果树根癌病生物防治研究进展

根癌病是由根癌农杆菌引起的细菌性病害．阐述了根瘤菌致病机制和生物防治的研究进展,对其今后的研究方向作了概述．     

发根农杆菌诱导植物毛状根的发生及次生代谢物生产的研究进展

发根农杆菌(Agmbacterium rhizogenes)中含有Ri质粒．在自然条件下，发根农杆菌通过伤口侵染植物，使植物产生毛状根，本文从发根农杆菌的特性，及其所含有的Ri质粒的结构和功能，发根农杆菌诱导毛状根发生的机理，毛状根的转化方法，培养和鉴定及用于植物次生代谢生产方面的应用研究进行了综述．     

抗生素对药用植物白芥生长的影响

目的为药用植物白芥的农杆菌介导遗传转化体系的建立选犁合适的抑茵剂种类和浓度。方法采用哈药集团制药总厂生产的头孢唑林钠、西南药业股份有限公司生产的苯唑西林钠和华北制药股份有限公司生产的头孢噻肟钠3种抗生素,研究不同种类和不同浓度的抗生素对药用植物白芥生长的影响。结果3种不同种类和不同浓度的抗生素对药用植物白芥的生长具有不同的影响,抗生素头孢噻肟钠对白芥幼苗生长的影响最小。结论在药用植物白芥农杆菌介导遗传转化体系建立的过程中,可以采用抗生素头孢噻肟钠为抑茵剂,浓度设置在250mg·L^-1与500mg·L^-1之间。     

根癌农杆菌介导的骏枣愈伤组织遗传转化体系的研究

采用农杆菌介导法,对骏枣愈伤组织遗传转化体系进行研究.结果表明：进行遗传转化的合适条件为：愈伤诱导培养基MS＋6-BA 0.4 mg/L＋2,4-D 1.2 mg/L;浸染之前对愈伤组织进行6d的避光培养可提高愈伤组织在共培养过程中的成活率;愈伤组织在OD600=0.4～0.6的农杆菌菌液中浸染10 min,农杆菌LBA4404的生长情况最好;在28℃黑暗条件下共培养放置16 d对转化最适宜;头孢霉素的抑菌浓度为250 mg/L;卡那霉素的筛选浓度为125 mg/L.经PCR检测,初步证明外源目的基因已整合到骏枣基因组中,初步实现了农杆菌介导的骏枣愈伤组织遗传转化,与以骏枣茎叶外植体建立的遗传转化体系相比,以骏枣愈伤组织为外植体共培养时间长,有利于转化.     

反义ACC合成酶基因导入番茄的研究

 采用农杆菌介导法将携带有反义ACC合成酶基因和NPT II的表达载体pKAC导入番茄栽培品种美国大红五星102、美国大红108、美国大红王、大红II号等中.经过卡那霉素筛选后,获得了一批抗性苗,其中有3株PCR检测为阳性.实验证明,不同激素配比对番茄子叶不定芽的诱导有一定影响,适宜的农杆菌侵染时间和浓度是番茄基因转化成功与否的关键,延迟选择有利于番茄基因转化细胞的生长.     

农杆菌介导的花生抗线虫基因遗传转化体系初步研究

白皮秋花生1012种子萌发3d,获得花生无菌苗,切取子叶、胚轴、子叶柄作为外植体。用农杆菌介导法将外植体侵染20-30分钟转入培养基MS+5mg/L BA+0.5mg/L NAA+100μmol/L AS暗光共培养3d,转至加有280mg/L Cef的培养基P2或P2上诱导芽伸长,长至1-2cm时转至促根培养基MS+0.2mg/L BA+75mg/L Kan+280mg/L Cef上促根,经27天观察有5株再生苗长根。结果表明培养基P2上芽诱导率较高,长势也较好,同时乙酰丁香酮对芽诱导率起促进作用。     

矮牵牛花色基因工程研究进展

矮牵牛(Petunia hybrida Vilm.)是一种重要的花坛和盆栽用花,在中国市场需求较大。矮牵牛花色基因工程对于改良矮牵牛花色性状具有重要意义,也有助于矮牵牛的遗传育种工作。笔者阐述了矮牵牛植株内部花色素苷的合成、花色形成的相关结构基因和调控基因,以及矮牵牛花色基因工程中的技术(农杆菌介导技术)和常用方法,提出矮牵牛花色基因工程研究中存在的一些问题,展望矮牵牛花色基因工程的发展前景。     

绿色荧光蛋白基因在烟草植株中的表达

用冻融法将含有绿色荧光蛋白基因的质粒ｐＧＬ２－ＧＳ导入农杆菌菌株ＬＢＡ４４０４ （ｐＴＯＫ２３３），两个质粒发生同源重组，形成一个新的二元载体ｐＴＯＫ２３３－ＧＳ．农杆菌菌株ＬＢＡ４４０４ （ｐＴＯＫ２３３－ＧＳ） 经叶盘法转化烟草，筛选具有卡那霉素抗性的愈伤组织，诱导成苗．ＰＣＲ 扩增发现，绿色荧光蛋白基因在９０％ 的再生植株中存在．在荧光显微镜下，使用蓝色激发光观察再生植株的徒手切片和压片发现，８０ ％ 以上的再生植株都能不同程度地发出绿色荧光．多数植株的根尖和叶脉都发光，一些植株的气孔、叶表皮或叶绒毛也发光