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71.
水稻基因组DNA的RAPD扩增研究 总被引:2,自引:0,他引:2
通过对水稻RAPD反应条件比较研究,建立了对除草剂敏感致死水稻RAPD的最适反应体系和反应扩增程序,即在25止反应体系中,含10mmol/LTris-HCl(pH8.0),10mmol/LKCI,8mmol/L(NH4)2804,0.05%NP-40,2.0mmol/LMgCl2,0.1mmol/L(each)dTNPs,20ng引物,20ng基因组DNA,1.5U的Taq酶。反应扩增程序为:94℃变性2min;扩增40个循环,每循环包括:94℃变性10s,40℃退火30s,72℃延伸1.5min;最终延伸5min。 相似文献
72.
赵卫红 《盐城工学院学报(自然科学版)》2003,16(3):74-78
DNA分子技术为生物种内和种间的比较及遗传多样性提供了一种崭新而又行之有效的途径。简要介绍了Southerm杂交、RFLP、PCR、小卫星和微卫星技术、RAPD、原位PCR和DNA测序等几种DNA分子技术及其在鱼类种质资源研究中的应用情况。概述了我国分子水平上的鱼类种质资源研究现状和进展。 相似文献
73.
黄曲霉素和N-亚硝基化合物借诱发DNA互补碱对交联而启动癌变 总被引:6,自引:0,他引:6
致癌机理的双区理论发现,绝大多数环境中的致癌剂,均通过引起DNA股间互补碱对的共价交联而启动细胞的癌变.DNA碱稀释过滤法证明:致癌物中的霉菌毒素即黄曲霉素G 1 ,N-亚硝基化合物中的亚硝基二乙胺,二丁胺,吗啉和四氢吡咯、偶氮染料中的4-二甲氨基偶氮苯和含氮杂环化合物中的喹啉,均剂量相关地引起DNA股间交联.而相应类型的非致癌剂黄曲霉素B 2 、亚硝基二苯胺、4'-溴-4-二甲氨基偶氮苯和异喹啉,均不能引起此种交联.用DNA交联24h修复实验,首次提出测定DNA股间交联中、互补碱对交联比率的方法.证明:DNA非互补碱对交联被完全修复,但互补碱对间的交联则难以修复,而互补碱对交联的比率与其致癌强度相关.致突变谱数据证明:突变即点突变和移码变异都是由交联的互补碱对所指导.因此,双区理论是化学、内源物和物理致癌作用的合理机理. 相似文献
74.
葛属植物基因组DNA的提取和纯化 总被引:1,自引:0,他引:1
采用SDS裂解法提取了葛属植物成熟叶片的基因组DNA,并利用凝胶纯化试剂盒进行了纯化。结果表明,该纯化方法有效,所获得的DNA可用于PCR反应。 相似文献
75.
甲基亚硝基哌嗪第二活性区与DNA碱基烷化反应机理的MNDO研究 总被引:1,自引:0,他引:1
N-亚硝基化合物(NNC)在α-羟基化后生成重氮化物而与DNA结合发挥致癌作用是一已经被普遍接受的概念 但是仅用α-位的活性却在定性和定量两个方面均解释不了NNC的复杂的结构与致癌活性关系.越来越多的试验证据表明非α-位的代谢活化在NNC致癌机理中具有不可忽视的作用.我们曾对153种NNC的结构与致癌活性关系进行了定量模式辨认研究,结果表明:在NNC分子上经代谢产生两个亲电活性中心是形成最终致癌物的必要条件;并且,在α-位的第一活性中心与非α-位的第二活性中心之间的最适作用距离约为280pm;从而证明了NNC致癌作用符合于“双区理论”.根据双区理论,我们还探讨了N-亚硝基化合物中N-N键旋转能障与其致癌性的关系.对于甲基取代的亚硝基哌嗪及有类似结构的化合物比其母体化合物的致癌性有显著增强的现象,我们提出了:环上杂原子的邻基参与作用提高了甲基代谢产物的活性,形成第二亲电活性中心是重要影响因素的观点;这一观点在分析结构参数时发挥了巨大作用.由于确定这一邻基参与作用的机制对于深入探讨NNC致癌机理具有重要意义,本文采用MNDO方法对具代表性的化合物,3,5-二甲基亚硝基哌嗪的甲基代谢活化产物与DNA碱基的反应机理进行了研究. 相似文献
76.
自从双区理论提出以来,多种有机致癌剂的结构和致癌活性的关系(QSCAN)得到了成功的理论解释和定量表征.据双区理论的原则设计开发的几种顺铂类似物也显示出具有高于顺铂和碳铂的抗癌活性.根据双区理论,化学致癌作用的关键步骤是具有双官能亲电活性中心的最终致癌剂与DNA互补碱基对的横向交联.这种交联产物及其结构特征对于深入探讨致癌机理具有重要意义,也是引人关注的问题.但因DNA横向交联的量很少,以致难以进行实验观察.本文采用半经验分子轨道法 PM3对强力致癌剂苯并[a]芘(BaP)经代谢活化产生的最终致癌剂与DNA互补碱基对的横向交联产物进行了全几 相似文献
77.
78.
79.
绵羊全血中DNA的微量提纯 总被引:28,自引:12,他引:28
介绍一种快速,简便地从绵羊冰冻全血中提取高纯度,大分子量DNA,并适合边远地区实际室操作的DNA提取方法。 相似文献
80.
转基因鱼基因转移的基本方法及其研究进展 总被引:1,自引:0,他引:1
舒琥 《吉首大学学报(自然科学版)》1997,18(1):77-80
本文综述转基因鱼研究的进展,并介绍基因转移的基本方法和转基因鱼在鱼类育种方面的应用。同时,对转基因鱼研究中尚存在的问题及今后工作的方向作了说明。 相似文献