联会复合体蛋白SYCP2 C-末端的表达、结晶及晶体初步分析

联会复合体蛋白2(SYCP2)作为减数分裂过程中表达的特异性蛋白,是联会复合体轴向组分之一.许多研究表明SYCP2对联会复合体正确组装/去组装可能起着重要作用,尤其是C末端,但具体机制尚不清楚.对鼠源的SYCP2-CTR进行了表达、纯化并用坐滴气相扩散法进行了结晶和优化.在日本PEK收集了1套分辨率为0.4 nm的数据.晶体的空间群为C2,晶胞参数a=16.325 1,b=7.426,7 c=14.823 nm;α=γ=90?,β=119.464?.1个不对称单位4个分子,其溶剂量约为46%.     

标记减数分裂遗传重组的免疫荧光染色方法

通过免疫荧光染色方法制备小鼠精母细胞联会复合体, 研究其形态组成与遗传重组特征,展示雄性小鼠遗传重组图谱并分析其重组位点(MLH1位点)的分布特征.4只小鼠共145个精母细胞在平均每个细胞的MLH1位点数为23.3±2.4; 在19个常染色体联会复合体中, 未发现有3个MLH1位点的, 具有1个MLH1位点数的较多, 平均为14.2; 无XY联会复合体的细胞占所有细胞的4.1%, XY联会复合体上有MLH1位点的细胞占30.2%; 联会复合体上有裂缝的细胞占0.7%.通过联会复合体免疫荧光染色可以清晰地分辨出联会复合体(红色)、着丝粒(蓝色)和MLH1位点(绿色), 是遗传重组分析的是一种强有力工具.     

棕色田鼠联会复合体与染色体轴的观察

采用低渗、滴片和硝酸银染色技术,对棕色田鼠的联会复合体和减数分裂中期Ⅰ染色体轴的形成过程及其两者问的关系进行了分析研究。结果表明:联会复合体起始于偶线期,成熟于粗线期,于早双线期到中双线期解体;而中期Ⅰ染色体轴是在晚双线期才开始形成。二者之间存在一个无任何轴性结构的时期。联会复合体与中期Ⅰ染色体轴是减数分裂染色体中先后出现的两种不同的轴性结构。     

关于染色质结构研究的若干进展

染色质是真核细胞间期核中DNA和蛋白质组成的复合体。关于染色质结构的研究一直是细胞生物学的重大理论课题。1973年,人们发现了染色质的基本结构单位——核粒。这是染色质结构研究中的突破性进展。七十年代里,一些学者对染色质结构的研究情况做过综述。八十年代以来,关于染色质结构的研究发展很快。目前,人们对于核粒核心的结构细节、核粒结构的动态变化以及染色质高层次结构等等问题都有了进一步的了解。下面仅就上述几个问题的近年来研究进展做一简要介绍。     

联会复合体的研究及其在细胞遗传学中的应用

联会复合体(Synaptonemal Complex)是减数分裂前期染包体配对时,同源染包体之间所形成的一种复合结构。最初是由 Moses,M.J.和 Fawcott D.W.于1956年分别在喇蛄、家鸽、猫及人的初级精母细胞的超薄切片中观察到的,Moses M·J·第一次将这种复合结构定名为联会复合体(SCs)。到目前为止,几乎所有观察过的真核生物如真菌、藻类、裸子植物、单子叶植物、双子叶植物、鞭毛虫纲、甲壳纲、昆虫纲、两栖纲、鸟纲和哺乳动物都观察到过这种结构,至于原核生物是否存住 SC_5,尚未见报导。     

转录辅助复合体SAGA成分蛋白作用的研究进展

真核细胞中承载基因的染色质是一种非常精密而严谨的结构.这种DNA高度压缩、复杂的染色质结构影响了转录因子和RNA聚合醇Ⅱ等基本转录机器结合到相应的DNA位点上.因此基因要转录激活就必须借助于转录辅助复合体消除染色质的结构抑.转录辅助复合体可以分为两类一类主要是利用水解ATP来改变核小体相对于DNA序列的缠绕方式及排列;另一类是通过对核心组蛋白进行共价修饰来改变核小体和DNA的结合能力.SAGA复合体属于后者,对红蛋白具有乙酰化的作用.酵母中的SAGA复合体是一个分子量为180万道尔顿的多功能蛋白复合体,本文将着重介绍SAGA复合体成分蛋白在真核生物基因转录起始中的作用.     

