不同pH值的酸处理DNA溶液的拉曼光谱分析

通过拉曼光谱研究了经不同pH值的酸处理后的DNA溶液．小牛胸腺DNA被配制成pH6．0、pH5．0、pH4．0、pH3．0、pH2．0、pH1．0的酸性溶液，经24h充分水合后测试其拉曼光谱．实验结果表明，DNA分子内部产生了明显的质子化，其拉曼特征频率和强度均发生了变化，而且不同的pH值致使它们的变化程度也不同．对DNA分子结构的影响包括磷酸骨架基团，脱氧核糖及碱基．随着酸性的增强，DNA的构型也发生变化：在pH6．0、pH5．0时DNA溶液为标准B构型，而在pH4．0、pH3．0、pH2，0的DNA溶液出现B和C构型共存，到pH1．0时出现了Z构型．从pH3．0碱基开始质子化，逐渐地GC碱基对之间形成了Hoogsteen型氢键，AT碱基对之间的氢键发生断裂，双螺旋结构遭到破坏，而脱氧核糖也受到不同程度的损伤．     

南京市几种平菇和香菇酯酶同工酶的初步研究

平菇和香菇均为担子菌食用真菌。平菇为伞菌目侧耳科侧耳属真菌,香菇为伞菌目侧耳科香菇属真菌。担子菌分类习惯以形态差别为依据,方法简便,但由于生态条件影响所产生的差别会给分类工作增加很多困难。六十年代后,由于电泳分离同工酶技术的发展,国外真菌学者曾先后用酚氧化酶(漆酶和酪氨酸酶)同工酶酶谱进行真菌鉴定并作为化学分类的依据。另外,在研究糙皮側耳时,对一些單核(体)和单核(体)的异核体以及异核体杂交子实体产生的单核菌株进行比较,发现碱性条件下电泳时杂交体酶谱和亲本酶谱不同。我国黑龙江省应用微生物所方自若等也曾用等电聚焦法对几种食用菌胞外溙酶同工酶进行研究,获得了侧耳属七个种的酶谱。     

慢性肾衰竭继发性甲旁亢患者中CaSR基因intron 5多态性的研究

为研究中国江苏汉族人中钙敏感受体(calcium-sensing receptor,CaSR)基因单核苷酸多态性与慢性肾衰竭(chronic renal failure,CRF)继发性甲旁亢(secondary hyperparathyroidism,SHPT)的关系．为此采集江苏省122例慢性肾衰竭继发性甲旁亢(CRF-SHFT)患者及25例正常人血液样本,通过PCR-RFLP的方法分析CaSR基因内含子5(intron5)BseR Ⅰ多态性;以标准方法测定血清钙、血清磷、血清全段甲状旁腺素(intact PTH,iPTH)3项生理指标;对检测的结果进行统计分析．结果发现,CRF-SHPT患者intron 5多态性频率与正常人没有明显差异;汉族人intron5多态性频率与其它种族有显著差异;TT基因型患者的Ca^2 、iPTH的血清浓度显著低于CC基因型的浓度,结论：CaSR基因intron5多态性频率具有种族差异性;intron5多态性与Ca^2 、iPTH的血清水平密切相关,影响CRF-SHFT病情的严重程度。     

暗纹东方(Takifugu obscurus)核型研究

东方属的河鱼在中国东海及其周边水域共有23个物种被鉴定,其中的7个物种,即星点东方(Takifugu niphobles)、豹东方(T. pardalis)、异被东方(T. poecilonotus)、幅斑东方(T. radiatus)、红鳍东方(T. rubripes)、黄鳍东方(T.xanthopterus)以及痔斑东方(T. chrysops)的染色体核型已有报道[1,2],有3个物种的RAPD标记被用于种类鉴别和亲缘关系分析[3].但暗纹东方(Takifugu obscurus)的细胞遗传学研究尚未见报道.暗纹东方是长江河口水域习见种类,其脂肪含量低,人体必需氨基酸含量高,肉质鲜美,有良好的国际市场.但随着长江水质恶化,有回游习性的野生暗纹东方资源逐年锐减.同时,1998年以来该物种的人工繁殖规模逐渐扩大,由于亲鱼极少而引发近亲交配以及遗传漂变,出现种质退化.由于人工引种及混养引起的种质混杂亦日趋严重,影响产品声誉.本文采用肾细胞染色体制片法,对野生暗纹东方雌雄二种性别的个体进行了核型分析,为深入进行东方种质鉴定以及遗传资源保护,提供理论依据.     

用喇曼光谱测试生物样品的技术探讨

讨论了用喇曼光谱测试生物样品时常遇到的荧光干扰和灵敏度低等技术问题，并通过实验提出了在测试时应注意的事项和改进措施。     

水溶液中的环状DNA超螺旋空间构象

质粒DNA水溶液的喇曼光谱研究表明,854和1-083-cm-1特征峰反映了DNA主链骨架三级结构的振动状态;表征脱氧核糖中C-C伸缩振动的969-cm-1峰,其相对强度值介于线性DNA在水溶液和在纤维状态下所得数值之间(0.46＜0.83＜1.10);DNA中胸腺嘧啶的堆积反应活性增加,A-T间氢键能减弱.这些参数是辨认环状DNA分子三级结构的有效依据.     

家蚕蛹抗菌肽β组分水溶液的激光喇曼光谱

报道了家蚕蛹抗菌肽β组分水溶液的喇曼光谱，结果表明，抗菌肽β组分的主链结构主要由β－螺旋及小量的β－折叠和β－回转构成，并提示抗菌肽β－组分可能为糖肽。     

Trichoderma reesei纤维素水解酶的糖苷合成性质

通过非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳(从(Trichoderma reesei天然纤维素水解酶中分离纯化得到了一种相对分子质量约为65 000的蛋白组分.分别以pNP-Glu、pNP-Gal、oNP-Gal和Avicel作为底物,均检出该组分的水解活性.此外该酶对CMC-Na有可被测出的弱活性.以pNP-Glu为底物,45℃时,其水解酶性质的米氏常数Km=3.04 mg/mL,Vmax=3.77 μmol/min.用DNS法和对硝基苯酚法(仅对含有对硝基酚结构的底物pNP-Glu、pNP-Gal和oNP-Gal)分别检测了在180 min反应时段内产物还原糖和对硝基苯酚的含量变化,结果显示在封闭的反应体系中有明显的可逆反应存在,并出现了周期性振荡的特征,有糖苷合成活性的表现,水解产生还原糖和对硝基苯酚的量,呈现出分别为25.43±8.34 min和36.25±2.50 min的含量增减振荡周期.与此同时,为了证实该酶糖苷合成活性的存在,以葡萄糖作为底物与酶反应,得到了7.00±4.83 min的葡萄糖含量周期性波状振荡结果.对底物为pNP-Glu反应15 min后的产物作乙酰化处理GC/MS分析,结果产物中有含二糖结构的产类型,揭示了这个水解酶的糖苷合成的特点.这是首次从Trichoderma reesei纤维素水解酶中分离得到了具有糖苷合成活性的酶.