以酵母菌双杂合技术寻找志贺氏菌IpaH7.8作用蛋白质的目标蛋白

背景:志贺氏菌感染能造成人类出血性腹泻,此菌常带有一大型毒性质体,以携带第三型分泌系统及相关致病基因,并透过此系统释放作用蛋白,协助菌体侵入人类肠壁细胞,操控细胞功能,以利在细胞中存活及增殖.IpaH家族蛋白是作用蛋白中较特别的一群,志贺氏菌常带有数个IpaH家族基因,除了在毒性质体上,经常同时存在染色体上.从蛋白质结构上来说,IpaH家族蛋白皆由两个功能性区域组成,其C端均为E3泛素连接酶,而N端在不同IpaH家族蛋白则具有不同的白氨酸重复序列,可能结合不同的目标蛋白,最后将其泛素化.其中IpaH4.5、IpaH7.8、IpaH9.8在侵入宿主细胞后才释放:目前已有研究发现IpaH4.5和IpaH9.8的目标蛋白,其他IpaH蛋白的目标蛋白和功能则仍未知,因此我们希望利用酵母菌双杂合技术找出IpaH7.8的目标蛋白.方法:使用酵母菌双杂合系统筛选,接着将可能的候选蛋白,以其在细胞内的分布、伪阳性的可能性、与IpaH7.8交互作用的强度等,作进一步评估,最后以共同沉淀技术进行验证.结果:经酵母菌双杂合系统筛选后,我们得到6个候选蛋白,其中多数参与细胞的代谢反应.其中一候选蛋白-RAD50,主要分布在细胞核,而我们直接在细胞中表现IpaH7.8 N端和绿色萤光蛋白的融合蛋白,也发现绿色萤光聚集在细胞核,因此推测RAD50为候选蛋白的可能性最高.将IpaH7.8和RAD50进行共同沉淀,显示两者在生物体外的条件下可互相结合.     

美国提高专利质量的对策及对我国的启示

美国是世界专利大国,但其授权专利中的问题专利为数不少,美国在深入的探讨与研究后,提出了提高专利质量的对策。我国目前也出现了类似美国的专利质量问题,借鉴美国的经验,结合我国的现状,建议采取如下措施提高专利质量：完善现有专利客体的创造性标准及外观设计申请审查授权标;住：恢复设置专利异议或撤销制度,简便处理外观设计和实用新型专利的无效申请：开放部分专利审查,尝试与国外专利审查机构开展合作;完善专利审查质量管理制度,进一步提高人才队伍整体素质,推进信息化建设。     

试析台湾当局的"公投"

运用相关法理理论阐述台湾当局"公投"的本质,揭示台湾当局企图通过推动"公投"实现"法理台独"的政治野心,分析"公投"对台湾社会和经济发展所造成的严重影响以及中美对"台独"所将采取的立场.     

新疆失地农民安置问题成因探析

失地农民安置过程中存在补偿方式短期性,补偿标准过低,社会保障体系不完善,再就业困难等问题。原因在于土地征迁制度不合理,政策执行不到位,失地农民思想观念滞后。     

CSP生产Ti微合金化高强钢中纳米碳化物

采用光学金相、电子显微术和化学相分析的方法并结合热力学计算,分析了紧凑式带钢生产(CSP)的Ti微合金化高强钢中的析出物及其析出规律.研究发现:高强钢中存在微米尺寸的立方TiN析出和大量纳米尺寸的析出物粒子;钢中MX相(M=Ti,Mo,Cr;X=C,N)的质量分数为0.0927%,其中10 nm以下的析出物占26.9%;均热之前和均热过程TiN已基本全部析出,连轧前TiC不具备析出的热力学条件;降低钢中N和S含量、严格控制卷取温度可增加TiC的体积分数,降低γ→α相变温度可以阻止细小碳化物长大.结果表明,析出物总的沉淀强化效果约为156 MPa,并能通过化学成分和工艺的控制进一步增强.     

基于多元统计分析下的旅游动机模式研究

以全国6个旅游热点城市抽样调查数据为依据,应用聚类分析、对应分析两种方法对不同职业入境游客的旅游动机进行定量分析,结果两种方法的分析结果相吻合.不同游客旅游动机存在一定规律性,各种职业的人都把观赏自然风景放在了首位,但由于在工作性质和经济收入方面的不同,旅游动机也存在一定的差异.     

建立标准化管理体系 促进政工管理工作

新时期政工工作在建设和谐企业中关系密切,作用重大。政工工作是一切工作的生命线,是搞好各项工作的关键,也是队伍建设的一项重要工作。标准化管理体系是政工工作的一个重要组成部分,建立和实施统一的适合政工工作需要的持续有效和协调统一的标准管理体系,为政工工作提供了全面、系统的标准化管理的指导和要求,为政工工作步入良性的发展轨道奠定了坚实的基础。做好标准化政工工作,建立以技术标准为主体,包括管理标准和工作标准在内的工作标准体系,同时与政工实施的工作管理体系相结合,互相补充、互为促进,是加强政工工作标准化的有效措施,也是促进提升工作质量和水平、提高队伍的积极性、主动性和创造性的有力手段。     

中小型电视台电视现场直播技术探讨

目前,很多中小型城市电视台大都还没有配备电视转播车,但电视现场直播是技术进步使然。电视现场直播几乎要同时运用摄、录、编、播等所有电视技术手段和设备,还要灯光、音响、通讯、传输等技术的配合。这样一个复杂的技术系统,在没有电视转播车等设备的情况下,对技术人员来说无疑是一道难题。     

船舶建造企业后勤管理及其建设

在新知识经济时代，企业管理的作用非常重要。从企业后勤管理的定义、内涵和表现形式、内容、特点等方面认识企业后勤管理，阐述了现代企业后勤管理的特征。随着船舶建造企业后勤保障工作的改革不断推进和深入，后勤服务商品化的程度不断提高，体现了后勤科学管理在船舶建造企业保障作用中的重要性。通过本文中的船舶建造企业建设后勤管理的意义和船舶建造企业后勤管理的建设两大方面清楚的阐述出来。后勤管理建设是企业后勤保障工作改革的基础和根本保障。也为企业后勤管理的推广和实践应用提供了更广阔的空间。     

从北宋东京诗看开封的社会经济

北宋东京诗是诗人从北宋都城开封的生活经验出发,以记录开封这座城市的政治、经济、文化、民俗等要素为中心的诗歌.社会经济是北宋东京诗描绘的一个方面,也是其重要的组成部分.从北宋东京诗,我们可以窥见当时开封社会经济的发展盛况：繁荣兴旺的饮食业、绚丽多姿的娱乐业,以及高度发达的商业.北宋时期开封富庶的原因,一是商人阶级地位的提升,二是便利的交通运输条件,三是政府宽松的经济政策.