龙血竭抗癌成分的虚拟筛选及体外抗癌活性检测验证

应用计算机辅助虚拟筛选技术研究龙血竭抗癌活性成分. 以HER2为靶蛋白受体,对龙血竭149种已知化合物进行了虚拟筛选,对其中具有潜在活性的成分进行了体外HER2影响测定以及SK-Br-3抗癌活性检测验证. 结果表明, HER2靶蛋白分子对接模型具有较强的活性分子富集能力,与HER2受体有效对接、具有抗癌潜力的活性分子主要为二氢查耳酮、黄烷、甾体以及芪类成分,与HER2胞外域和胞内域结合的4种成分及能与HER2胞内域结合的3种成分均能显著的抑制体外HER2活性,其中反式3-甲氧基-4′,5-二羟基二苯乙烯、反式3,4′,5-三羟基二苯乙烯能够抑制SK-Br-3癌细胞增殖、改变细胞周期,引发SK-Br-3极显著凋亡,具有良好的体外抗癌活性,可为龙血竭抗癌药物的研发提供基础数据.      

龙血竭总酚提取物化学成分的分离鉴定

运用聚酰胺、硅胶、葡聚糖凝胶等柱色谱方法,从云南产龙血竭总酚提取物中分离出4个黄烷类、2个芪类、4个甾体类成分. 通过现代波谱学方法结合化学显色方法,鉴定其结构分别是4’,7-二羟基黄烷;7-羟基-4’-甲氧基黄烷;4’,7-二羟基-3’-甲氧基-8-甲基黄烷;4’,7-二羟基高异黄烷;4’-羟基-3,5-二甲氧基二苯乙烯;反式-4’,5-二羟基-3-甲氧基-二苯乙烯;豆甾醇;4-甲基-胆甾-7-烯-3β-醇;环阿尔廷醇;25（R）-薯蓣皂苷元. 化合物4’,7-二羟基-3’-甲氧基-8-甲基黄烷、反式-4’,5-二羟基-3-甲氧基-二苯乙烯、环阿尔廷醇、25（R）-薯蓣皂苷元为首次从龙血竭中分离得到.      

龙血竭主要黄酮类成分及其DPPH自由基清除活性研究

采用硅胶、Sephadex LH-20和反相RP C-18等柱色谱分离技术,从广西龙血竭甲醇提取物中分离了8个主要的黄酮类化合物,经综合波谱分析分别鉴定为:5,4'-二羟基-7-甲氧基-6-甲基黄烷(1),7,4'-二羟基高异黄烷(2),7,4'-二羟基-8-甲氧基高异黄烷(3),7,4'-二羟基高异黄酮(4),4'-羟基-2,4-二甲氧基二氢查尔酮(5),4,4'-二羟基-2-甲氧基二氢查尔酮(6),2,4,4'-三羟基-6-甲氧基二氢查尔酮(7),4,4'-二羟基-2,6-二甲氧基二氢查尔酮(8).还测定了化合物1~8的DPPH自由基清除活性,化合物1表现出较强活性.     

龙血竭中芪类化合物对HSC-1细胞的抗癌活性研究

应用人黑色素瘤HSC-1细胞模型,对三种芪类分子的抗癌活性进行了研究. 从龙血竭中分离的三种芪类化合物中,除了紫檀芪外,4',5-二羟基-3-甲氧基二苯乙烯及白藜芦醇都具有抑制人黑色素瘤细胞HSC-1增殖的作用,并具有时效和量效关系. 4',5-二羟基-3-甲氧基二苯乙烯、白藜芦醇在IC₅₀浓度下作用72 h,能引起HSC-1细胞的极显著凋亡(p<0.001),并使HSC-1细胞极显著积聚于亚G0/G1期(p<0.001),使G0/G1期、S期、G2/M期细胞数显著减少(p<0.01). 结果表明,通过诱导癌细胞凋亡,阻滞细胞周期,有效抑制体外癌细胞增殖是4',5-二羟基-3-甲氧基二苯乙烯和白藜芦醇的抗癌作用机制之一.      

人工诱导龙血竭与野生龙血竭化学成分的比较研究

 对人工诱导龙血竭与野生龙血竭的化学成分进行比较研究,为人工诱导龙血竭是否能替代其野生龙血竭提供依据,解决龙血竭资源极其紧张的问题.采用HPLC法.选用Waters Nova-Pak C18色谱柱(φ3.9mm×150mm,5μm),检测波278nm,柱温40℃,进样量10μL,以乙腈-0.4%磷酸(体积比30:70)为流动相;流速1.0mL/min.结果: 龙血竭和人工诱导龙血竭均具有相对保留时间14.2,19.9min的2个共有峰,且HPLC峰形相似度较高.     