赤点石斑鱼精子发生和形成的超微结构研究

用透射电镜研究了赤点石斑鱼Epinephelus妇精子发生和精子形成过程。结果表明，赤点石斑鱼精子发生经历了初级精原细胞、次级精原细胞、初级精母细胞、次级精母细胞、精子细胞阶段。精子细胞再经过精子形成过程成为精子。在初级精原细胞、次级精原细胞阶段，细胞核释放出拟染色体。拟染色体分布于精原细胞和前期Ⅰ的初级精母细胞的细胞质中。初级精母细胞减数分裂早期同源染色体配对明显可见，并形成联会复合体。精子细胞之间存在细胞联系（桥粒）。赤点石斑鱼成熟精子的特点是细胞核圆形，核内染色质致密，没有核泡（核空隙）。精子尾部细长，横切面为典型的“9＋2”轴丝结构。     

联会复合体图像动态线性灰度变换

本文在研究了联会复合体图像特征的基础上,提出了一种适用于对这类图像进行增强处理的动态杰度变换.     

用AFM观察小白鼠心肌核DNA片段的基因体外表达和垃圾DNA的相互作用

用AFM直接现场观察、体外表达等实验技术组合,观察到小白鼠（Balb/c）心肌核DNA片段的基因在体外表达过程中形成的n mRNA（n=9）线型链状复合体,处于垃圾DNA片段的特定的“翻译平台”上,其每种mRNA两端非共价键分别结合自己编码蛋白质（即分子开关）,中间的编码序列均非共价结合完全可解离的翻译活性因子等多种蛋白质：这些蛋白质可能均由垃圾DNA片段的极复杂的立体结构所形成的、匹配协同的、专一性蛋白质通路所调控,该通路对蛋白质按顺序分别进行特异性双向调控.核内n mRNA线型链状复合体在体外可翻译出LDH等蛋白质,并显示n mRNA翻译的“群体效应”.用AFM还观察到胞质制取的n mRNA（n=12）线型链状复合体（无垃圾DNA存在）,体外翻译出少量LDH等蛋白质,并显示n mRNA翻译的＂群体效应＂.本工作展示了未来运用AFM观察体外表达等生物学反应,研究基因表达与调控机制及其与垃圾DNA相互作用的前景.     

光谱在生物学研究中的应用

最近几十年有关光学和振动光谱在生物大分子结构解析理论和应用方面的研究有较快进展.利用光谱、特别是振动光谱来研究生物大分子形貌和动态,如:蛋白质折叠及相关问题是当今生物物理和生物化学领域关注的热点话题.该文介绍光谱包括拉曼、红外光谱在这些领域的应用和发展,结合作者自己研究实际,介绍生物光谱一般的理论,并列举一些实例,探讨生物光谱在研究多肽-蛋白质无序折叠、蛋白酶的功能-结构关系,以及辐射生物学中离子辐射对蛋白质和DNA及组分损伤反应等方面的应用.     

激光对小鼠精母细胞联会复合体影响的研究

以亚离子和He-Ne激光照射活体雄性小鼠睾丸，观察小鼠睾丸中精母细胞的联会复合体。发现小鼠精母细胞的联会复合体发生一定程度的畸变，说明激光辐射不仅可造成哺乳动物表面组织热损伤，还有可能诱发染色体变异，这对今后激光在遗传育种方面的进一步开发应用有重要意义。     

犏牛精母细胞联会复合体与雄性不育关系的研究

采用界面铺展硝酸银染色技术，研究了公犏牛的精母细胞联合复合体（ｓｙｎａｐｔｏｎｅｍａｌｃｏｍｐｌｅｘ，ＳＣ），结果表明：（１）在减数分裂过程中仅有少数精母的常染色体能形成ＳＣ结构，Ｘ、Ｙ染色体轴 围虽积聚有许多微小的深色颗粒状物质，但未见Ｘ、Ｙ染色体的明显联会（２）在常染色体的联会中，有较多的三价体、插入环等联会异常现象；（３）常染色体ＳＣ相对长度与体细胞染色体的相对长度间有显著相关性（Ｒ＝０９６     

AFM观察小鼠心肌核DNA片段的基因组合形成"基因系"的系统性和垃圾DNA的相互作用

用原子力显微镜(AFM)直接观察、小白鼠心肌等组织的核DNA片段的基因体外转录等多种实验技术组合,通过AFM观察到心肌核DNA片段上的基因,处于垃圾DNA的“转录平台”上,在体外转录过程中,由n(n=3、4等)个活性基因节,对应的n-1个“基因间隔”,依特定的排列组合分别形成n(n=3、4等)种大小不同的“基因系”,各“基因系”中的基因节同时转录,分别形成对应nRNA(n=9、12等)链状复合体,nRMA链状复合体分别与对应基因系的单链DNA两边的“接口”相联。核内对应nmRNA数量减少,形成负反馈效应后,使nRNA从对应“基因系”上迅速解离下来,核内经“转录后修饰”形成对应nmRNA链状复合体。该复合体主要在核内,处于垃圾DNA的“翻译平台”上进行蛋白质翻译,并在核内加工修饰形成有活性蛋白质。本工作展示了未来运用AFM观察生物学反应、研究核基因转录与调控的分子机理、基因组合形成基因系的系统性和垃圾DNA的相互作用的前景。     

光合细菌捕光色素蛋白复合体LH2的结构与功能

概述了近年采光合细菌捕光色素蛋白复合体LH2的结构研究状况,并在此基础上阐述了各组分的功能、特点及相互作用.     

