鸭乙肝病毒表面抗原特异性单抗的研制及应用

以纯化的鸭乙型肝炎病毒表面抗原（ＤＨＢｓＡｇ）免疫ＢＡＬＢ／ｃ小鼠,取免疫鼠脾细胞与小鼠骨髓瘤ＳＰ２／Ｏ－Ａｇ１４融合,应用ＥＬＩＳＡ筛选出５Ｂ８和８Ｇ１１ ２株抗体分泌滴度较高的杂交瘤细胞,二者所分泌的单抗仅与ＤＨＢｓＡｇ发生反应,而与其它９种禽类常见的病毒均不发生反应,其亚类鉴定分别属于ＩｇＭ和ＩｇＧ２ａ。用鸭乙型肝炎病毒（ＤＨＢＶ）阳性鸭血清中粗提的病毒悬液进行５Ｂ８株单抗介导的ＳＰＡ胶体金     

乙型肝炎病毒母婴传播问题探讨

探讨乙型肝炎病毒宫内感染及乳汁感染的母婴传播问题,用聚合酶链反应（ＰＣＲ）技术对７５例ＨＢｓＡｇ阳性产妇初乳及其新生儿外周血进行ＨＢＶ ＤＮＡ的检测;同时应用酶联免疫吸附法（ＥＬＩＳＡ）测定产妇初乳中乙肝病毒５项标志物（ＨＢＶＭ）。结果为１）１７５例初乳中ＨＢＶ ＤＮＡ阳性率为６８％,高于同组新生儿外周血ＨＢＶ ＤＮＡ阳性率３４．６７％,有显性差（Ｐ〈０．０１）;ＨＢＶＭ三项阳性各组二埂有显性差异（Ｐ〈０．０５）．２）ＨＢｅＡｇ阳性初乳及新生儿外周血ＨＢＶ ＤＮＡ阳性率均量高,与ＨＢｓＡｇ、抗－ＨＢｃ比较,有显性差异（Ｐ〈０．０１,Ｐ〈０．０５）。表明初乳排毒率高于内传染率,母婴传播率与母血中ＨＢＶＭ传染性呈正相关。     

乙型肝为病毒（HBV）DNA免疫的初步研究

用聚合酶链反应（ＰＣＲ）扩增了编码ＨＢＶｓＡｇ的基因序列,将其插入到ｐｃＤＮＡ３载体中,位于人巨细胞病毒（ＣＭＶ）早期启动子下游,重组质粒ｐｃＤＮＡ３－ｓＡｇ转染细胞后检测到ＨＢｓＡｇ表达,用纯化后的重组质粒直接注射用ＢＡＬＢ／Ｃ小鼠骨骼细内,诱发实验小鼠产生了抗ＨＢｓＡｇ特异性抗体,ＰＣＲ扩增未检测到注射部位及肝脏细胞染色体中有外源ＨＢＶＤＮＡ整合。     

乙肝患者在HBsAg消除后HBeAg持续存在

为了研究ＨＢｓＡｇ和ｅ抗原的消长规律，作者使用ＥＬＩＳＡ技术，对１８７名ＨＢＶ携带者的血清学指标进行了７年的随访观察。结果发现乙肝患者在ＨＢｓＡｇ消除后ＨＢｅＡｇ尚可长期持续存在，且ｅ抗原出现与ＨＢｓＡｇ无关。１观察对象１９９０年１月至１９９７年１２月我院肝炎门诊病人１８７名。要求：乙肝三系三项阳性患者（ＨＢｓＡｇ、ＨＢｅＡｇ、ＨＢｃＡｂ三项阳性），其中ＨＢｓＡｇ阳性、滴度在１：６４以上且携带该抗原半年以上，患者中年龄最大者４６岁，最小者１２岁，平均２６．５岁。病程最长者１５年，最短者６个月平均…     

