枯草杆菌6-磷酸葡萄糖酸脱氢酶的分离纯化及部分性质研究

采用DEAE—Sephaurose离子交换层析，Blue-Seplaarose CL-6B特异结合层析和Sephadex G-200凝胶过滤技术，对枯草芽孢杆菌中的6-磷酸葡萄糖酸脱氢酶进行了分离纯化，纯化倍数为112．3倍，比活为1．46U／mg，回收率为8．2％，纯化酶液经聚丙烯酰胺凝胶电泳检验为单一带，测得全酶相对分子质量为107kD，具有两个分子量相同的亚基，亚基相对分子质量为51kD，最适pH值为8．0，最适温度为30℃，对热不稳定，以6-磷酸葡萄糖酸和NADP^ 为底物，其Km值分别为Km1(NADP^ )=19．8μmol／L和Km2(6-GPA)=22．6μmol／L，在5mmol／L～50mmol／L浓度范围内，Mg^ ，Ca^2 和Mn^2 对酶有激活作用，Fe^3 和Cu^2 对酶有抑制作用，K^ ，Na^ ，Cl^-，NO^-3，SO^-4对酶几乎没有影响，用PMSF，TNBS，NBS，DTT和BrAc对酶进行修饰，实验结果表明，丝氨酸、苏氨酸、赖氨酸和组氨酸残基可能是该酶活性中心的功能基团。     

表面等离子体子共振光化学传感器用于葡萄糖溶液的测定

采用平面衍射光栅作分光系统,光电耦合器件(ChargeCoupledDevice,CCD)作检测器,自行组装了一台基于波长变化的表面等离子体子共振(SurfacePlasmonResonance,SPR)传感器,将其用于葡萄糖溶液的检测。实验结果表明:传感器的响应值与葡萄糖溶液的质量百分比浓度呈线性关系,其线性方程为:λ=647.56+330.90C,回归系数为0.9904。采用SPR方法对5%和10%的两种医用葡萄糖注射液进行测定,同时采用药典法进行对比,二者的相对标准偏差分别为2%和3%。     

光谱分析用于无创血糖检测的微量葡萄糖测量

采用无创伤的方法检测血糖是人们长期以来追求的目标,是当今国际医疗和传感器领域十分关注的课题之一.无创血糖检测将使糖尿病检测手段产生质的飞跃,对糖尿病的治疗具有重要的实际意义.唾液中葡萄糖含量仅为血液中葡萄糖含量的1 50～1 100,所以通过人的唾液测量血糖值,其精度要达到0.01mmol L.基于光谱分析技术,实现了葡萄糖的微量检测,精度高,重复性好.为实现无创血糖检测奠定了良好的基础.     

甘氨酸葡萄糖络铜(Ⅱ)的合成,表征及对O-2·和DNA的作用

合成了二甘氨酸葡萄糖络铜(Ⅱ),并进行了组成及结构研究.采用比色法和荧光法研究该化 合物对超氧阴离子自由基和DNA的作用.结果表明:二甘氨酸葡萄糖络铜(Ⅱ)配合物能显著抑制 超氧阴离子自由基的生成,并能与DNA有效的结合.     

葡萄糖-6-磷酸脱氢酶的分离纯化

报道了葡萄糖-6-磷酸脱氢酶的分离纯化. 在0.1 mol/L的碳酸氢钠溶液中,以溶胀法从酵母中提取胞内酶.粗抽提液经过60 %～75 % 饱和度的硫酸铵盐析, Sephadex G-100凝胶柱层析.葡萄糖-6-磷酸脱氢酶的收得率为12.4%,纯化倍数达51.2.     

细胞膜淀粉酶的纯化和分析(英文)

一种Ruminobacteramylophilus70细胞膜联的新支连淀粉酶被4%TritonX 100提取.其新支连淀粉酶活性存在于70%的硫酸铵沉淀组分中.通过等电聚焦纯化,根据SDS凝胶电泳测定,其新支连淀粉酶的分子量是91 2kDa,其等电点是5 8～5 9.根据另一种淀粉酶活性凝胶电泳的方法测定,其新支连淀粉酶的分子量大约是92 6kDa.在R.amylophilus70细胞中存在着两种类型的淀粉酶(可溶性淀粉酶和膜联淀粉酶,比如新支连淀粉酶)共同承担分解淀粉的作用.     

稀酸降解植物纤维素的研究

对小麦秸秆纤维素的稀酸降解进行了研究.考察了温度、质量分数、反应时间等因素对纤维素酸降解的影响.采用正交试验法探讨了乙酸、盐酸等稀酸降解植物纤维素的最佳反应条件.对预处理试样再进一步碱加热处理,并在最佳条件下酸降解.结果表明:酸在降解过程中起催化作用,不能只靠增加酸质量分数来提高转化率,而对纤维素进行深入处理,使纤维素更多地暴露在外,才是最有效的办法.     

小球藻的筛选和异养培养

从北京清河筛选出了具有异养能力的一株藻类,经初步鉴定为小球藻.在异养批量培养条件下,研究了不同氮源和碳氮比对筛选小球藻生长的效应.当葡萄糖作为惟一碳源时,硝酸钾和尿素都可以分别作为惟一氮源支持小球藻快速持续生长,而氯化铵作为惟一氮源时因使培养物中的pH快速降低而抑制了小球藻的进一步生长.当葡萄糖和硝酸钾分别作为小球藻生长的惟一碳源和氮源时,在碳氮质量比从5到20范围内,小球藻的生长随碳氮质量比的升高而明显增加,最大OD680nm达到了73.8.     

地衣芽孢杆菌耐高温α-淀粉酶基因工程菌的研究进展

综述了国内外地衣芽孢杆菌α-耐高温淀粉酶基因工程菌的研究进展，并就基因工程菌的优缺点进行了简要分析．     

中空纤维酶膜反应器制取麦芽低聚糖工艺的优化试验研究

采用聚砜中空纤维酶膜反应器,运用α－淀粉酶和异淀粉酶双酶协同作用酶解淀粉制取麦芽低聚糖的酶膜反应连续化工艺．采用正交实验设计方法,获得最佳工艺条件,确定双酶的最佳补加量及反应所要求的最佳温度和糖化补酶时间,产品质量稳定,Ｍ３～６含量达７０％以上．试验表明,酶膜反应连续化新工艺是可行的,为工业化试验提供可靠的设计参数．