红豆杉细胞悬浮培养及动力学研究

对红豆杉细胞在５Ｌ通气机械搅拌式反应器中的培养过程及动力学进行了研究。经２４ｄ培养，细胞生物量增加３倍，紫杉醇含量可达细胞干重的１．０３５×１０＾－３，建立了描述细胞生长过程的模型，采用分段多项式函数逼近关联ｕ与ｕｍ的函数Ｆ（ｓ），建立了描述产物合成的动力学方程，采用多项式函数逼近关联产物合成速率与细胞生长速率的函数，确定了部分动力学参数。     

红豆杉细胞悬浮培养及动力学研究

对红豆杉细胞在５Ｌ通气机械搅拌式反应器中的培养过程及动力学进行了研究．经２４ｄ培养，细胞生物量增加３倍，紫杉醇含量可达细胞干重的１．０３５×１０－３．建立了描述细胞生长过程的模型，采用分段多项式函数逼近关联ｕ与ｕｍ的函数Ｆ（ｓ），建立了描述产物合成的动力学方程，采用多项式函数逼近关联产物合成速率与细胞生长速率的函数，确定了部分动力学参数     

高效液相色谱法测定盐酸非索非那定片的含量

建立高效液相色谱法测定盐酸非索非那定片含量。采用Zorbax SB-C18柱(4.6 mm×250 mm,5 μm),流动相为0.01 mol·L-1磷酸二氢钾溶液(含0.2％三乙胺,用磷酸调节至pH 3.0):甲醇(40:60);流 速0.8mL·min-1,检测波长220 nm。进样量(0.2~4.8)μg时,与峰面积呈良好线性,r=0.999 9(n=8), 最低检测限为4 ng,本方法重复性和精密度良好(RSD<1％),方法平均回收率99.67％(n=9),日内和日间 RSD分别为0.63％及0.66％。有关物质可很好分离,方法简便、准确、专属。     

盐酸非索非那定片溶出度测定方法的研究

采用紫外分光光度法测定盐酸非索非那定片的溶出度。检测波长219 nm。转速50 r·min-1,溶出介 质为水900 mL;盐酸非索非那定在(4~28)／μg·mL-1范围内线性良好,r=0.999 9(n=7),方法平均回收率 100.2％(n=9),日内和日间RSD分别为0.40％及0.51％。45 min定时取样测定,主药溶出95％以上。方 法简便、准确,可有效的控制其质量。     

罗格列酮钠片溶出度的测定方法

采用紫外分光光度法测定罗格列酮钠片的溶出度。检测波长234nm。转速50r·min-1,溶出介质为0.01mol/L盐酸500mL;罗格列酮钠在(4～20)μg·mL-1-范围内线性良好,r=0.9999(n=7),方法平均回收率99.95%(n=9),日内和日间RSD分别为0.49%及0.75%。20min定时取样测定,主药溶出95%以上。方法简便、准确,可有效的控制其质量。     

前体和诱导子对紫杉醇合成影响的优化研究

用响应面方法对红豆杉细胞培养生产紫杉醇的几种前体及诱导子进行了优化，首先，用部分因素实验对苯丙氨酸，脱落酸，硝酸银，苯甲酸钠，醋酸钠，壳聚糖，甘氨酸对紫杉醇含量的影响进行评价，并找出其中主要影响因子壳聚糖，硝酸银和脱落酸；其次，用最速上升法逼近最大响应区，最后用中心组合设计和响应面分析确定主要影响因子的最适浓度，经优化后的紫杉醇体积质量达到60．5mg/L，较优化前提高1倍，利用以上结果进行5L反应器放大培养，紫杉醇体积质量达54．6mg/L。     

不同培养方式的红豆杉细胞悬浮培养比较研究

进行了批式培养与补料批式培养下的细胞生长及紫杉醇合成动力学比较研究，并优化了红豆杉细胞补料批式培养条件。在批式培养过程中紫杉醇合成在24d达到最大，为4.3mg/L。补料批式培养延长了细胞的生长时间，大幅度提高了细胞干重及紫杉醇的含量。培养条件优化后，最高紫杉醇含量达至11.3mg/L。     

种子细胞的生长时相和紫杉醇生产的关系研究

处在生长周期不同时相的红豆杉细胞作为种子细胞,接入含来自红豆杉树皮的真菌诱导子的生产培养基中,紫杉醇的生产和种子细胞的生长时相有明显的对应关系.来自对数生长后期和稳定前期的细胞,胞内紫杉醇含量分别为26.8μg·g-1和58.1μg·g-1;来自稳定后期的细胞对诱导子反应最敏感,紫杉醇含量比来自延迟期和对数生长初期的细胞中的紫杉醇含量提高了两个数量级,达421μg·g-1.     

红豆杉抗真菌细胞株的筛选及生理生化特性

通过胁迫筛选法筛选红豆杉抗真菌细胞变异系,并比较了该细胞系和原型在真菌诱导物处理后与抗病有关的几种酶的变化规律以及紫杉醇含量的变化,结果表明诱导物处理后抗性细胞的紫杉醇含量显著高于原型,并且过氧化物酶（ＰＯＤ）、苯丙氨酸解氨酶（ＰＡＬ）和超氧阴离子自由基（Ｏ２）释放速率与原型有明显区别。     

不同溶剂浸取红豆杉细胞中的紫杉醇的研究

用7种单一溶剂浸取红豆杉细胞中的紫杉醇,研究表明,甲醇有最好的浸取效果,紫杉醇含量占细胞干重的0.03315％,在23种混合溶剂中,CH3COOC2H5/C2H5OH,CH3COCH3/CH3OH,CH3COCH3/C2H5OH,CH3OH/CHCl3浸取效果最好,其紫杉醇含量占细胞干重分别为0.05166％,0.04923％,0.04276％,0.03981％.