丙酮酸氧化酶在临床生化检验中的应用

阐述了丙酮酸氧化酶的来源、特性、基因克隆和在临床生化检验中的应用，包括丙酮酸、丙氨酸氨基转移酶、天冬氨酸氨基转移酶、丙酮酸激酶、无机磷酸、3-巯基丙酮酸转硫酶和尿素等的测定。     

锡林郭勒盟牧区蒙古族成年人血清总胆固醇和甘油三酯分析

采用氧化酶法对锡林郭勒盟牧区950例蒙古族成年牧民血清总胆固醇、甘油三酯含量进行调查,其总胆固醇平均水平为4.22±1.67mmol/L(x±2s);甘油三酯平均水平为1.50±1.37mmol/L(x±2s).研究表明蒙古族成年牧民血清胆固醇、甘油三酯含量随着年龄增长而升高,性别差异不明显.     

莲子红衣多酚对α-葡萄糖苷酶的抑制作用

采用分光光度法测定了不同条件下莲子红衣多酚对α-葡萄糖苷酶活性抑制作用的影响,在单因素实验基础上运用L₉(3⁴)正交法得到莲子红衣多酚对α-葡萄糖苷酶活性抑制作用的优化条件。研究结果显示,在pH 值为6.8,质量浓度为1.50g/L,反应时间为20min时,莲子红衣多酚对α-葡萄糖苷酶活性的抑制率最高,可达67.99%±1.79%。莲子红衣多酚对α-葡萄糖苷酶的抑制作用类型为反竞争性抑制,抑制常数为0.24g/L。     

纳米氧化铈和碳纳米管修饰的过氧化氢传感器的研制

研制了一种基于碳纳米管(CNT)、纳米Ce O2、壳聚糖(CHIT)有机-无机复合膜作为固定基质的酶生物传感器,该复合膜结合了无机碳纳米管、纳米Ce O2和有机材料壳聚糖的优点,固定的辣根过氧化酶较好的保持了其生物活性.在优化测试条件下,连续加入相同量的H2O2,该传感器对H2O2的浓度变化产生迅速灵敏的响应,当过氧化氢溶液浓度在3.2×10-6~2.0×10-3mol/L之间变化时,电极对其浓度成线性关系,相关系数为0.978.该生物传感器具有响应速度快、灵敏度高、重现性好等特点,可用于实际样品的检测.     

枸杞抗坏血酸氧化酶基因的克隆与表达分析

以枸杞为材料,利用同源克隆技术,克隆了枸杞抗坏血酸氧化酶(AO)的全长cDNA序列,命名为LcAO基因(GenBank:KP712033),该基因开放阅读框(ORF)大小为1737bp,编码578个氨基酸,与西红柿AO蛋白的同源性达到90%.LcAO编码的氨基酸序列包含3个多铜氧化酶结构域和跨膜信号序列.采用实时荧光定量PCR分析显示,LcAO基因在枸杞的花和果实中表达量最高,成熟叶中表达量最少.     

不同梯度NaHCO_3处理对豌豆叶片生理指标的影响

为研究豌豆幼苗在不同梯度碱胁迫(25,50,75,100,125mmol/L NaHCO3)下生理指标,对胁迫处理8d后的豌豆幼苗的叶片叶绿素质量分数、丙二醛(MDA)的浓度、抗氧化酶活性生理指标的变化情况进行了研究,结果表明:随NaHCO3胁迫浓度的增加,豌豆幼苗叶片叶绿素质量分数呈先升高后降低趋势,MDA的浓度呈增加趋势,3种抗氧化酶SOD,POD,APX活性呈先升高后降低趋势,表明豌豆具有一定程度的抗盐性.     

杜仲叶提取物对乙醇导致的小鼠小脑和大脑皮层DNA损伤的保护作用

选取176只雄性昆明种小鼠,随机分为空白组、模型组、阳性组、杜仲叶不同提取物的高(400 mg/kg)、低(100 mg/kg)剂量组,彗星实验每组4只,生化指标测试实验每组28只.采用彗星实验筛选杜仲叶(Eucommia folium)95%醇提物、50%醇提物和水提物对乙醇所致小鼠小脑和大脑皮层DNA损伤的保护作用,确定最佳提取物;通过酶联免疫方法和比色法检测杜仲叶最佳提取物对乙醇引起小鼠小脑、大脑皮层组织氧化损伤相关生理指标的影响,如一氧化氮(NO)、丙二醛(MDA)、8-羟基脱氧鸟苷(8-OHdG)和醌氧化还原酶1(NQO1)的含量,以及总超氧化歧化酶(T-SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-P_X)和胆碱乙酰转移酶(ChAT)的活力.采用改良福林酚(FC)比色法,测定杜仲叶最佳提取物中总多酚的含量.结果显示,杜仲叶50%醇提物可显著改善乙醇引起的急性脑神经DNA损伤,保护作用强于杜仲叶95%醇提物和水提物.50%醇提物显著降低小鼠小脑和大脑皮层组织中MDA、NO、8-OHdG和NQO1的水平,提高GSH-P_X、T-SOD和ChAT的活性.采用FC比色法测定杜仲叶50%醇提物中总多酚的含量为62.7%.以上结果表明:杜仲叶50%醇提物可能通过提高脑组织抗氧化的能力,达到保护脑神经DNA的作用;在保护脑神经DNA和抗氧化作用中,总多酚类成分发挥了极其重要的作用.     

