4－（8－氨基喹啉－5－偶氮）－苯磺酸钠的极谱行为研究

研究了４－（８－氨基喹啉－５－偶氮）－苯横酸钠（ＳＡＯＡＢＳ）的极谱行为。在０．０２ｍｌ／ＬＮＨ＿３·Ｈ＿２Ｏ－０．３６ｍｏｌ／ＬＮＨ＿４Ｃｌ的缓冲溶液中，ＳＡＱＡＢＳ产生两个明晰的阴极化极谱波，其二次导数波的峰电位分别为－０．５２Ｖ和－１．３０Ｖ（Ｖｓ．ＳＣＥ）。用ＳＡＱＡＢＳ的第一个波作为定量分析的基础，其线性范围为１．０×１０￣（－６）～８．０×１０￣（－５）ｍｏｌ／Ｌ。氧不干扰ＳＡＱＡＢＳ的测定。还研究了ＳＡＱＡＢＳ的电极过程及反应机理。     

雪兔子叶的组织培养及植株再生

以雪兔子无菌苗的幼叶为外植体,接种到ＭＳ补加ＮＡＡ（１．０－２．０）ｍｇ／Ｌ、６－ＢＡ（０．１－１．０）ｍｇ／Ｌ的培养基上诱导愈伤组织,其中以ＭＳ＋ＮＡＡ２．０ｍｇ／Ｌ＋６－ＢＡ０．５ｍｇ／Ｌ的诱导效果最好,经６周培养即可形成大量的黄绿色愈伤组织,诱导率可达１００％,经２－３次继代培养后,将生长发良好的愈伤组织转接到ＭＳ附加６－ＢＡ（０．５－２．０）ｍｇ／Ｌ、ＩＡＡ（０．０５－０．１）ｍｇ／Ｌ、Ｎ     

人肿瘤坏死因子cDNA衍生物在大肠杆菌中的表达及活性测定

应用基因工程方法构建了含人肿瘤坏死因子ＣＤＮＡ衍生物的重组体．转化大肠杆菌后酶切鉴定．转化菌经摇瓶培养及温度调控，获得高效表达．ＳＤＳ－ＰＡＧＥ结果表明，表达的ＴＮＦ分子量约为１７ｋＤ，蛋白量约为菌体可溶性蛋白的２０％．用Ｌ９２９细胞毒性测定法测得菌液ＴＮＦ的表达为２×１０８ｕ／ｍＬ．抗ＴＮＦ的单克隆抗体可以中和大肠杆菌表达的ＴＮＦ对Ｌ９２９细胞的细胞毒性．     

黑白花乳牛关节滑膜炎的研究Ⅰ．两性霉素B诱发急性浆液性腕关节滑膜炎的实验研究

对７头一岁龄健康黑白花乳牛的１４个腕关节内注射两性霉素Ｂ（１２．５ｍｇ／关节），成功诱发急性浆液性腕关节滑膜炎（ＡＳＣＳ）．注射前及诱发关节炎后（注射后４８ｈ）分别抽取正常及炎性腕关节滑液（ＳＦ）样品，同时采集血液样品待检，检测结果表明：乳牛ＡＳＣＳ时，ＳＦ中细胞总数（ＴＣＣ）、总蛋白（ＴＰ）、乳酸脱氢酶（ＬＤＨ）、碱性磷酸酶（ＡＬＰ）、γ－谷氨酰转肽酶（γ－ＧＴ）、蛋白及ＬＤＨ同功酶各组分含量均显著增加（Ｐ＜０．０１）；蛋白及ＬＤＨ同功酶各组分百分含量（％）显著改变：白蛋白（Ａ）显著降低（Ｐ＜０．０１），α、β、γ球蛋白均显著升高（Ｐ＜０．０１），Ａ：Ｇ值（白／球比）显著下降（Ｐ＜０．０１），ＬＤＨ１显著下降（Ｐ＜０．０１），ＬＤＨ２、ＬＤＨ３、ＬＤＨ４、ＬＤＨ５增加，但差异不显著（Ｐ＞０．０５），以上各成分的对应血清值均无显著变化（Ｐ＞０．０５）．关节滑液（ＳＦ）的检测为乳牛关节炎症提供了准确诊断方法和依据，并可揭示关节在病理状态下的代谢状况，具有重要的临床指导意义．     

啤酒废酵母超氧化物歧化酶（SOD）的分离纯化及性质研究

啤酒废酵母（１０８－１０９细胞／ｍｌ）通气发酵后，经乙醇－氯仿沉淀，加热，调ＰＨ，（ＮＨ４）２ＳＯ４沉淀等除去杂蛋白质。最后经ＳｅｐｈａｄｅｘＧ－７５层析得到纯化的ＣｕＺｎ－ＳＯＤ，酶比活在１５００单位／ｍｇ蛋白以上，酶的分子量为１４８０００，由四个亚基组成，紫外最大吸收峰位于２５６ｕｍ处。Ａ２５６．４／２８０＝１．２２．     