光合系统Ⅱ(PSⅡ)球囊体的纯化和特征

光合作用的氧释放机理迄今仍是一个尚未研究清楚的理论问题.在绿色植物中有关水的光氧化释氧机理的学说主要是基于动力学研究提出的“S-状态”模型.目前国外正致力于具有释氧活性的色素蛋白质复合体的分离提纯及其功能的研究. 我们用温和的去垢剂胆酸钠增溶菠菜叶绿体,经过差速和蔗糖密度梯度离心分离提取了具有释氧活性的PSⅡ球囊体.这种球囊体在电子显微镜下可以看到囊套囊的结构,有些呈比较规则的半球形.冰冻蚀刻电镜可清楚地观察到PSⅡ的叶绿素蛋白质复合体.推测在离体条件下得到的这种具有释氧活性的球囊体在活体内可能是叶绿体类囊体膜上的PSⅡ结构单位,或者是类囊体膜上含有PSⅡ活性的结构在分离过程中的某种重组.     

棕色田鼠精母细胞中联会复合体的研究

以表面铺展法制备棕色田鼠精母细胞联会复合体标本，经硝酸银染色作电镜观察．结果表明，在减数分裂前期 Ｉ Ｘ 和 Ｙ 染色体的形态和行为同常染色体有明显差异； Ｘ Ｙ 染色体的配对起始于早粗线期，成熟于中粗线期，在晚粗线期先于常染色体解联会； Ｘ 染色体未配对区域自身折叠，形成发夹状结构     

一种基于层次图聚类的蛋白质复合体检测算法

蛋白质复合物在生物生命活动中扮演着重要作用,基于蛋白质互作用(PPI,Protein-Protein Interaction)网络进行复合物检测是当前的一个研究热点.针对此,提出了一种基于层次图聚类的蛋白质复合物检测算法,其中结合网络拓扑结构和蛋白质复合物信息,给出一种网络结点的权重定义方式;边在蛋白质互作用网络的拓扑属性与层次图聚类算法相结合,提出了一种基于层次图聚类算法的蛋白质复合体识别算法HGCD(Hierarchy Graph Clustering based method for Protein Complexes Discovery).在Utez酿酒酵母PPI网络中进行蛋白质复合物识别结果表明,HGCD算法可以发现网络中的蛋白质复合体.     

花背蟾蜍角膜和皮肤蛋白质的SDS-PAGE分析

本文用梯度SDS-PAGE方法,分析和比较了花背蟾蜍蝌蚪和成体皮肤及成体角膜中蛋白质组分的异同,结果表明成体角膜约有33种蛋白质组分;成体皮肤约有27种;蝌蚪皮肤约24种.蝌蚪皮肤与成体皮肤蛋白质组分数量和分布趋势相似,但成体皮肤的组分比蝌蚪的多,一些蛋白质组分的相对含量与蝌蚪的有差别.角膜与前两者相比差别明显,一是蛋白质组分数较多,其次分布趋势差异较大.     

SNF11蛋白的表达纯化

SWI/SNF复合体是由多个亚基组成的复合物在真核细胞中具有较高的保守性,能通过其自身ATP酶的活性调节染色质的结构,从而影响大量基因的表达,在人类神经系统的发育形成和功能发挥中起重要作用.SNF11是酵母SWI/SNF复合体中的一个亚基组分,能与核心亚基SWI2/SNF2相互作用.在本研究中,构建了p ET.32M.3C-SNF11的表达质粒,大量表达出SNF11的重组蛋白,通过Ni柱亲和层析和分子筛层析技术得到较纯的SNF11蛋白,并用分析型分子筛层析技术分析了蛋白的构象和聚集状况,为进一步研究SNF11蛋白与SWI/SNF复合体中其他亚基组分的相互作用提供了一定的基础.     

酿酒酵母细胞周期复合体装配的动态研究

从酿酒酵母细胞周期内蛋白质复合体构成的时间网络出发,通过区别酵母复合体的2类亚基,并采用系统分析和数理统计的方法,对酵母细胞周期内复合体装配的时间特征、模式特征,以及局域和功能特征等问题进行探讨,从而得到了一些规律性和启发性的结论.