病毒性乙型肝炎特异性免疫诊断的意义

乙型肝炎在我国传播广泛,影响很大,其防治是目前医学领域的重要课题。因此,了解乙肝检测的各项指标对防止乙肝传播,保护健康人群具有重要的意义。１乙肝病毒抗原———抗体系统出现的意义乙肝表面抗原ＨＢｓＡｇ血清中检查到ＨＢｓＡｇ即ＨＢｓＡｇ阳性,是ＨＢＶ感染的标志,至于是否有传染性要结合其它系统来确定。ＨＢｓＡｇ阴性表明病人进入恢复期。ＨＢｓＡｇ阳性超过持续半年,不管有无临床症状都提示是慢性携带者,也有进入慢性肝炎或肝硬化的可能,但仅靠ＨＢｓＡｇ阳性不能诊断乙肝。表面抗体ＨＢｓＡｂ有学者报道,无论ＨＢｓ…     

广西肝癌中HBV感染与N-ras基因突变的研究

应用ＰＣＲ－ＳＳＣＰ和免疫组化法检测２９例广西南部肝癌组织中的Ｎ－ｒａｓ基因突变和ＨＢＶ感染状况，结果，肝癌中Ｎ－ｒａｓ基因在第２￣３７密码子之间的突变率为７９．３％，其中２２例有２￣５个突变位点，该基因突变也见于癌旁组织，肝组织中ＨＢｓＡｇ和ＨＢｓＡｇ和ＨＢｘＡｇ检出率分别为８６．２％和７９．３％，两者具有相关性，并与Ｎ－ｒａｓ基因突变率呈相平行的趋势。因广西南部的肝癌与ＡＦＢ１污染有关，本研究     

肝组织内HBsAg的免疫组化测定及其临床意义

测定４２例福尔马林固定石蜡包埋肝组织内ＨＢｓＡｇ，并对其临床意义进行了研究，疾病包括病毒性肝炎１０例，肝硬化１４例，原发性肝癌１０例，其他肝病８全忽有病例均质病理诊断。肝组织内ＨＢｓＡｇ的测定采用过氧化物酶抗过氧化物酶法。     

乙型肝炎病毒(HBV)DNA免疫的初步研究

用聚合酶链反应（ＰＣＲ）扩增了编码ＨＢＶｓＡｇ的基因序列,将其插入到ｐｃＤＮＡ３载体中,位于人巨细胞病毒（ＣＭＶ）早期启动子下游．重组质粒ｐｃＤＮＡ３－ｓＡｇ转染细胞后检测到ＨＢｓＡｇ表达．用纯化后的重组质粒直接注射到ＢＡＬＢ／Ｃ小鼠骨骼肌内,诱发实验小鼠产生了抗ＨＢｓＡｇ特异性抗体．ＰＣＲ扩增未检测到注射部位及肝脏细胞染色体中有外源ＨＢＶＤＮＡ整合     

淋巴细胞性脉络丛胞膜炎病毒单克隆抗体的研制及初步鉴定

用提纯的ＬＣＭ病毒抗原（主要为ＮＰ６３）免疫ＢＡＬＢ／Ｃ小鼠，应用鼠—鼠杂交瘤技术获得了三珠（１Ｅ２、１Ｃ６和２Ｄ２）分泌抗ＬＣＭＶ单克隆抗体的杂交瘤细胞系。经检测，它们所分泌的抗体亚类分别为ＩｇＧ１（１Ｅ２）和ＩｇＭ（１Ｃ６）。亲和力为７５μｇ（１Ｅ２）和５μｇ（１Ｃ６）。腹水效价为１０５。免疫荧光阻断法和ＥＬＩＳＡ阻断试验测定结果一致，１Ｅ２的标记物能阻断２Ｄ２，但不能阻断１Ｃ６。三株ＭｃＡｂ对７种鼠源性病毒抗原（ＲｅＯ３、Ｓｅｎｄａｉ、ＭＨＶ、ＧＤⅦ、ＥＨＦＰＶＭ和Ｅｃｔｒｏ）均无反应。     