广西龙血竭游离黄酮类化合物的分离鉴定及活性研究

根据血竭中游离黄酮存在着酸性差异,采用溶剂除杂,转溶于乙醚,再用pH梯度萃取得到不同酸性的黄酮,进而对弱酸性组分分离纯化得到2个单体化合物.通过考察不同提取部位对α-D-葡萄糖苷酶抑制活性的变化,发现弱酸性成分的活性较强,比血竭全粉提高45.5%,为研究龙血竭中黄酮类化合物对α-D-葡萄糖苷酶的抑制作用提供依据.     

龙血竭缓释滴丸的制备工艺研究

通过固体分散技术,以硬脂酸为骨架材料,以聚乙二醇-4000为致孔剂,通过选用适当的药物与基质比,制得具有良好缓释效果的龙血竭缓释滴丸.最佳滴丸成型工艺为:载药量为20%,PEG-4000/波洛沙姆=1∶1,硬脂酸用量占辅料量20%;药液温度90℃,滴速为20滴/min,滴距为3 cm,冷凝液温度11~15℃.结果表明该制剂有明显的缓释作用,且制备的缓释滴丸硬度、圆整度和重量差异均符合要求.     

龙血竭散中龙血竭的高效液相色谱特征研究

用HPLC法对中药制剂龙血竭散中主要成分龙血竭的指纹图谱进行了研究,初步建立了龙血竭的HPLC指纹图谱,并进行相似度评价,表明该方法简单可行,能够有效地控制龙血竭散中龙血竭的质量.     

HPLC法同时测定不同产地龙血竭中3种黄酮类成分

为建立HPLC测定不同产地龙血竭中3种黄酮类成分的方法,选择了广西、云南产9个批次的龙血竭,测定了其中龙血素A、龙血素B、剑叶龙血素B的含量.采用Thermo BDS Hypersil C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相乙腈-1%冰醋酸,梯度洗脱,流速1.0 m L·min~(-1),柱温40℃,检测波长278 nm.3个药效成分在45min内达到基线分离,线性关系良好.9个批次龙血竭中龙血素A、龙血素B、剑叶龙血素B的平均含量分别为:0.47%,0.96%,0.44%;平均加样回收率分别为:99.6%,103.2%,100.5%;RSD分别为:1.20%,0.65%,1.30%.该实验方法操作简便,结果准确,重复性和稳定性良好,可为龙血竭的质量控制提供参考.     

龙血竭HPLC指纹图谱研究

为建立龙血竭指纹图谱质量控制方法,采用HPLC法测定,液相色谱仪Agilent 1100,色谱柱为Waters Xterra C184.6×250 mm,5μm;流动相为0.1%的磷酸溶液和乙腈梯度洗脱,流速为0.7 mL/min,检测波长为280 nm,理论板数按参照物(龙血素B)峰计算不低于6000.实验结果表明,10批成品指纹图谱与对照指纹图谱计算相似度,其结果均大于0.90.该方法稳定可行,可用于龙血竭质量控制.     

活血化瘀、益气活血、理气宽胸三方对实验性大鼠胆固醇、甘油三酯、血液流变学的影响

活血化瘀、益气活血、理气宽胸三法是名老中医段富津教授治疗冠心病的临床法则.本课题对此进行了实验研究,观察了对高脂血症大鼠大胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、血液流变学等的影响.结果表明:具有明显改善血粘度、降低胆固、甘油三酯等作用.从而进一步为其临床疗效提供了实验依据.     

芪丹天胶囊对老年血瘀大鼠血小板聚集功能及血浆TXB2、6-ketO-PGF1a含量的影响

目的探讨芪丹天胶囊对血小板聚集功能的影响及作用机理.方法以老年雄性大鼠为血瘀模型,采用血小板聚集法和放免法观察芪丹天胶囊对血小板聚集功能及血浆TXB2、6-keto PGFla 含量的影响.结果芪丹天胶囊能明显抑制ADP诱导的血小板聚集,降低血浆中TXB2的含量及TXB2/6-keto-PGFla 的比值.结论芪丹天胶囊具有良好的抑制血小板聚集作用,其作用机理与降低TXB2有关.     

