浅谈癌细胞结构的变化

本文从质膜、内质网、高尔基体、溶酶体、细胞核、骨架系统等八个方面对癌细胞的结构特征进行了总结     

青岛文昌鱼Sec61γ基因的克隆与同源性分析

对青岛文昌鱼神经胚cDNA进行测序，获得了4个Sec61γ的EST，经拼接得到编码文昌鱼Sec61γ基因全长cDNA序列并据此得到Sec61γ的氨基酸序列。通过对Sec61γ蛋白的结构分析及其与多种脊椎动物同种蛋白的同源性进行比较，发现Sec61γ与人、鼠、犬及果蝇的Sec61γ，具有较高的同源性，从一个侧面证明文昌鱼在进化上是位于无脊维和脊椎动物之间；同时说明Sec61γ基因在进化上具有较高保守性。     

成年大鼠急性脊髓全横断损伤后差异表达蛋白的蛋白组学研究

为进一步阐明脊髓损伤(SCI)的修复机制,对SD成年大鼠进行急性全横断损伤,将损伤前后的大鼠脊髓总蛋白质进行固相pH梯度双向凝胶电泳(2D-PAGE),经考马斯亮蓝染色后,借助PDQuest软件从中找出差异表达蛋白质点.应用基质辅助激光解吸电离串联质谱对差异表达的蛋白质点进行鉴定,成功鉴定出38种蛋白质.其中表达上调的蛋白质有电压依赖的阴离子选择通道蛋白1,α-烯醇酶、硫氧还蛋白依赖的过氧化物还原酶3、生长因子受体结合蛋白2等,表达下调的蛋白质有谷氨酰胺合成酶、14-3-3 epsilon、磷脂酰乙醇胺结合蛋白1、血红蛋白β-1等.鉴定出的差异蛋白多数涉及到神经细胞的增殖、凋亡、应激反应等过程.     

FBXO6稳定表达肿瘤细胞系的构建及其亚细胞器定位

检测FBXO6在多种肿瘤细胞中的表达和定位情况并构建稳定表达FBXO6的肿瘤细胞株。运用RT-PCR方法,在人胚肾293T细胞以及9种不同来源的肿瘤细胞中,检测了FBXO6的表达情况。以载体质粒pBabe-3Flag-FBXO6-puro/pBabe-3Flag-con、包装质粒pCMV-GAG-POL及包膜质粒pCMV-VSVG用Lipofectamine2000共转染包装细胞系293T,收集病毒颗粒感染A549细胞,经嘌呤霉素筛选稳定表达细胞株,Western blot鉴定FBXO6的表达。利用激光共聚焦荧光显微镜,采用间接免疫荧光方法,检测外源性FBXO6在A549中的亚细胞定位。在10种不同来源的细胞株中,FBXO6在A549细胞中的表达最高。成功筛选出嘌呤霉素抗性细胞系A549-Con与A549-3Flag-FBXO6。Western blot方法发现A549-3Flag-FBXO6细胞系稳定表达FBXO6蛋白。间接免疫荧光发现FBXO6与内质网tracker有共定位。FBXO6在肺癌A549细胞中高度表达,构建了稳定表达FBXO6的A549细胞系,部分FBXO6分布在内质网中。     

小麦内质网氧化还原酶在毕赤酵母中的表达

为开发健康天然的新型酶制剂型面粉改良剂,利用毕赤酵母重组表达了小麦内质网氧化还原酶1(wEro1);将wero1基因亚克隆至毕赤酵母表达载体pPICZα A,实现了wEro1在毕赤酵母(Pichia pastoris)GS115中的分泌表达,优化诱导表达条件后wEro1的产量可达(53.24±2.11) U/mL;应用硫酸铵沉淀和阴离子交换层析纯化了wEro1,对电泳纯wEro1进行酶学性质研究.结果表明:wEro1具有催化二硫键异构酶(PDI)的巯基氧化活性,且最适pH为7.5,最适温度为30℃;在低温和中性pH条件下,该酶具有较好的稳定性.将毕赤酵母重组wEro1添加到面粉中,考察其对面粉加工品质的影响,发现毕赤酵母重组wEro1改善面粉粉质特性的能力比大肠杆菌重组wEro1更强.     

