲醇诱导Mut^ 和Mut^s型转化子表达目的蛋白4d，取培养产物冻干浓缩，进行SDS-PAGE和Western blotting，筛选出能特异表达目的的蛋白的菌株，分析蛋白的含量及纯度。结果：重组人巨细胞病毒可在甲醇利用快速型毕赤酵母中有效表达，其表达量约占培养上清分泌蛋白的76.5%，结论：重组人巨细胞病毒（HCMV）嵌合肽可在真核细胞毕赤酵母中成功表达。     

对感染白斑综合症病毒的亲虾子代的跟踪检测

感染白斑综合症病毒(white spot syndrome virus,WSSV) 的斑节对虾Penaeus monodon 亲虾能产出携带WSSV的卵子，这些卵子可完成胚胎发育过程，孵化出无节幼体，并可以培育出Sou状幼体，糠虾幼体和仔虾，在确认只有亲虾作为WSSV传染源的情况下，培育出的部分幼体和部分仔虾携带WSSV。在相同的条件下，不带WSSV的亲虾产出的卵及幼体，仔虾未检测到WSSV。     

认识病毒

病毒是一类非细胞型微生物,只含有一种核酸,DNA或RNA,仅能在活细胞中繁殖,是已知的微生物中较晚被发现的一类。直到电子显微镜应用后,人们才观察到病毒。病毒具有如下的基本特征:     

藻类病毒研究40年

综述了藻类病毒研究40年来的重要发现。前期研究着重于病毒的分离和生物学特性，20世纪80年代后一度研究陷于停顿，90年代发现蓝藻病毒在海洋中的重大生态意义后，近年来又掀起藻类病毒研究的热潮，我国在藻类病毒方面的探索研究还只是刚刚起步，由于水体的丰富多样，以及“水华”和“赤潮”的严重爆发，我国研究藻类病毒的前景十分广阔。     

人参果试管快繁和脱毒技术的研究

将茎尖接种与MS 6-BA0．5—1．0mg／L IAA0．2mg／L的培养基，形成丛生芽，将丛生芽切块接种于MS IAA0．2mg／L的培养基上，形成幼苗，经检测，得到无病毒植株。再通过切断扦插于MS IAA0．2mg／L上生根，得到大量脱毒试管苗。     

断奶仔猪腹泻的病因及其综合防治

阐述了断奶仔猪腹泻主要包括仔猪生理发育不成熟，断奶应激，出生时母源抗体水平较高，以后逐渐降低，抵抗力差及肠道对饲料蛋白的过敏反应等方面病因，并讨论了其综合防治措施。     

抗乙型脑炎病毒单克隆抗体重链可变区基因在烟草中的表达

自Hiatt等1989年首次报道了在植物中进行抗体基因的表达研究以来,至今短短数年,这类研究已日益广泛深入。目前,利用转基因植物和植物细胞表达工程抗体基因进行抗体的生产、作物抗病育种以及植物代谢调控和发育的研究已经成为生物技术中的一个新途径,新的生长点。这是免疫学和植物科学在分子水平上有机结合的产物。现有的证据表明,不仅高等植物,单细胞绿藻也可以表达抗体基因。高等植物不仅可以表达简单的单域抗体基因,也可以表达更加复杂的IgA-G杂合抗体基因,并在体内装配出双分子dIgA-G和带分泌组分(SC)的SIgA-G,利用转抗体基因植物进行抗病育种,植物代谢和发育的研究也取得令人瞩目的进展。     

含有人凝血因子Ⅸ自身内含子Ⅰ的反向逆转录病毒载体构建及表达

目前基因治疗研究遇到的普遍问题是转染效率低下及目的基因蛋白在活体表达水平较低,其中解决目的基因表达较低的一个重要手段便是基因载体的改造。1990年,Jallat等人在转基因小鼠研究中发现:hFIX cDNA的表达量低,而其余一系列带有完整内含子Ⅰ或中间缺失4.8kb的内含子Ⅰ的转基因小鼠,其表达都和完整的Ⅸ因子表达相仿。这提示Ⅸ因子内含子Ⅰ顺序对其表达有一定的促进作用。1995年,Kurachi等人用含内含子Ⅰ片断的表达质粒转化HepG2细胞,发现瞬间表达要比cDNA高出7倍,其凝血活性和细胞内mRNA水平也有相应数量的提高。本实验室也进行了hFIX intron Ⅰ的研究工作,构建了逆转录病毒载体GlNaCi′IX,但对病毒上清进行RT-PCR检测,发现intron Ⅰ常被不同程度剪切。本文以SNMBAAIXm为蓝本,构建了反向表达载体GlNaPAi′IXBAM,其中Ⅸ因子转录方向与LTR转录方向相反,以期避免病毒包装中将intron Ⅰ剪切掉,使intron Ⅰ结构能够正确引入到靶细胞中,从而提高Ⅸ因子的表达量。     

人和动物的多瘤病毒

多瘤病毒分类于乳多空病毒科，ＤＮＡ肿瘤病毒。病毒无囊膜，直径４０ｎｍ～４５ｎｍ，有３种～４种衣壳蛋白，基因组为约５０００对核苷酸组成的双链闭合环状ＤＮＡ。病毒在自然界分布广泛，目前已从人、兔子、小牛、鸟类、啮齿类和灵长类等动物分离到多种多瘤病毒。各病毒内部有共同的属特异性抗原，但大多数病毒表面蛋白无血清学交叉反应。病毒在容许细胞中增殖良好，能使非容许细胞发生转化，在转化细胞中病毒ＤＮＡ以整合到宿主染色体的方式存在。多瘤病毒感染有严格的种特异性，在自然宿主内大多数病毒呈隐性感染，但人和虎皮鹦鹉多瘤病毒对宿主有一定致病性。本文就有关多瘤病毒的感染和生物学特性研究进展作一概述     

小鼠诱导转基因传代细胞对AFP粪便标本中脊灰和其他肠道病毒的分离鉴别研究

报告４６份ＡＦＰ粪便标本用Ｌα、ＲＤ和Ｈｅｐ－２三种细胞作病毒分离，阳性率分别为２６．０９％、６０．８７％、４３．４８％。同步分离出脊灰病毒Ⅰ型３株，Ⅱ型２株，Ⅲ型４株，Ⅰ＋Ⅱ型１株，Ⅰ＋Ⅲ型１株，混合Ｐ２＋Ｅ１株。脊灰病毒总分离阳性率为２８．９５％。非脊灰肠道病毒分离阳性率分别为０％、３６．９６％、２３．９１％。从６份第１次分离结果阴性的高危病例和高度临床病例粪便标本重新分离出１株Ⅲ型脊灰病毒和３株非脊灰肠道病毒。应用Ｌα细胞不仅能作型别鉴定，而且能区别脊灰病毒和非脊灰肠道病毒混合感染