强心颗粒活血化瘀作用的实验研究

目的研究强心颗粒的活血化瘀作用。方法利用肾上腺素造成小鼠肠系膜微循环障碍,观察强心颗粒对小鼠肠系膜微循环的影响;大鼠两次冰水刺激,期间皮下注射盐酸肾上腺素注射液0.08 mL/100 g,造成大鼠血瘀模型,观察药物对大鼠血液流变学的影响。结果强心颗粒低剂量21.5 g/kg、中剂量43 g/kg、高剂量86 g/kg组均能加快小鼠血流速度,改善血流状态,改善小鼠微循环障碍;强心颗粒中剂量30 g/kg、高剂量60 g/kg组能明显降低大鼠高、中、低切状态下的血黏度,其中高剂量组能降低红细胞压积,中剂量组能加快红细胞电泳时间。结论强心颗粒具有明显的活血化瘀作用。     

丹龙胶囊活血化瘀作用的实验研究

目的研究丹龙胶囊活血化瘀作用。方法利用肾上腺素加冷刺激造成大鼠急性血瘀模型,观察丹龙胶囊对大鼠血液流变学的影响;利用肾上腺素造成小鼠肠系膜循环障碍,观察丹龙胶囊对小鼠肠系膜微循环的影响。结果丹龙胶囊能降低急性血瘀模型大鼠全血黏度和红细胞聚集指数,缩短红细胞电泳时间;增大肠系膜循环障碍小鼠的肠系膜毛细血管平均管径和流态评分,加快血流速度。结论丹龙胶囊具有活血化瘀作用。     

活血化瘀药药理实验电视教材的制作及体会

该文结合电视教材＂血瘀证＂动物模型及活血化瘀药实验设计的创作过程,详细介绍了电视教材制作的过程,包括撰写文字稿本、分镜头脚本的制作、拍摄、编辑、配音与解说、字幕、配乐、合成样片及审片与修改等,而在制作过程中要注意科学性、教育性与艺术性的统一。     

头低位倾斜对血液循环及呼吸系统的影响

因为人体处于地球重力场之中，故体位改变会引起血量分配的变化，同时影响某些生理功能。已证明可以用倒立运动来进行健身，当人体在失重环境中飞行时，同样体液发生了转移。应用头低位倾斜试验模型，研究人体处于倒置状态下产生的机体功能的变化及发生机理。     

猪血中抗菌肽类物质的分离纯化和抗菌活性研究

利用酶解、脱色等技术,从新鲜猪血中分离提取抗菌肽,再经SephadexG-100凝胶层析纯化,收集各组分并检测其抗菌活性。采用琼脂糖弥散法检测猪血抗菌肽对大肠杆菌O88、金黄色葡萄球菌ACTT25923株、绿脓杆菌ACTT27853株、鸡巴氏杆菌、鸡致病性沙门氏菌自然分离株等5种细菌的作用;同时,采用扫描电镜观察了猪血抗菌肽与上述金黄色葡萄球菌和绿脓杆菌共同培养20min后细菌形态结构的改变。结果表明,猪血抗菌肽对以上各种细菌均有不同程度的抑杀作用;扫描电镜观察发现,经抗菌肽作用20min后,这两种细菌的形态结构均发生了明显的改变,表现为细菌干瘪、皱缩、表面粗糙不平、分裂繁殖停止。这表明猪血抗菌肽不仅对供试细菌的形态结构有明显的损伤作用,同时还影响细菌的生长繁殖。     

云南栘［木衣］叶提取物片段抗氧化活性及成分分析

目的:评价云南栘[木衣]叶萃取物的抗氧化活性,为云南栘[木衣]抗氧化功能食品、营养补充剂等的开发提供理论依据.方法:用系统溶剂萃取法将云南栘[木衣]叶的萃取物再分成石油醚萃取物、乙酸乙酯萃取物、正丁醇萃取物和水相4部分.用DPPH·法和总还原力法评价云南栘[木衣]叶4个不同萃取物的抗氧化活性.用DPPH·-HPLC-PDA和总还原力-HPLC-PDA柱前衍生法对云南栘[木衣]叶中的抗氧化成分进行了筛选.结果:云南栘[木衣]叶提取物不同极性分离物都具有良好的抗氧化活性,其中乙酸乙酯萃取物的萃取得率高达67.87%,DPPH·半清除体积质量分数为0.079mg/mL,总还原力的芦丁质量分数为(0.199 70±0.000 31)g/g,是云南栘[木衣]叶抗氧化活性的主要来源.云南栘[木衣]叶提取物中主要有9个抗氧化成分,主要集中于乙酸乙酯萃取物,其中4个为黄酮类化合物.结论:云南栘[木衣]叶是良好的天然抗氧化剂来源,具有抗氧化营养补充剂、功能食品的开发潜力,抗氧化成分筛选结果为云南栘[木衣]抗氧化功能的开发提供了方向.     

K-M模型下的人全血对He-Ne激光的散射与吸收特性

研究了人全血对He—Ne激光的反射和透射传输特性．实验采用单积分球系统及波长为632.8nm的He—Ne激光器，采用Kubelka—Munk模型分析和计算了不同血液样品的吸收系数、散射系数及总光强I(x)随厚度的变化情况.结果表明：K—M模型结合单积分球系统的测量方法可用于研究血液样品光学参数，不同类型的血液样品在K—M模型下的吸收系数或散射系数有差别，散射系数的差异较小，有3例胃癌患者血液的吸收系数与正常人有较大差异。