介孔分子筛MCM-41固定化木瓜蛋白酶的研究

文中以介孔分子筛MCM-41作为载体,戊二醛作为交联剂,对木瓜蛋白酶进行了固定化。研究了固定化条件对酶活性及酶活性回收率的影响,并对固定化酶的连续操作稳定性做了初步探讨。结果表明：当1g载体的给酶量为20mg,固定化温度10～20℃,固定化时间2h,pH值7.0,戊二醛体积分数0.75%时,木瓜蛋白酶的固定化效果最好,此时酶活性平均回收率达55%左右。固定化酶具有良好的连续操作稳定性,半衰期可达26d。     

木瓜蛋白酶酶解辅助提取葛根中的有效成分研究

文章对木瓜蛋白酶酶解辅助提取葛根中的有效成分进行了研究。以葛根素及葛根总黄酮得率为指标,采用单因素实验法筛选了酶解时间、酶质量分数、酶解温度、酶解pH值等;采用综合加权评分法进行数据分析,以葛根素及葛根总黄酮得率为综合评价指标,对酶解时间、酶质量分数、酶解温度三个主要影响因素进行了正交试验的筛选。文章首次选用木瓜蛋白酶酶解的方法,对葛根中的有效成分进行了辅助提取,并确定了其最佳提取工艺条件。实验结果表明:酶解pH值为6,酶质量分数为2%,酶解温度为60℃,酶解时间为4h时,木瓜蛋白酶酶解辅助提取葛根中有效成分的效果为最佳。     

固定化木瓜蛋白酶的研究及其应用

从8种载体材料中选取自制的氨基含量约2．878mmol/g的甲壳质作为固定化载体,采用吸附交联法,以戊二醛为交联剂,对木瓜蛋白酶进行固定化。17．5mg/g的固定化酶／载体比较,pH6.5,5℃下,先吸附10min,再以0．7％的戊二醛终浓度交联12h,所得固定化酶酶活回收可达52．0％,酶活力为3．54U／g。固定化酶在65℃以下,溶液酶在55℃以下稳定;固定化酶在pH7.0以下稳定,溶液酶在pH6.0以下稳定;5℃条件下,固定化酶贮藏半衰期为183d;以酪蛋白为底物,固定化酶的操作半衰期可达27d。用固定化酶水解甲壳胺,产物分子量小于10 000的甲壳胺低聚糖得率约为45．55％。     

以卵清蛋白为载体的固定化木瓜蛋白酶的制备及其性质

以变性的卵清蛋白为载体, 用戊二醛为交联剂固定木瓜蛋白酶. 通过正交实验考察了固定化pH值、 交联剂戊二醛浓度、 交联时间和酶用量对固定化木瓜蛋白酶活力的影响,确定了最适固定化条件： 5%戊二醛, pH 6.0, 交联时间20 h, 每克载体含酶量12 mg. 对比研究了游离木瓜蛋白酶和固定化木瓜蛋白酶的性质, 所得到的固定化木瓜蛋白酶最适温度90 ℃, 最适pH 9.0, 米氏常数53.6　mg/mＬ, 其热稳定性及耐热性均较游离酶显著提高.