铬对鲤鱼非特异性免疫功能的影响

用0.1,0.5,0.8,1.0和2.0mg/L铬溶液分别刺激鲤鱼21d和44d后，测定鲤鱼非特异性免疫指标，估测不同浓度的铬溶液对鲤鱼非特异性免疫指标的影响。0.1和0.5mg/L铬溶液对鲤鱼NBT阳性细胞、溶菌酶活性无影响，0.8mg/L的铬溶液可使NBT阳细胞数和溶菌酶活性降低，而1.0和2.0mg/L铬溶液可使NBT阳细胞数和溶菌酶活性显著下降（P＜0.05)。这一结果表明水体中0.1和0.5mg/L铬对鲤鱼的非特异性免疫功能无影响，0.8mg/L的铬略有影响，而1.0和2.0mg/L的铬则明显降低鲤鱼的非特异性免疫功能。     

从鸡蛋壳中提取溶菌酶方法的研究

鸡蛋壳中含约１／１０００溶菌酶，常规方法很难提取。该文叙述了用聚丙烯酸富集方法从鸡蛋壳中提取溶菌酶的实验过程，比较了不同的聚丙烯酸用量对提取收率的影响，并测定了溶菌酶的防霉变功能。     

镉(Ⅱ)- 蛋白质衍生物的极谱吸附波与应用

研究了镉 ( ) -蛋白质衍生物在氨基乙酸 -氢氧化钠缓冲介质中的极谱行为 ,提出了一种灵敏的蛋白质测定的新方法 .含有巯基或二硫键蛋白质在 0 .2 m ol/ L 氢氧化钠溶液中于沸水浴加热 5 min后 ,在 0 .4 m ol/ L 氨基乙酸 -氢氧化钠 (p H=9.8)缓冲介质中 ,与 1 .0× 1 0 - 4m ol/ L 镉 ( )溶液混合 ,反应产物在单扫描极谱上于 - 0 .5 7V(vs.SCE)处产生一个稳定的、灵敏的吸附还原波 .峰电流与牛血清白蛋白 (BSA)、人血清白蛋白 (HSA)的浓度在7.5× 1 0 - 1 0 ～ 3.0× 1 0 - 7m ol/ L范围内呈线性关系 ,BSA、HSA检测限均为 3.0× 1 0 - 1 0 m ol/ L ;与溶菌酶 (L yso)的浓度在 3.5× 1 0 - 9～ 1 .4× 1 0 - 6 m ol/ L范围内呈线性关系 ,L yso的检测限为 1 .4× 1 0 - 9m ol/ L .该法应用于人血清样品中蛋白质的直接测定 ,结果满意     

絮凝剂和溶菌酶联用促进污泥脱水性能

通过小试试验考察了絮凝剂(聚丙烯酰胺)和溶菌酶联合使用对污水厂二沉池回流污泥的脱水性能、沉降性能及絮体特性的影响,并与2种药剂单独作用时进行了对比研究.结果表明,絮凝剂和溶菌酶分别单独作用于污泥脱水时,均可改善污泥的脱水性能;但2种药剂共同作用时,能同时提高污泥沉降性能和脱水速度,且脱水程度较2种药剂单独处理时进一步提升.2种药剂联用时的最佳投加量为20 mL/L絮凝剂+0.05 g/g溶菌酶,且最优添加顺序为先絮凝剂再溶菌酶.此时污泥抽滤泥饼含水率和比阻分别为65.7%和0.8×1012 m/kg,与原泥相比下降25.3%和75.8%.通过污泥胞外聚合物(EPS)含量与污泥絮体形态分析可知,溶菌酶可以有效破坏污泥絮体结构,改变污泥EPS的分布;高分子絮凝剂的吸附架桥作用则加快了污泥过滤脱水速度.而两者联合使用增大了污泥絮体二维分形维数,可使污泥絮体结构更加细密紧实,并提高污泥可脱除水分的比例,从而提高了污泥脱水性能.研究结果表明,絮凝剂和溶菌酶联用调理污泥脱水具有较好的应用前景.     

溶菌酶内水的恒温非平衡冻结行为

自60年代起,多种研究表明,每种生物大分子内都有一恒定量的不冻水。例如,多种方法测定溶菌酶的不冻水量R_(nf)为0.33±0.03g(水)/g(蛋白)。通常认为这部分水以氢键结合于大分子,维系着其结构和生物功能。故R_(nf)广泛用作刻画大分子同水相互作用的重要特征参量,并依此提出有关大分子水合的较系统的假说和分子模型。近来我们对多种生物大     

离子交换色谱流动相组成对溶菌酶复性的影响

目的 研究了复性缓冲液组成对还原变性溶茵酶复性的影响。方法用离子交换色谱法对还原变性溶菌酶进行复性。结果低离子强度的Tris缓冲液比高离子强度的PBS缓冲液能明显提高复性收率；当复性缓冲液中不合其他种类的盐时，脲浓度为2．0mol／L时复性产率最高；当脲浓度低时，复性缓冲液中含有氯化钠和硫酸铵的复性效果均不如不合这些盐的复性效果；当脲浓度高时，硫酸铵能很好地提高溶菌酶的复性回收率。结论认为Hofmeister效应是造成这些现象的主要原因。     

水的六环结构及其对溶菌酶热变性的影响

通过理论分析和实验证明研究了水的六环结构及其生物功能,研究表明,水经低温超声定频谱振后,大多数呈六环和六笼形水分子簇存在,这种水在生物蛋白、核酸、细胞及组织活动中起到重要作用;经ＤＳＣ法实验证明,用六环水水合溶菌酶时,提高了其热抗变性能力。     

溶菌酶的极谱催化氢波研究与应用

在0.36mol/LNH4Cl-0.04mo1/LNH3H2O(pH8.31)支持电解质中,溶菌酶(LE)产生一个极谱催化氢波,峰电位为-1.80V(vs.SCE).该极谱催化氢波二阶导数峰电流与LE浓度在1.2×10-8～5.6×10-8mol/L范围内有线性关系.用于鸡蛋清中LE的测定,结果满意.     

具有溶菌酶的部分生物活性的α—乳清蛋白（^32His→Leu,^33Thr→Glu,^103Tyr→Ala）突变体

在溶菌酶催化机理以及α－乳清蛋白和溶菌酶同源比较的基础上,构建了含3个突变点的α－乳清蛋白突变体（H32L,T33E,Y103A）,并将其克隆到具有T7启动子的表达质粒pET28a（＋）中,在大肠杆菌BL21（DE3）／pLys中获得高效表达,存在于包涵体中的目标蛋白经变复性并通过DEAE Sepharose Streamline和Sephacryl S200层析柱获得纯化蛋白,合成底物p-Nitrophenyl-β-D-N′,N″,N′″－Triacetyl-chitotriose [pNP-(NAcGlc)3]与突变体蛋白的反应时间曲线证明突变体蛋白了部分溶菌酶生物活性,为重组难蛋清溶菌酶（HEWL）的5．26％,利用等温滴定量热法测定突变体蛋白与五糖底物chitopentaose的平均热结合能为71．34kJ/mol,重组HEWL为105．47kJ/mol,实验表明,通过有限元的几个突变就可以使α－乳清蛋白获得溶菌酶的活性,这在分子水平上有力地佐证了两者的高度同源性和进化关系。