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相似文献
 共查询到20条相似文献,搜索用时 93 毫秒
1.
提取水稻线粒体DNA的一种简易方法   总被引:3,自引:0,他引:3  
介绍了一种利用常用的普通试剂提取水稻线粒体DNA的简便方法 .与其它方法相比较 ,它具有省时、省钱、高效、快捷、简单等特点 .用该方法提取的水稻线粒体DNA ,经紫外分光光度计测定其纯度、限制性内切酶进行酶切和随机引物进行RAPD反应的结果表明 ,完全可以满足作为RFLP和RAPD等分析质量的要求 .  相似文献   

2.
聚丙烯酰胺凝胶电泳检测水稻SSR标记   总被引:3,自引:0,他引:3  
以水稻为试验材料,提取水稻基因组DNA,选择多态性SSR标记,并将标记产物进行聚丙烯酰胺凝胶电泳,最后硝酸银染色,试图建立了一种行之有效、简便、快捷的应用于水稻SSR标记的PAGE银染检测方法。  相似文献   

3.
对小麦种子进行了不同的处理,并通过PAGE电泳技术对发芽10 d的小麦种子G6PD进行了测定,结果表明:各处理均可引起G6PD同工酶酶活性或酶带的改变,但表现不同.与其它处理用相比,离子注入后转DNA处理G6PD主要表现为酶活性的明显减弱或酶带消失,但转大豆DNA片段的处理和转全长DNA的处理相比,前者比后者酶谱变化更明显.  相似文献   

4.
 为了寻找操作简便、耗时短、成本低,适用于简单重复序列(SSR)分析的水稻基因组DNA快速提取方法,以水稻沈农265的半粒干种子为材料,采用SDS提取液进行一步裂解,并将RNA去除操作融入抽提过程,SDS浓度为0.5%(W/V),水浴10min,氯仿/异戊醇抽提,简单快速地获得了高质量水稻基因组DNA。经琼脂糖凝胶电泳检测,DNA纯度较高,完整性较好,能够满足SSR扩增模板的需求。该方法可大大缩短水稻种子DNA提取时间,为SSR标记在水稻种子遗传多样性分析、分子标记辅助选择等方面的应用奠定基础。  相似文献   

5.
对甲氧基苯甲醛为荧光探针测定DNA含量   总被引:1,自引:0,他引:1  
基于DNA与对甲氧基苯甲醛的荧光猝灭效应,以甲氧基苯甲醛作为荧光探针建立了一种简便快速测定DNA的荧光分析方法.考察了pH、荧光探针浓度、温度、放置时间等条件对荧光探针及DNA测定的影响.该方法测定DNA含量的线性范围为51~1 000 ng/mL,检出限为30 ng/mL,10次测量500 ng/mL DNA的相对标准偏差为2.0%,可用于合成样品的测定.  相似文献   

6.
一种改良的水稻总DNA提取方法   总被引:2,自引:0,他引:2  
在植物DNA提取“SDS法”基础上,提出了一种改良的DNA提取方法,称“剪切法”.采用“剪切法”、“液氮法”和“钢珠法”3种方法提取水稻幼叶总DNA并进行了电泳分析和PCR检测,同时首次选择了以幼穗为提取材料,用“剪切法”分别提取水稻幼穗、幼叶和老叶的总DNA并进行比较,结果表明:“剪切法”是一种简易、经济、高质的DNA提取方法,对于以F2极端分离群体作为基因定位群体,取幼穗为提取水稻总DNA的材料是一种经济便捷的途径.  相似文献   

7.
分别以小立碗藓(Physcomitrella patens)和水稻(日本晴亚种)(Oryza sativa spp.japonica)为标样,用流式细胞术分别测定了中华蓑藓(Macromirium cavaleriei)、钝叶蓑藓(M.japonicum)和缺齿蓑藓(M.gymnostomum)3种藓类植物的DNA C-值,由此建立了应用流式细胞术测定蓑藓属植物DNA C-值的方法,讨论了影响藓类植物DNA C-值测定结果的因素.最后讨论了苔藓植物DNA C-值变异式样、系统发育和分类学意义,以及今后有关藓类植物DNA C-值研究中值得关注的几个方向.  相似文献   

