三苯甲基保护的巯烷臂寡核苷酸的合成及荧光标记

用三苯甲基巯基乙醇与氯化甲氧基吗啉亚磷酰胺连接得到一种亚磷酰胺试剂（Ⅲ）。用该试剂通过固相合成仪合成了5′末端巯烷基修饰的寡核苷酸，用Ag^ 脱去巯基的三苯甲基保护后与ω-碘已基修饰的荧光基因反应，得到相应的荧光标记寡核苷酸探针，设计的lmbH筛选探针与质粒DNA进行杂交，杂交结果验证了这种标记的实用性，灵敏度不达1pmol。     

农杆菌介导的大豆反义fad2-1基因转化烟草研究

以烟草无菌苗叶片为外植体,通过根癌农杆菌介导法,将大豆反义油酸脱饱和酶基因导入烟草中,经梯度卡那霉素筛选,获得可在含75mg/L卡那霉素选择生根培养基上再生的抗性植株75株,其中67株抗卡那霉素植株的PCR分析扩增出目的片段;RT-PCR分析表明该基因在烟草中表达.结果表明大豆反义油酸脱饱和酶基因在烟草基因组中整合和表达.这为大豆反义油酸脱饱和酶基因转入大豆和表达奠定基础,也为烟草基因工程育种提供了依据.     

反义技术—生物技术的第二次浪潮

反义技术是应用反义寡核苷酸来选择性地封闭基因表达的一项新兴的生物技术。它的出现掀起了基础、临床及药物开发领域新一轮的技术革命。简述了反义技术的理论机制、反义核酸的种类、应具备的特性及在相关领域中的应用。     

Effect of antisense oligonucleotides targeting telomerase catalytic subunit on tumor cell proliferationin vitro

To screen specific antitumor drugs targeting telomerase catalytic subunit (hEST2), 12 different hEST2 antisense oligonucleotides were designed based on hEST2 mRNA second structure and transfected into tumor cell lines by the lipofectin-mediated method. Cell growth activity was evaluated by MTT assay. hEST212 was picked out and its specificity, antitumor tree and continuous effect were analyzed. The results showed that hEST212 had promising antitumor activity in vitro, hEST2 can be used as a pratical target and an antisense drug candidate for cancer.     

与小麦高分子量谷蛋白基因探针杂交的阳性克隆分离及基因在重组子上的定位

将经San 3A部分酶切后的小麦总DNA片段克隆到λCharon40载体上构建了小麦基因文库.以两个人工合成的同源于小麦高分子量(HMW)谷蛋白基因的片段对此基因库进行筛选,获得了两个阳性克隆,推测其中一个包含了HMW谷蛋白全部的基因顺序.两个克隆的部分限制性内切酶位点已被确定.在Southern杂交中,用位于基因编码区内的寡核苷酸片段作探针,将阳性部分定位在一定的酶切片段上.     

细菌种特异性的16SrDNA寡核苷酸探针数据库的初步构建

核酸二级数据库是生物信息学研究的重要领域 ,对生命科学的研究和发展起重要作用 .目前 ,国际核酸序列公共数据库中存在大量的细菌 16SrDNA序列 ,本文利用这些已知细菌的 16SrDNA序列 ,设计了细菌种特异性的寡核苷酸探针 ,将其结果存入二级数据库 ,以计算机网络为载体 ,开发了界面友好的通过WWW浏览器实现对数据库查询的系统 ,其查询结果形象直观 ,为设计细菌的种特异性寡核苷酸探针提供了参考和帮助 ,从而可加速对细菌分类及鉴定的进程 .