含有人凝血因子Ⅸ自身内含子Ⅰ的反向逆转录病毒载体构建及表达

目前基因治疗研究遇到的普遍问题是转染效率低下及目的基因蛋白在活体表达水平较低,其中解决目的基因表达较低的一个重要手段便是基因载体的改造。1990年,Jallat等人在转基因小鼠研究中发现:hFIX cDNA的表达量低,而其余一系列带有完整内含子Ⅰ或中间缺失4.8kb的内含子Ⅰ的转基因小鼠,其表达都和完整的Ⅸ因子表达相仿。这提示Ⅸ因子内含子Ⅰ顺序对其表达有一定的促进作用。1995年,Kurachi等人用含内含子Ⅰ片断的表达质粒转化HepG2细胞,发现瞬间表达要比cDNA高出7倍,其凝血活性和细胞内mRNA水平也有相应数量的提高。本实验室也进行了hFIX intron Ⅰ的研究工作,构建了逆转录病毒载体GlNaCi′IX,但对病毒上清进行RT-PCR检测,发现intron Ⅰ常被不同程度剪切。本文以SNMBAAIXm为蓝本,构建了反向表达载体GlNaPAi′IXBAM,其中Ⅸ因子转录方向与LTR转录方向相反,以期避免病毒包装中将intron Ⅰ剪切掉,使intron Ⅰ结构能够正确引入到靶细胞中,从而提高Ⅸ因子的表达量。     

金属与载体间的相互作用及其 CO 加氢性能

本文对ＴｉＯ２负载Ｎｉ、Ｃｕ和Ｎｉ—Ｃｕ合金催化剂中ＳＭＳＩ效应，及其对ＣＯ加氢性能的影响进行了分析研究。实验结果表明，载于ＴｉＯ２上的金属组分与载体间发生了相互作用，主要表现在对Ｈ２和ＣＯ吸附的变化及还原温度的提高；载体ＴｉＯ２的作用是使ＣＯ的吸附出现了线式和桥式吸附态外的卧式吸附态（Ｍ…Ｃ＝Ｏ→Ｔｉｎ＋），引起ＣＯ活化程度的提高，有利于Ｃ＝Ｏ键的断裂而形成表面碳物种；双金属Ｎｉ、Ｃｕ间发生相互作用而形成了均匀的合金相，该活性组分与载体ＴｉＯ２的共同作用，对ＣＯ加氢中Ｃ２物种，特别是乙烯的生成有利。     

具扩散的三维Lotka—volterra捕食—被捕食系统的持久 …

通过建立适当的李雅普诺夫泛函，讨论了具扩散的捕食－被捕分系统的一致持久性和全局吸引性，获得了该系统的周期解的存在唯一性的结果。     

分割—拼合法在解决定积分问题中的一些运用

通过实例分析，阐明了分割－拼合法，在解决被积函数的原函数不可求出的一些定积分问题中的重要应用。     

人胰岛素原乳腺表达载体的构建

通过ＰＣＲ方法扩增了人胰岛素（ＨＩ）基因１．３４ｋｂ的ＤＮＡ片段并克隆于ｐＵＣ１８的ＳｍａⅠ位点内。经ＤＮＡ序列分析表明，该片段为ＨＩ基因的氨基酸编码区及３＇端调控区序列。同时，应用ＰＣＲ方法对牛α－乳白蛋白（ＢαＬＡ）基因进行了扩增，得到了０．８４ｋｂＤＮＡ扩增片段。将其克隆于去除了ＥｃｏＲＩ位点的ｐＵＣ１８ＳｍａＩ位点内，经内切酶分析和ＤＮＡ测序证明该片段是ＢαＬＡ基因５＇调控区序列。ＥｃｏＲ     

六点支承静基座液压平台的调平方法

提出了六点支承液压平台的两种调平方法，即位置误差控制和角度误差控制制法，设计了相应的液压控制系统，对自动调平中的有关问题进行了分析。     

提高供氧能力对土曲霉生产衣康酸的影响

本文研究了供氧能力对土曲霉ＩＦＯ－６３６５分批发酵生产衣康酸能力的影响。当通风比为０．５Ｖ．Ｖ．ｍ，搅拌叶轮末端线速度为１２５．７ｃｍ／ｓ时的最大衣康酸发酵产率分别是叶轮末端线速度为９４．２ｃｍ／ｓ和７８．５ｃｍ／ｓ的１．２８倍和３倍；当添加氧载体──正十二烷，叶轮末端线速度为７８．５ｃｍ／ｓ时，与对照相比，可提高产酸１４％，但在更高的叶轮末端线速度条件下，加入正十二烷，只能促进菌体的生长，对发酵产酸是抑制作用。     

载体的酸碱特性对Ni－Cu催化剂上CO加氢性能的影响

本文采用ＸＲＤ，ＴＰＲ和以Ｈ２，ＣＯ为探针分子的ＴＰＤ—ＭＳ，ＴＰＳＲ－ＭＳ技术研究了Ｎｉ－ＣＵ合金负载于氧化物ＳｉＯ２，ＭｇＯ和γ－Ａｌ２Ｏ３上的性质变化，以及对ＣＯ加氢反应性能的影响。实验结果表明，各种载体对于负载于其上的活性组分均具有良好的分散性能；ＳｉＯ２对金属相的结构和电子状态不产生影响，而γ－Ａｌ２Ｏ３和ＭｇＯ对金属相则有不同程度的影响，这种相互作用主要表现在活性组分对Ｈ２和ＣＯ吸附能力的变化和ＣＯ加氢的活性和选择性的变化上。     

逆转录病毒载体设计对ANTI—RAS核酶基因转移效率的影响

将ａｎｔｉ－ｒａｓ核酶基因Ｒ８克隆于不同的逆转录病毒载体，并导入逆转录病毒包装细胞质ＰＡ３１７，得到具一次感染性的缺失性病毒，通过测定病毒滴度选择Ｒ８基因的高效重组转录病毒载体。     

形成多角体家蚕重组病毒通用转移载体构建

从家蚕核型多角体病毒（ＢｍＮＰＶ）通用转称载体ｐＢＫ２８３和粉纹夜蛾核型多角体病毒（ＴｎＮＰＶ）转移载体ｐＳＸＩＶＶＩ＋Ｘ３系列出发，构建了一个７．２ｋｂ能形成多角体且可以用于克隆含不同读码框外源基因的ＢｍＮＰＶ通用转移载体系列ｐＢＭＸ３．ｐＢＭＸ３系列以ＢｍＮＰＶ多角体结构基因上游的１．９ｋｂ和下游１．３ｋｂ的片段作为与ＢｍＮＰＶ基因组进行体内同源重组的同源序列；ｐＳＸＩＶＶＩ＋Ｘ３系列的ＳＸＩＶ双启动子用于外源基因的表达；ＡｃＮＰＶ的多角体基因作为重组病毒形成多角体的基因．以ＢｍＮＰＶ－ＬａｃＺ（ｏｃｃ－ｇａｌ＋）为出发株病毒，ｐＢＭＸ３系列的重组病毒筛选有ｏｃｃ＋和ｇａｌ－两个遗传标记