8.
EDTA萃取法分离自然水体中生物膜胞外聚合物   总被引:15,自引:0,他引:15  
用EDTA水溶液作为萃取剂,对自然水体中培养的生物膜胞外聚合物进行了萃取和分离.通过对糖类、蛋白质、DNA含量的测定,选择了最佳萃取分离条件.结果表明该方法萃取效率高、操作简便、重现性好.  相似文献   

9.
采用试剂盒QIAamp DNA Mini Kit从距今4000年前新疆小河墓地出土的黄牛毛皮中提取出古DNA,并对黄牛线粒体D-loop区部分片段进行了PCR扩增和序列测定.结果表明:所提取的古DNA真实可信;且该方法简便、高效,适用于古代动物毛皮DNA的提取.  相似文献   

10.
继80年代以来植物自花授粉后外源DNA导入棉花、水稻和大豆为受体的研究获得成功之后,近年来山东省农科院作物所黄承彦等又在小麦上导入外源DNA的研究获得成功。  相似文献   

11.
目的:为确认Tn3-gpt已插入小鼠巨细胞病毒(mouse cytomegalovirus,MCMV)基因组的特定位置,改进大分子病毒DNA的测序方法,建立以230kb DNA为模板直接进行DNA序列测定的方法。方法:待测MCMV的Tr3-gpt插入突变株感染NIH3T3细胞后,从培养液中制备病毒颗粒并从中纯化得到基因组DNA,以此DNA为模板,合成的寡核苷酸为引物,用热循环方法按Promega公司的DNA Cycle Sequencing System试剂盒的方法进行测序。结果:获得纯度较高可直接作为模板进行测序的:DNA,测序所得放射自显影图片条带清晰明亮,间隔正常,分辨率较高,可顺利读出插入位点的MCMV的DNA序列,证实Tn3-gpt插入在特定的位置。结论:长达230kb的大分子病毒DNA可直接作为模板,用热循环测序方法进行测序,无需切割成小片段后才进行测序。  相似文献   

12.
DNA is of structural polymorphism, which is useful in nanoarchitecture; especially, four-arm DNA junctions can be used to assemble nanowebs. The static four-arm DNA junctions were designed and synthesized. One-arm DNA and two-arm DNA came out simultaneously with the four-arm DNA junction’s formation. A new method, termed the two-step method, was proposed and the productivity of four-arm DNA junctions was increased. A nanoweb was assembled successfully, but it showed irregularity itself. It was not the same as we expected. We consider that it is a result from the flexibility of four-arm DNA junction.  相似文献   

13.
主要目的是寻找一种能最大限度获取所有类型的瘤胃微生物大片段DNA的提取方法,为后期分子生物学技术研究瘤胃微生物奠定基础。采用液氮冻融+溶菌酶+CTAB和SDS相结合的方法处理瘤胃样品并充分破壁,再采用酚/氯仿/异戊醇抽提、异丙醇沉淀获得DNA粗提物,经过试剂盒纯化后得到瘤胃微生物DNA样品。经特异性引物PCR检测,本方法所提取的DNA包含细菌、古细菌、真菌及原虫四类微生物信息。因此,采用该方法提取的DNA可用于后期实时定量PCR或DGGE等研究。  相似文献   

14.
目的比较采用3种不同DNA提取方法提取豚鼠血液基因组DNA之间的差异。方法分别用新鲜抗凝血Na I手提法、血凝块手提法和试剂盒DNA提取法提取20只豚鼠血液基因组DNA,用分光光度计测定、琼脂糖凝胶电泳、PCR扩增等方法对提取的DNA片段的完整性、浓度、纯度和用于PCR扩增的效果等方面进行比较研究。结果新鲜抗凝血Na I手提法提取的DNA完整性、浓度和纯度均为最高;血凝块法提取的DNA浓度和抗凝血提取的DNA浓度接近但纯度最低,有一定程度的断裂和降解;试剂盒法提取的DNA浓度最低,纯度和完整性处于中间,但三种方法提取的DNA都可用于PCR扩增反应。结论 3种方法都可以提取基因组DNA并且所提取的DNA均能满足后续PCR扩增实验的要求,但每种方法各有利弊,可根据具体的条件选择适宜的方法。  相似文献   

