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鹅常见病毒性疾病的快速诊断技术的建立及其应用 总被引:4,自引:0,他引:4
根据3种病原基因组相关基因的序列特征设计了三对PCR引物,用于鹅常见的病毒性疾病包括鹅副粘病毒病、鸭瘟、小鹅瘟的鉴别诊断.三对引物均能从各自的参考毒株扩增出与预计片段大小一致的产物,而对其它的病原的扩增结果均为阴性;应用建立的PCR方法对来自广西不同地方的38份临床可疑病例分别进行诊断,DPV、APMV-1和GPV的检测阳性率分别为66.6%(10/15)、55.6%(15/27)和75%(6/8),二重及三重混合感染的占42.8%(9/21).研究结果表明建立的PCR方法具有快速、敏感、特异的特点,可用于疫病的临床快速鉴别诊断特别是多重感染的诊断以及流行病学的调查研究. 相似文献
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4A分子筛对聚磷酸铵/季戊四醇膨胀阻燃剂协同作用的TGA/XPS研究 总被引:3,自引:0,他引:3
利用TGA/XPS技术比较研究聚磷酸铵/季戊四醇(APP/PER)-4A与APP/PER体系的热行为.通过热失重及Si/Al原子比和结合能等数据绘图,对图中曲线进行了详细的分析.对比研究表明TGA的第3热失重峰明显降低,XPS的Cls相对谱峰强度随温度明显增加.4A分子筛在低温下对APP/PER膨胀阻燃体系发生催化酯化反应,在高温下Si/Al原子比升高,产生表面层动力学运动.酸的活性增加,有利于APP/PER膨胀阻燃体系. 相似文献
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禽流感病毒三种检测方法的比较研究 总被引:1,自引:0,他引:1
对分别应用病毒分离鉴定、反转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)、间接免疫荧光(IFA)3种方法对病料组织中的禽流感病毒(AIV) 进行检测与比较研究。结果显示:经鸡胚尿囊腔接种分离到的病毒,通过用禽流感病毒H5、H9亚型单克隆抗体所进行的血凝(HA)和血凝抑制试验(HI),鉴定为AIV H5亚型毒株;应用RT-PCR技术直接对病料组织抽提的RNA样品进行检测,从病料组织能扩增出大小为229bp的AIV通用目的片段和大小为380bp的H5亚型特异性片段;取病料组织的过滤液接种狗肾上皮细胞(MDCK)单层,24h后用H5亚型AIV特异性的单克隆抗体进行间接免疫荧光试验,结果在细胞核、细胞质内观察到特异性的荧光。研究的结果表明,3种技术都可对病料样品中的AIV进行检测,而RT-PCR和IFA两种方法还可直接对病料样品中的病毒进行亚型的鉴定。相对而言,后两者具有更快速、更敏感、操作更简便的特点。 相似文献
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取广西南宁、河池和柳州等地140条病死及濒死蛇的心血等作细菌培养。结果分离出细菌232株;分类鉴定发现79株为变形杆菌,占检出菌的34.1%;种的分类表明,63株为普通变形杆菌,16株为奇异变形杆菌;随机抽取其中5株进行毒素测定,均发现有肠毒素产生;做动物试验可致小白鼠死亡;做回归试验,可见蛇血带菌。说明,此变形杆菌具有一定的毒力,是造成蛇感染的常见菌之一,为人兽共患病的传染源,不可忽视。 相似文献
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马立克氏病病毒疫苗CV1988株囊膜糖蛋白gI基因的序列分析 总被引:4,自引:0,他引:4
根据马立克氏病病毒(MDV)国际标准株GA株的基因序列设计合成了可扩增gI基因(1060bp)的引物,用PCR技术,以CV1988基因组为模板,扩增得到了预期大小的PCR产物,将此PCR产物和pUC18经同样的限制性内切酶KpnI和BamHI处理后,连接、转化、鉴定,得到了含有gI基因的质粒。将此质粒进行序列分析,比较了它与其他强毒和超强毒株的同源性,用DNAastan软件对其编码的氨基酸的疏水性 相似文献
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马立克氏病病毒MEQ蛋白单克隆抗体的制备及应用研究 总被引:6,自引:0,他引:6
基因表达与病毒感染细胞及致瘤能力之间关系的阐明,将有助于我们对马立克氏病病毒(MDV)meq基因功能的了解,该研究利用通过杆状病毒载体在昆虫细胞系SF9上高度表达的MEQ蛋白免疫BALB/c小鼠,然后收获其免疫脾细胞与肿瘤细胞系SP2/0通过PEG于体外融合,获得的杂交瘤细胞被克隆并通过与MDV感染的鸡胚成纤维细胞(CEF)做免疫荧光试验(FA),进行其分泌抗MEQ单克隆抗体(McAb)能力的筛选,获得4株稳定产生抗MEQ蛋白McAb的杂交瘤细胞,其中3G12E6通过FA和免疫酶组化技术能够检测到MDV致瘤株感染的CEF及自然MD肿瘤细胞中表达的meq基因产物。研究的结果首次发现,MDV致瘤株GA、RB1B感染的CEF及自然MD肿瘤细胞中均有meq基因的表达,但在弱毒疫苗株CV1988感染的CEF和免疫鸡组织细胞中则未检测到MEQ,作者认为这是由于meq基因在致瘤株中表达水平高,而在非致瘤株中表达水平低所致,这可能是决定MDV毒力(virulence)或致瘤性(oncogenicity)的关键因素之一。 相似文献
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马立克氏病病毒meq基因功能研究 总被引:8,自引:0,他引:8
从马立克氏病病毒(MDV)不同致病型毒株meq基因序列,meq基因产物及其细胞内表达特性和meq蛋白生物学功能的研究探讨马立克氏病病毒致瘤基因meq功能。完成了648A,CV1988/Rispens,814,广西地方毒株G2,N,0093,0095,0297,0304共9个MDV毒株meq基因的序列测定。MDV不同致病型毒株的meq基因序列相对比较保守,它们相互间核苷酸和氨基酸序列的同源性均很高;与所有7个致瘤的MDV毒株相比,在2个MDV-1弱毒疫苗CV1988/Rispens株和814株发现有二个特征性位点突变。此外,还在其ORF中首次发现含15个氨基酸残基(EELCAQLCSTPPPPI)的2个重复和含6个氨基酸残基(PPICTP)的4个重复,全分布在MEQ蛋白C-端的转录激活域内。MEQ蛋白的表达仅局限于感染细胞的核内,而且随感染时间增加。具有从核质向核仁和核膜转移趋向;Western Blotting和免疫沉淀试验证实重组杆状病毒感染细胞裂解物中有大小约为60kD的特异带,利用表达的MEQ蛋白产物免疫BALB/c小鼠,获得的杂交瘤细胞被克隆并与MDV感染的鸡胚成纤维细胞(CEF)做免疫荧光试验(FA),获得4株稳定产生抗MEQ蛋白单克隆抗体(McAb)的杂交瘤细胞,其中3G12E6单克隆抗体能够检测到MDV致瘤株感染的CEF及自然MD肿瘤细胞中表达的meq基因产物,而CV1988/Rispens感染的细胞则未检测到,发现细胞内表达的meq基因产物可明显促进MDVGA株对体外培养细胞的感染及增殖。研究结果表明,meq基因在感染细胞内的表达水平是MDV增殖和致病,致瘤的分子基因。 相似文献