用柱色谱纯化牛红血球超氧化物歧化酶

比较了几种初步纯化超氧化物歧化酶（ＳＯＤ）的方法,并进行了优化组合。研究了用软基质阴离子交换柱（ＤＥＡＥ－ＳｅｐｈａｒｏｓｅＣＬ－６Ｂ）和凝胶柱（Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ６Ｂ）分离纯化ＳＯＤ的工艺条件。利用建立的方法纯化了来自牛血的超氧化物歧化酶,整个工艺过程总活性回收率为６５％,比活为５４２９Ｕ／ｍｇ,纯化倍数提高至６１倍。     

牛泡沫病毒LTR的反式激活因子靶序列研究

牛泡沫病毒（ＢＦＶ）是反转录病毒科泡沫病毒属成员之一．其基因组除编码ｇａｇ,ｐｏｌ,ｅｎｖ三个结构基因外,在ｅｎｖ和３＇ＬＴＲ之间有２个ＯＲＦ（ＯＲＦ－１和ＯＲＦ－２）,编码自身的反式激活因子Ｔａｓ等调节蛋白．本研究利用我们实验室分离鉴定的ＢＦＶ３０２６中国毒株［１２］为材料,克隆Ｏｒｆ－１基因,构建ｐＢＦＶＯＲＦ－１表达质粒,通过带有ｌｕｃ基因的ＬＴＲ系列缺失质粒与ｐＢＦＶＯＲＦ－１共转染,瞬时表达分析结果将ＢＦＶＬＴＲ上Ｔａｓ应答元件（ＴＲＥ）定位于－９８３／－６６８（ＴＲＥＩ）,－４７０／－１４０（ＴＲＥＩ）和ＲＵ５区．其中ＴＲＥＩ、ＴＲＥＩＩ为正调控区域,ＲＵ５为负调控区域,并进一步证明ＲＵ５在异源启动子（ＢＩＶＬＴＲ）上具有抑制其下游基因表达的功能．这些结果表明ＢＦＶＴａｓ作用机理与慢病毒（Ｔａｔ）,致瘤病毒（Ｔａｘ）等均不相同     

牛血清白蛋白-羟基磷灰石难溶性复合物的FT-IR光谱研究

利用富立叶变换红外光谱(FT-IR)法对牛血清白蛋白(BSA)-羟基磷灰石［Ca₁₀(OH)₂(PO₄)₆］难溶性复合物的组成及BSA与羟基磷灰石的作用方式进行了研究。结果表明,复合物中BSA与羟基磷灰石之间存在着强烈的相互作用,这种相互作用使水溶性的BSA进入固体羟基磷灰石的结构形成难溶性BSA-羟基磷灰石复合物。复合物具有非化学计量的性质,体现了生物矿化的特征。正是这种蛋白质与羟基磷灰石间的复杂相互作用,形成高级自组装结构,使矿化产物具有高强度和韧性。     

酸性铬深蓝与蛋白质作用的光度法研究及其分析应用

在酸性介质中,酸性铬深蓝与蛋白质在室温下能迅速结合生成复合物,其最大吸收波长为595nm,比酸性铬深蓝红移了55nm.本文用光度法研究了酸性铬深蓝与牛血清蛋白(BSA)结合反应的最佳条件,并在此基础上建立了一个测定蛋白质的新方法.在最佳反应条件下,BSA的浓度在50~250mg·L-1范围符合比尔定律,吸光系数为2.348mL·mg-1·cm-1.除阴阳离子表面活性剂外,其余大部分物质不干扰蛋白质的测定.方法具有选择性好、快速、稳定的优点.方法应用于牛奶粉、鲜牛奶中蛋白质的测定,结果满意.     

磁性分离用于小分子物质生物素标记后的快速纯化

根据生物素标记反应的不可逆性,设计了一种基于磁性分离的快速纯化方法。该方法使用固定在磁性粒子上的牛血清白蛋白（BSA）与生物素标记甲状腺素（T4）反应后过量的活性生物素试剂继续反应,形成磁性粒子-BSA-生物素复合物,再通过磁性分离可快速除去复合物。实验中用酶免疫分析方法检测过量的活性生物素试剂和磁性粒子的反应程度,并用竞争抑制反应证明了经磁性分离得到的上清液为高纯度生物素标记的T4。该纯化方法解决了小分子物质生物素标记后难以用传统方法纯化的问题,操作快速、简单,特别适用于小分子生物物质进行生物素标记后的纯化。     

利用搭桥PCR法实现轮状病毒VP7表位片段的重组

选择了RV VP7的3个高度保守可诱发高水平体液免疫反应的中和性抗原表位,人工合成了这3个表位片段。采用了一种不需要限制性内切酶和连接酶的重组DNA方法-搭桥PCR法,方便快速地构建了轮状病毒VF7蛋白的重组表位基因,将其T／A克隆入PBS-T载体,经过测序与报道序列同源性达100％。结果表明：搭桥法PCR简单易行,快速准确,尤其是在构建2个或多个小基因片段的融合时,比酶切、连接方法更具优越性。     

呋塞米与牛血清白蛋白相互作用的研究及共存金属离子的影响

利用紫外和荧光技术研究了在优化的实验条件下,呋塞米与牛血清白蛋白(BSA)相互作用及常见金属离子对BSA-呋塞米体系的影响.结果表明Pb2+、Mg2+、Co2+、Fe3+、Cu2+对呋塞米与BSA的结合有明显竞争作用.发现呋塞米对BSA有较强的荧光猝灭作用,测定了该反应的表观结合常数、结合位点数及结合位置.根据热力学参数确定了该药物与BSA之间的作用力类型,两者之间的作用力类型主要为范德华力和氢键.呋塞米在BSA中的结合位点主要位于亚螺旋域ⅡA.Hill系数约等于1,表明呋塞米对结合作用几乎无协同作用.同时应用同步荧光技术研究了呋塞米对BSA构象的影响.     

Antibodies of aborted bovine fetuses respond to placental structures

Summary IgG isolated from aborted bovine fetuses was found to be directed not only to a diaplacental infectious agent but, in half of the cases, also to the site of infection, i.e. the placental tissue. The techniques used were immunohistochemistry and agarose immunoelectrophoresis. These findings suggest a hitherto unrecognized pathological mechanism of abortion.     

湖南城步县南山牧场蜱及牛梨形虫病的发生特点

１９９２－１９９６年调查表明，湖南南山牧场寄生于奶牛体内的血液原虫在瑟氏泰勒原虫，传播者为长角血蜱。据流行病学，该病发生在夏秋季。１９９２－１９９４年犊牛５－８月发生，高峰期６－７月；成年牛发生于６－７月。高峰期７－８月。１９９５年犊牛发生于８－９月，高峰期９月，成年牛发生于８－１０月。     

红藻多糖抗AIDS病毒作用的体外实验研究

本文对红藻多糖提取物的抗ＡＩＤＳ病毒作用进行了体外实验研究．结果表明,红藻多糖（ＲＰ１、ＲＰ２）对ＢＩＶ病毒的生长具有明显的抑制作用,其抑制率分别为８５．９６％和８８．６５％,与临床批准使用的抗ＡＩＤＳ药物叠氮脱氧胸腺嘧啶（ＡＺＴ）［１］（８９．５２％）近似,证实了红藻多糖作为抗ＡＩＤＳ药物的可行性．