15.
目的建立小鼠鼠痘病毒PCR检测方法,并应用于鼠源性生物制品的检测。方法根据鼠痘病毒基因组序列中保守的crmD片段设计一对引物,建立鼠痘病毒PCR检测方法;人工感染20只小鼠,对其肝、脾、肾、脚掌及血液采用该方法进行检测;提取鼠源性生物制品中DNA,采用该方法检测其是否存在鼠痘病毒。结果该方法可以检测到稀释至10-5感染鼠痘病毒的细胞,在BHK21细胞和牛痘病毒中均未扩增出相应片段;该方法可检测出人工感染小鼠不同组织中病毒DNA;在鼠源性生物制品中未检测出鼠痘病毒DNA。结论该方法具有良好的特异性和敏感性,可以应用于染病动物组织及鼠源性生物制品中鼠痘病毒的检测。  相似文献   

16.
本文介绍了一种植物核酸提取的简易方法.该法只需在常温下按常规的分子生物学操作条件从已干燥的和新鲜的植物叶中快速提取总RNA和DNA.所获得的RNA和DNA能顺利用于下一步的PCR、测序及小分子RNA研究等分子生物学实验.  相似文献   

17.
快速而稳定地提取大草履虫的基因组DNA是进行后续分子生物学研究的前提.文章通过比较传统SDS法、CTABⅠ法和CTABⅡ法等提取大草履虫DNA的效果,进一步优化提取方法,获得快速稳定地提取大草履虫基因组DNA的方法.结果表明:用CTAB I法提取的DNA浓度低,杂质较多;CTABII提取的DNA电泳时检测不出条带;而SDS法提取的DNA在电泳时带型较整齐,无降解,且DNA的得率和纯度较高,但仍有蛋白质污染.针对蛋白质的去除,用SDS-蛋白酶K法和SDS-NaAc法来提取DNA,经过试验发现这2种方法都能够很好地去除蛋白质,所获DNA样品的纯度和得率都能用于进一步分子试验,而SDS-NaAc法更经济适用.  相似文献   

18.
葛属植物基因组DNA的提取和纯化   总被引:1,自引:0,他引:1  
采用SDS裂解法提取了葛属植物成熟叶片的基因组DNA,并利用凝胶纯化试剂盒进行了纯化。结果表明,该纯化方法有效,所获得的DNA可用于PCR反应。  相似文献   

19.
目的建立西洋参与人参限制性片段长度多态性聚合酶链式反应(polymerase chain reaction restriction fragment length polymorphism,PCR-RFLP)的鉴定方法.方法采用改良的CTAB法从西洋参和人参中提取基因组DNA.应用生物信息学软件设计西洋参与人参核糖体DNA ITS序列的特异性引物,利用PCR技术对指定序列进行扩增,并通过RFLP方法酶切后进行指纹图谱的鉴别比较.结果提取西洋参与人参基因组DNA19 kb,并扩增核糖体122 bp大小的基因片段,经酶切后西洋参为80 bp和42 bp长度的两条片段,而人参仍然为122 bp长度的单一片段.结论西洋参与人参DNA具有特异性酶切位点,可作为西洋参与人参鉴定的有效方法,该方法简便快速,结果可靠.  相似文献   

20.
链霉菌基因组提取方法的比较与改进   总被引:3,自引:0,他引:3  
将链霉菌菌株Streptomyces sp.纯化后,测得其葡萄糖异构酶的比活力为0.414u/mL,使用苯酚氯仿法提取提的基因组DNA浓度较低,RNA和蛋白较多,但用大量法时仍可得到大量的DNA,使用试剂盒法得到的基因组DNA浓度较大,但仍有大量RNA存在,由亚精胺法得到的基因组DNA浓度较好,RNA很少,自行设计的改进法得到的基因组DNA,量特别大,纯度很高,DNA大小集中在30kb左右,RNA很少,非竽相应的基因工程操作。  相似文献   

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