基因重组人Gamma-干扰素发酵和提取优化工艺的研究

对基因重组人Ｇａｍｍａ－干扰素（ｒＩＦＮ－γ）ＰＢＶ２２０ＤＨ５α工程菌株的发酵工艺进行了研究．结果表明,采用在２５０ｍＬ摇瓶中装液量为１５０ｍＬ,按照１∶４０的稀释比进行两次扩大培养,并在大肠杆菌生长最为活跃的对数生长期内进行诱导表达效果最好．收集菌体以后,将菌体进行冷冻和超声破碎,并在２．０ｍｏｌ／Ｌ脲中浸泡８ｈ～９ｈ以清洗杂蛋白,然后用７．０ｍｏｌ／Ｌ盐酸胍（Ｇｕ·ＨＣｌ）提取．在优化工艺条件下,ｒＩＦＮ－γ的收量为９．０×１０６ＩＵ／Ｌ～１２．８×１０６ＩＵ／Ｌ,总蛋白为７９．５ｍｇ／Ｌ～１２７．２ｍｇ／Ｌ,比活为５．６×１０５ＩＵ／ｍｇ～８．０×１０５ＩＵ／ｍｇ,ＳＤＳ－ＰＡＧＥ电泳含量可达６０％～８０％,使ＰＢＶ２２０ＤＨ５α工程菌株获得了高效表达．     

偏最小二乘紫外分光光度法同时测定萘，1－甲基萘和蒽

用偏最小二乘法（ＰＬＳ）进行校正和预测，不经分离同时测定了混合体系中的萘，１－甲基萘和蒽。萘，１－甲基萘和蒽的浓度分别在０～２８ｍｇ／Ｌ，０～４０ｍｇ／Ｌ和０～４０ｍｇ／Ｌ的浓度范围服从比耳定律。对合成样品中这三种组分进行分析，结果令人满意。     

聚苯乙烯载体亲和层析纯化尿激酶

聚苯乙烯经磺化后连接手臂６－氨基己酸，然后偶联配基对氨基苯甲脒，制成亲水性的亲和载体。载体的最适配基密度为每克湿载体３２μｍｏｌ，最适吸附条件为ｐＨ７．５、０．０５ｍｏｌ／Ｌ磷酸缓冲液（含ＮａＣｌ０．５ｍｏｌ／Ｌ）。在ｐＨ４．０、０．１ｍｏｌ／Ｌ醋酸缓冲溶液（含ＮａＣｌ０．５ｍｏｌ／Ｌ）中，采用０～１ｍｏｌ／Ｌ　ＮａＳＣＮ梯度洗脱，可将比活８．３３μｍｏｌ·Ｓ－１·ｍｇ－１的粗酶纯化５０倍，收率大于５３％。     

植物生长调节剂和蔗糖对抗黑胫病香果树丛芽分化的影响

将抗黑胫病香果树愈伤组织在ＢＡ、ＮＡＡ、蔗糖３因素条件下作Ｌ＿９（３￣４）正交组织培养试验．结果表明，ＢＡ、ＢＡ与ＮＡＡ的交互作用对抗病香果树愈伤组织丛芽分化有极显著影响．ＢＡ／ＮＮＡ（Ｘ）与芽分化（Ｙ）的关系为Ｙ＝１．３６５１Ｘ￣（０．１２８６），ＢＡ／ＮＡＡ（Ｘ）和ＢＡ＋ＮＡＡ（Ｙ）与芽分化（Ｚ）的关系为Ｚ＝１．１０３３＋０．０９９９（Ｘ＋Ｙ）－０．００２７（Ｘ＋Ｙ）￣２，ＢＡ／ＮＡＡ（Ｘ）和蔗糖浓度（Ｙ）与芽分化（Ｚ）的关系为Ｚ＝１．０７４０＋０．０７９３（Ｘ＋Ｙ）－０．００１７（Ｘ＋Ｙ）￣２．在本该试验范围内，丛芽分化的最适培养基为ＭＳ＋ＢＡ２ｍｇ／Ｌ＋ＮＡＡ０．１ｍｇ／Ｌ＋蔗糖３％．     