萌发青稞营养成分、多酚含量及抗氧化活性研究

以瓦蓝、14-946、昆仑15号青稞为原料,研究了不同萌发时间对青稞主要营养成分、多酚含量及抗氧化活性的影响。结果表明:在萌发期间,青稞中的总淀粉、β-葡聚糖、游离酚、结合酚、总酚及游离黄酮含量呈下降趋势,脂肪、蛋白、纤维及结合黄酮与总黄酮含量呈上升趋势。萌发处理显著提高了参试青稞游离态提取物清除DPPH自由基能力,降低了青稞游离态提取物的铁离子还原能力及ABTS自由基的清除能力;显著降低了参试青稞结合态提取物清除DPPH自由基、ABTS自由基能力及铁离子还原能力。蓝色青稞(瓦蓝)经萌发后其游离态提取物具有较强抗氧化活性,黑粒青稞(14-946)经萌发后其结合态提取物能保存较强的抗氧化活性。相关分析表明,青稞中主要营养成分(脂肪、总淀粉、纤维、β-葡聚糖)含量与多酚及抗氧化活性有显著的相关性,营养成分含量的高低可以用来评估其酚类物质含量与抗氧化活性;游离酚、结合酚与3种抗氧化能力均呈极显著正相关,说明酚酸类物质是青稞不同形态多酚提取物抗氧化活性的主要贡献者,这为选择专用型青稞品种提供了便捷的方法。萌发可以改变青稞中的营养成分、多酚含量及抗氧化活性,因此选择合适的青稞籽粒颜色与适宜的萌发时间能更好地保留青稞的生物活性物质,有益于青稞资源的开发利用。     

不同类型音乐对小鼠空间学习记忆能力及机制的初步研究

目的:观察不同类型音乐对小鼠空间学习记忆能力影响,并对其机制进行初步探讨.方法:健康昆明成年小白鼠57只随机分成3组,空白对照组:不予任何特殊声音刺激,莫扎特音乐组和梁祝音乐组分别播放相应曲目,每天用相应音乐干预2 h,连续4 d.第5 d后进行Morris水迷宫测试,测试期间保持音乐刺激不变,放完音乐后测试潜伏期、经过平台次数和平台象限停留时间,实验结束后处死小鼠取脑组织并匀浆,检测乙酰胆碱酯酶活性(TchE)和单胺氧化酶活性(MAO).结果:梁祝音乐组与对照组、莫扎特音乐组相比,小鼠逃避潜伏期缩短,经过平台次数和平台象限停留时间增加(P＜0.05);而莫扎特音乐组逃避潜伏期,经过平台次数和平台象限停留时间虽有缩短,但与其它两组均无显著性差异.梁祝音乐组与对照组、莫扎特音乐组相比,小鼠脑组织TchE和MAO活性均明显减少(P＜0.05),而莫扎特音乐组的TchE和MAO与其它两组比较差别不大.结论:<梁祝小提琴协奏曲>能明显提高昆明小鼠的空间记忆能力,可能与该音乐引起的脑组织的乙酰胆碱酯酶和单胺氧化酶的活性降低,减少脑组织神经递质的降解,增加其浓度,促进学习记忆能力有关;而在本研究中<莫扎特D大调小提琴协奏曲>效果不明显.     

中心组合设计优化苦菜多酚类物质的提取工艺

对苦菜多酚提取工艺进行优化研究.用单因素试验对提取溶剂进行筛选,结果表明乙醇和一定浓度的盐酸组成的复合体系是理想的提取溶剂,用析因试验、最速上升试验、中心组合实验对提取条件进一步优化.结果发现乙醇浓度、提取温度、提取溶剂的pH、料液比都对苦菜多酚提取产生一定的影响,其中pH和乙醇浓度的影响最为显著.最佳的多酚类化合物提取条件为料液比1∶30,提取溶剂为65%乙醇,其酸度为0.78 mol/L,提取温度60℃,此时苦菜多酚的得率为19.12 mg/g.