乙肝病毒表面抗原基因植物表达载体的构建

报道了将乙型肝炎病毒（ａｄｗ亚型）表面抗原（ＨＢｓＡｇ）基因和ＨＢＡｇ及其前导序列（ＨＢｓＡｇ＋ｐｒｅＳ２）基因分别插入植物表达载体ｐＲｏＫⅡ的ＣａＭＶ３５Ｓ启动子下游,构建为重组质粒ｐＲＨＢ和ｐＲＰ,并将其分别导入农杆菌ＬＢＡ４４０４中。     

乙型肝炎患者血清中IgM类HBsAg免疫复合物的检测及意义

以羊IgG抗人IgM为包被抗体,以HRP-抗HBs为指示抗体,建立了一种较简便的检测IgM类HBsAg免疫复合物的捕捉法酶联免疫吸附试验.实验证明,该法特异性强,重复性好.用本法对乙型肝炎的6种临床类型检测表明,IgM类HBsAg免疫复合物的检出率与临床类型有关.其阳性率在无症状携带者、急性乙型肝炎、慢性迁延性乙型肝炎、慢性活动性乙型肝炎、重症乙型肝炎和乙型肝炎后肝硬化分别为3.2%、36.7%、28.6%、54.4%、55.6%和61.2%.同时还发现,慢性活动性乙型肝炎的IgM类HBsAg循环免疫复合物有较强的激活补体作用,提示乙型肝炎患者血清补体下降与IgM类HBsAg循环免疫复合物激活和消耗补体有关.     

单胺氧化酶活性分析在HBV感染者中的应用

目的分析乙肝病毒(HBV)感染者血清单胺氧化酶活性,研究其临床应用价值.方法应用终点比色法检测血清单胺氧化酶(MAO)活性;ELISA法检测乙肝病毒标志物;PCR法检测HBv DNA;常规方法检测ALT.结果 ALT异常组,大三阳HBsAg(+),HBeAg(+),Anti-HBc(+)和小三阳HBsAg(+),Anti-HBe(+),Anti-HBc(+)合并HBV DNA阳性的HBV感染者MAO显著升高,而小三阳并HBV DNA阴性者MAO升高不明显;ALT正常组仅40例大三阳患者MAO升高明显,其他各组MAO大多在正常范围内.结论 HBV感染后,只要有病毒复制,就会破坏肝细胞,引起MAO升高.MAO活性分析对肝脏病情的判断有重要价值.     

Human hepatitis B vaccine from recombinant yeast

The worldwide importance of human hepatitis B virus infection and the toll it takes in chronic liver disease, cirrhosis and hepatocarcinoma, make it imperative that a vaccine be developed for worldwide application. Human hepatitis B vaccines are presently prepared using hepatitis B surface antigen (HBsAg) that is purified from the plasma of human carriers of hepatitis B virus infection. The preparation of hepatitis B vaccine from a human source is restricted by the available supply of infected human plasma and by the need to apply stringent processes that purify the antigen and render it free of infectious hepatitis B virus and other possible living agents that might be present in the plasma. Joint efforts between our laboratories and those of Drs W. Rutter and B. Hall led to the preparation of vectors carrying the DNA sequence for HBsAg and antigen expression in the yeast Saccharomyces cerevisiae. Here we describe the development of hepatitis B vaccine of yeast cell origin. HBsAg of subtype adw was produced in recombinant yeast cell culture, and the purified antigen in alum formulation stimulated production of antibody in mice, grivet monkeys and chimpanzees. Vaccinated chimpanzees were totally protected when challenged intravenously with either homologous or heterologous subtype adr and ayw virus of human serum source. This is the first example of a vaccine produced from recombinant cells which is effective against a human viral infection.     