生长调节剂对香石竹茎尖诱导形成芽的影响

将香石竹的茎尖作为外植体，分别接种于添加不同量细胞分裂素（６－ＢＡ或ＫＴ）及生长素（ＮＡＡ）的ＭＳ琼脂培养基上，结果表明，培养基中如果只添加６－ＢＡ或ＫＴ，当两者浓度分别在（０．０１－０．５）ｍｇ／Ｌ和（０．０１－１）ｍｇ／Ｌ时，对芽的产生起促进作用；在大于０．５ｍｇ／Ｌ和１ｍｇ／Ｌ时，则抑制芽的产生，培养基中同时加入ＮＡＡ和６－ＢＡ或ＫＴ，在ＮＡＡＲ 最小于６－ＢＡ或ＮＡＡ和ＫＴ时，利于芽的形成     

黄色短杆菌中谷氨酸脱氢酶的分离纯化及特性

经硫酸铵盐析、DEAE-纤维素层析、苯-琼脂糖CL-4B(Phenyl-SepharoseOL-4B)层析和交联葡聚糖G-200(Sephadex G-200)层析等步骤从谷氨酸产生菌——黄色短杆菌中分离纯化的谷氨酸脱氢酶,酶活提高了230倍。该酶的分子量约为30万,由六个分子量约为5万的亚基组成,最适pH为8.9,并对热较稳定。在pH8.2时,以谷氨酸和NADP+为底物时的米氏常数值分别为0.294mol/L和0.1mmol/L。     

Cloning of murine BRI3 gene and study on its function for inducing cell death

To understand the molecular mechanism of TNFα effects, the cDNA of murine BRI3 gene was cloned from the total RNA of murine brain endothelial cells (bEnd.3)treated with hTNFα by using the suppression subtractive hybridization (SSH) and the RT-PCR method. The fusion expression vector harbouring BRI3 gene and enhanced green fluorescence protein (EGFP) thus obtained were designated as pEGFP/I3. Then pEGFP/I3 was transiently transfected into L929 cells and the fusion protein EGFP/I3 was localized in cytoplasm. It is found that the expression of EGFP/I3 could induce cell death in L929 cells detected by TUNEL method and flow cytometry. And the overexpression of Bci-2 in L929 cells can block cell death induced by EGFP/I3, indicating that murine BRI3 gene might related to the TNFα mediated cytotoxicity.     

UPLC-MS/MS法同时测定川黄口服液中的5种有效成分

建立同时测定川黄口服液中的原儿茶醛、黄芪甲苷、黄芪皂苷Ⅱ、隐丹参酮、丹参酮ⅡA 5种有效成分含量的超高效液相色谱-串联质谱(UPLC-MS/MS)分析方法.用C18(50mm×2.1mm,1.8μm)分析柱,乙腈-0.1%甲酸水为流动相,流速为0.35 mL/min.在电喷雾电离(ESI)正离子和负离子模式下,采用的是多重反应监测模式(MRM)进行检测.结果表明,原儿茶醛、黄芪甲苷、黄芪皂苷Ⅱ、隐丹参酮、丹参酮ⅡA的线性范围分别为0.3~12.0mg/L、0.3~7.2mg/L、0.15~6.00mg/L、0.005~2.000mg/L、0.005~1.000mg/L;5种成分的加样回收率为78.5%~102.0%;相对标准偏差均不大于4.01%.本方法简便、准确、快速、重复性好,高灵敏度,可作为川黄口服液质量评价指标之一.     

蛹虫草发酵产物新纤溶酶的分离纯化

笔者所在项目组的前期研究发现,蛹虫草深层培养可以产生至少两种纤溶酶.基于此,文中对蛹虫草深层培养产生的纤溶酶的分离纯化展开了研究.采用硫酸铵盐析、Sephadex G-25凝胶色谱、Phenyl-Sepharose HP疏水相互作用色谱、CM-Sepharose FF弱阳离子交换色谱和Superdex 75凝胶色谱对纤溶酶进行分离.最终纯化后的纤溶酶Ⅰ比活力达1467.44U/mg,纯化倍数为36.07,回收率为5.79%.纤溶酶Ⅱ比活力达1681.58U/mg,纯化倍数为41.33,回收率为4.00%.两种纤溶酶经电泳鉴定均达到电泳纯,相对分子质量分别约为28000和32000.     

Cloning of murine BRI3 gene and study on its function for inducing cell death

To understand the molecular mechanism of TNFα effects, the cDNA of murine BRI3 gene was cloned from the total RNA of murine brain endothelial cells (bEnd.3) treated with hTNFα by using the suppression subtractive hybridization (SSH) and the RT-PCR method. The fusion expression vector harbouring BRI3 gene and enhanced green fluorescence protein (EGFP) thus obtained were designated as pEGFP/I3. Then pEGFP/I3 was transiently transfected into L929 cells and the fusion protein EGFP/I3 was localized in cytoplasm. It is found that the expression of EGFP/I3 could induce cell death in L929 cells detected by TUNEL method and flow cytometry. And the overexpression of Bcl-2 in L929 cells can block cell death induced by EGFP/I3, indicating that murine BRI3 gene might related to the TNFa mediated cytotoxicity.     