敦化雁鸣湖镇森林康养区森林挥发物变化规律及康养缓解2型糖尿病患者应激反应

明确敦化雁鸣湖镇不同森林康养区7月份森林挥发物变化规律及康养对2型糖尿病患者血清应激激素的影响,分析相关机理.采用吸附剂富集的方法,在雁鸣湖镇室外温泉区、人工落叶松林区、白桦林区和阔叶混交林区收集森林挥发物.随机招募26名志愿者,在雁鸣湖镇进行为期3周的森林康养,通过调查问卷法判定康养对心境相关指标的影响;液相色谱-质谱法检测血清中肾上腺素、去甲肾上腺素、多巴胺和皮质醇含量,开展相关分析.结果显示:敦化雁鸣湖镇森林康养区室外温泉区共鉴定出87种森林挥发物,人工落叶松林区88种,白桦林区65种,阔叶混交林区50种;挥发物分为14类,分别为芳香类、酯类、醇类、酮类、烷烃类、含N类、烯烃类、含S类、醛类、醚类、羧酸类、含O杂环类及其他类.不同区域森林挥发物种类和相对含量不同,4个区域森林挥发物的总体日变化趋势是上午种类多,之后逐渐减少.通过调查问卷可知:在雁鸣湖镇进行为期3周的森林康养活动,可提高糖尿病患者及健康志愿者睡眠质量;降低健康志愿者的心理应激反应,对2型糖尿病患者的心理应激反应也具有缓解效应.与健康志愿者比较,森林康养显著降低了2型糖尿病患者血清中儿茶酚胺及皮质醇水平(P<0.05).可见,森林康养可调节相关心境指数,降低糖尿病患者的应激反应及血清相关应激激素水平.     

腹腔镜与开腹胆总管探查术对机体应激反应的影响

比较腹腔镜胆总管探查术和开腹胆总管探查术对机体应激反应的影响;选择40例择期行胆总管探查术的患者,随机分为两组：腹腔镜胆总管探查取石组（L组,20例）和开腹胆总管探查取石组（O组,20例）,分别于手术前1d,手术结束时,手术后1、3d采静脉血,测定血浆促肾上腺皮质激素（ACTH）、皮质醇（Cor）、肾上腺素（E）和去甲肾上腺素（NE）的浓度变化;ACTH、Cor、E和NE在手术结束时达到最高值,较术前显著升高（P〈0．01,P〈0．05）;ACTH和Cor浓度在术后第1d,E和NE浓度在手术结束时和术后第1d,O组明显高于L组（P〈0．0．5）;两种手术方式均可引起明显的应激反应,但O组引起的应激反应较L组重。     

应激：从分子到行为

本书综合介绍了神经系统应激反应的分子基础,对于机体应激反应的分子、生理和行为,进行了独特而基础的描述。本书的作者均为该领域的顶尖专家,他们总结了这些领域的最新研究进展。     

长波紫外光引起人红细胞自体荧光增强效应的研究

研究长波紫外光对红细胞的生物学效应之一——自荧光增强效应。用不同强度长波紫外光(365 nm)照射人红细胞,观察红细胞自体荧光变化。在实验中加入外源活性氧理论模拟非连续紫外光引起自荧光变化。结果随着照射强度的升高,红细胞自荧光作用逐渐加强;随着时间延长荧光逐渐减弱。连续紫外光照射下,起始自荧光增强速率是受到细胞内氧自由基浓度的影响;因此,在过程中紫外光的作用之一是生成大量活性氧,进一步影响自荧光增强的速率。在紫外线照射充氧自血回输疗法(UBIO疗法)过程中,对血液进行短时间的紫外光照射,必然会使红细胞中的血红素发生光解,并生成了一定量的活性氧自由基(ROS),再将红细胞回输人体后可能引起人体内的应激反应,从而激发清除这些产物的一系列反应,从而改善人体环境。