乙肝病毒感染数量的一个数学模型

乙型肝炎是由乙型肝炎病毒(HBV)引起的肝病,该病毒干扰肝功能并造成病理损害.一小部分受感染者无法消灭该病毒而成为慢性感染,进而面临极高的死于肝硬化和肝癌的危险.乙型肝炎病毒通过与受感染者的血液或体液接触传播,这与人类免疫缺陷病毒(艾滋病毒)的方式相同.但是,乙型肝炎病毒的感染性比艾滋病毒高50至100倍.接种乙型肝炎疫苗是预防乙型肝炎的主要方法.如何有效防控乙肝的传染,不只是政府的事,也是每个国民应关注的问题.文章建立一个乙肝病毒传染的数学模型,并对模型进行实证分析;同时,对乙肝病毒的传染也做了一个预测.     

维持血透患者庚型肝炎病毒感染的临床研究

研究血液净化中心维持血液透析患者庚型肝炎病毒（ＨＧＶ） 感染率、影响因素和临床特点．应用反转录聚合酶链反应法（ＲＴＰＣＲ） ,检测了１４９ 例维持血透患者ＨＧＶ 感染情况．维持血透患者ＨＧＶＲＮＡ 阳性率为４ ．７ ％ ,与ＨＧＶＲＮＡ阴性患者相比,两组在人口统计学资料、维持透析时间、输血量、合并ＨＢＶ 和ＨＣＶ 感染率及肝脏酶谱等方面无统计学差异．维持血透患者ＨＧＶ 感染率高于普通人群,但无明显肝损害表现     

慢性肝病患者血浆内皮素含量与肝损害的关系研究

探讨血浆内皮素（ET）在慢性肝病患者中的变化规律以及与肝损害的关系。用放射免疫法测定110例慢性肝病患者及30例正常人血浆ET含量。结果表明，各种类型的慢性肝病患者血浆ET水平均显著高于正常组，且与临床类型有关。ET水平与谷丙转氨酶（ALT）及血清胆红素（SB）呈正相关，与白／球比例（A／G）和凝原酶原时间（PT）呈负相关，与甲胎球蛋白（AFP）无显著相关性。提示ET与肝病的慢性化程度及肝损害程度有关，可作为病情及预后判断的一项指标。     

335例乙型肝炎患者血清HBV-DNA定量与乙肝病毒标志物的相关性分析

目的:探讨乙型肝炎患者血清HBV-DNA定量与乙肝病毒标志物的关系。方法:对335例乙型肝炎患者分别用实时荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)检测血清HBV-DNA含量,酶联免疫吸附法(ELISA)检测血清乙肝病毒标志物,并对结果进行统计学分析。结果:大三阳组HBV-DNA阳性率及含量显著高于其他组(P<0.01);小三阳组HBV-DNA阳性率及含量显著低于大三阳组(P<0.01),但与HBsAg、HBcAb阳性组比较差异无统计学意义(P>0.05);HBeAg阳性组HBV-DNA阳性率显著高于HBeAg阴性组(P<0.01)。结论:只有将HBV-DNA定量检测和乙肝病毒标志物有机的结合,才能为乙型肝炎的临床感染、病毒复制、传染性强弱以及抗病毒药物的疗效观察提供可靠的判断依据。     

双环醇的研究进展

双环醇（bicyclol，商品名“百赛诺”）是人工合成的一类抗病毒性肝炎新药。动物试验表明，双环醇具有显著的肝细胞保护作用，兼有一定抗肝炎病毒活性，这些作用是双环醇对病毒性肝炎显示疗效的药理学基础。双环醇能够明显改善病毒性肝炎患者的肝功能，使升高的丙氨酸氨基转移酶（alanine aminotransferase，ALT）和天门冬酸氨基转移酶（sapartate aminatransferase，AST）降低，对乙型肝炎病毒e抗原（hepatitis Be antigen，HBeAg）和乙型肝炎病毒DNA（hepatitis B virus—DNA，HBV—DNA）阴转亦有较好的疗效，且停止服药后疗效较巩固，反跳率低，亦无明显不良反应。双环醇为病毒性肝炎的治疗提供了一种新的安全、有效的手段，其药理基础和临床价值均值得继续深入研究。