Purification and characterization of a novel antifungal protein from Bacillus subtilis strain B29

An antifungal protein was isolated from a culture of Bacillus subtilis strain B29. The isolation procedure comprised ion exchange chromatography on diethylaminoethyl (DEAE)-52 cellulose and gel filtration chromatography on Bio-Gel® P-100. The protein was absorbed on DEAE-cellulose and Bio-Gel® P-100. The purified antifungal fraction was designated as B29I, with a molecular mass of 42.3 kDa by sodium dodecyl sulfate-polyacrylamide gel electrophoresis (SDS-PAGE), pI value 5.69 by isoelectric focusing (IEF)-PAGE, and 97.81% purity by high performance liquid chromatography (HPLC). B29I exhibited inhibitory activity on mycelial growth in Fusarium oxysporum, Rhizoctonia solani, Fusarium moniliforme, and Sclerotinia sclerotiorum. The 50% inhibitory concentrations (IC₅₀) of its antifungal activity toward Fusarium oxysporum and Rhizoctonia solani were 45 and 112 μmol/L, respectively. B29I also demonstrated an inhibitory effect on conidial spore germination of Fusarium oxysporum and suppression of germ-tube elongation, and induced distortion, tumescence, and rupture of a portion of the germinated spores.     

液质联用法分析王老吉凉茶中的3种有效成分

建立同时测定王老吉凉茶中的绿原酸、异绿原酸C、甘草酸3种有效成分含量的超高效液相色谱-串联质谱(UPLC-MS/MS)分析方法.用Agilent Zorbax RRHD Eclipse Plus C18(50mm×2.1mm,1.8μm)色谱柱,以甲醇-0.1%甲酸的水溶液为流动相,流速为0.30mL/min.在电喷雾电离(ESI)模式下,采用的是多重反应监测模式(MRM)进行检测,绿原酸、异绿原酸C、甘草酸的线性范围分别为0.030~4.500mg/L、0.045~4.500mg/L、0.016~2.000mg/L;检出限分别为10、12、3μg/L;3种成分的加样回收率为94.7%~103%,RSD均不大于1.9%.该方法简便、准确、快速、高灵敏度,已成功地用于实际的样品分析.     

一种低温锆弱凝胶调剖剂的研制

针对温度低于50℃的高含水油藏,研制出了一种聚合物/有机锆弱凝胶调剖剂.该调剖剂以部分水解聚丙烯酰胺(HPAM)为主剂,以自制有机锆YJ-1为交联剂,在35～50℃温度下能形成稳定的弱凝胶.该弱凝胶调剖剂配方为:800～1 500 mg/L HPAM,500～1 000 mg/L有机锆YJ-1交联剂,500～800 mg/L稳定剂.该体系适合的矿化度在50 000 mg/L以下,pH值4～9.该调剖剂成胶时间和凝胶黏度可调,岩心封堵率大于96%.     

甲基橙-溴酸钾体系催化褪色光度法测定痕量铜

利用铜对甲基橙一溴酸钾体系的催化作用,建立一种新的测定痕量铜的方法,并利用该方法测定样品中铜的含量．方法：采用分光光度法进行实验,利用单因素法确定该催化反应的适宜条件,运用加标回收法和平行实验确定该方法的准确度和精密度．结果：通过探究,该褪色反应的适宜条件是：9n,4定波长为508nm,0．0002tool／L的甲基橙5．00ml,0．005tool／L的溴酸钾0．50ml,2mol／L的硝酸2．00ml;50℃下反应时间15rain．该方法的线性范围为0．2mg／L到16mg／L,线性方程为△A=0．0508＋0．0664c,相关系数为0．9979,相对标准偏差为1．3％,样品加标回收率为97．5％～112．8％,结果满意．     

阳离子聚合物与聚合铝处理油田采油污水研究

中原油田是一个多层系、多油藏类型的复杂断块油田 ,部分区块储层中黏土特别是膨胀性黏土含量高 ,对注入水水质的要求较高 .本文对阳离子聚合物与聚合铝复配处理中原油田采油污水进行了研究 ,结果表明 :当聚合铝浓度为 5 0 mg/L时 ,阳离子聚合物的分子量、加入浓度、污水的 p H值、污水温度等对处理效果影响大 ,当阳离子聚合物的黏均分子量为 1 2 0万、加入浓度 3～ 5 mg/L、污水的 p H值为 6.5～ 8.5、污水温度在 45℃时 ,中原油田采油一厂采油污水中悬浮物、油的含量分别由处理前的 1 65 mg/L,1 1 8mg/L降低到 1 .2 mg/L及 5 .0 mg/L ,滤膜系数达到 35