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相似文献
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1.
摘要:用农杆菌介导法将高亲和性钾离子转运体基因(HAK)和Bar基因转入5个优良玉米自交系7922、P138、265、238和271中,并对影响其遗传转化效率因素进行了优化.经PCR和RT-PCR检测证实获得阳性植株.除草剂涂抹实验证明Bar基因已经整合进玉米基因组.用不同浓度的盐溶液处理转基因植株和对照植株,发现转基因植株叶片中的K+含量、脯氨酸和叶绿素含量均高于未转化植株,而Na+含量低于未转化植株,表明HAK基因已经整合进玉米基因组,并通过过量表达提高了植株的耐盐性.  相似文献   

2.
角质细胞生长因子(Keratinocyte growth factor,KGF)在组织的损伤修复中起着重要的作用.在植物里面表达高活性的KGF具有成本低、易开发的优点.本实验将人角质细胞生长因子基因经农杆菌介导转入水稻中,获得110株再生植株.对再生植株进行GUS检测发现有44.7%植株呈阳性,PCR检测的结果也显示有52.6%的植株为阳性植株.  相似文献   

3.
运用松树根特异性启动子PmPgPR10驱动把CMO/BADH双价基因转入水稻.对转基因植株根和叶的CMO酶、BADH酶活性及其它生理生化指标进行了测定.结果表明:CMO/BADH双价基因能在根部特异性表达.文章还对转基因提高植株耐盐性的机理进行了探讨.  相似文献   

4.
将苏云金杆菌家族中的cry1Ac3基因与豇豆胰蛋白酶抑制剂基因(cpti)融合成融合基因,构建cry1Ac3-cpti融合基因植物表达载体,表达Bt-CpTI抗虫融合蛋白.用基因枪转化技术将cry1Ac3-cpti融合基因分别导入玉米优良自交系E28及340的胚性愈伤组织中,轰击后的愈伤组织经筛选剂3次筛选,获得可育的再生植株.经PCR及Southernblot分子检测,证实所获得的再生植株为转基因植株.抗虫性分析结果表明,部分转基因玉米植株对玉米螟虫有较强的抗性.将苏云金杆菌家族中的cry1Ac3基因与豇豆胰蛋白酶抑制剂基因(cpti)融合成融合基因,构建cry1Ac3-cpti融合基因植物表达载体,表达Bt-CpTI抗虫融合蛋白.用基因枪转化技术将cry1Ac3-cpti融合基因分别导入玉米优良自交系E28及340的胚性愈伤组织中,轰击后的愈伤组织经筛选剂3次筛选,获得可育的再生植株.经PCR及Southernblot分子检测,证实所获得的再生植株为转基因植株.抗虫性分析结果表明,部分转基因玉米植株对玉米螟虫有较强的抗性.  相似文献   

5.
用Western blot方法分析了甜菜碱生物合成酶之一甜菜碱醛脱氢酶(BADH)在同基因型禾谷类作物——小麦、玉米、水稻、高粱和大麦幼芽中蛋白含量的变化,结果表明BADH在禾谷类作物种子萌发早期(幼芽)中普遍存在,并有较高的含量.不同类型的作物BADH蛋白含量不同,在同一类型作物的不同品种间也表现出明显的差异.  相似文献   

6.
利用基因枪法将含有潮霉素抗性基因(hpt),gusA报告基因和ap1基因的2个质粒(pJIMB15和pBiSAP1)共同转化同转化由粳稻品种鄂宜105号种 子在胚诱导的愈伤组织(2-3周龄)。ap1基因编码一种双亲性的蛋白。该蛋白能延缓因假单孢菌感染所引起的非寄主植物中的过敏反应。经过2轮潮霉素(30mg/L)筛选,抗性愈伤组织被转入含30mg/L潮霉素的再生培养基中再生植株。从轰击的186块愈伤组织中共再生出32株独立的转基因水稻植株(转化率为17.2%),PCR/Southern blot分析显示84%的转基因植株含有所有3个基因。  相似文献   

7.
玉米(Zea mays L.)属禾本科玉蜀黍属,是世界第一大粮食作物.本研究以玉米毛状根再生植株为植物材料,通过对盐胁迫下玉米毛状根再生植株SnRK2基因表达量进行半定量PCR分析,探究盐胁迫对玉米毛状根再生植株SnRK2表达的影响.结果发现,不同处理下玉米毛状根再生植株的SnRK2基因表达含量均高于对照,盐胁迫对玉米毛状根再生植株的SnRK2基因表达影响较小,但显著降低对照组玉米SnRK2基因的表达.本研究为后续探究玉米毛状根再生植株的耐盐机制提供理论支持.  相似文献   

8.
用基因枪法转化水稻获得转基因植株   总被引:13,自引:2,他引:13  
从水稻成熟胚诱导的愈伤组织经继代培养后可以产生大量胚性愈伤组织.将分别含有苏云金杆菌δ-内毒素基因[CryⅠA(b)]、潮霉素磷酸转移酶基因(hpt)的质粒混合包裹在金粉上轰击上述胚性愈伤组织.经过筛选和再生培养,得到92个系的潮霉素抗性再生植株.点杂交结果表明97.8%的抗性植株含有hpt基因,73.9%的植株同时含有CryⅠA(b)基因和hpt基因.Southernblot杂交分析进一步证实外源CryⅠA(b)基因已经整合到水稻基因组中.  相似文献   

9.
褐飞虱喂养试验显示表达GNA的转基因水稻纯系抗褐飞虱   总被引:2,自引:0,他引:2  
利用基因枪法将含有3个不同基因(hpt,gus和gna)的质粒pWRG1515和pRSSGNA1共同转化粳稻品种鄂晚5号成熟胚诱导的愈伤组织。共再生出35株独立转基因植株。PCR/Southern印迹法分析发现,83%的转基因植株含有所有3个外源基因。Western印迹法分析发现79%的含gna基因的转基因植株以不同水平表达GNA。遗传分析证实外源基因在转基因植株后代中以孟德尔方式遗传。从其R1代亲本为孟德尔3:1方式遗传的R2代中,鉴定出2个含有所有3个外源基因的独立转基因植株纯系。这些纯系具有相似的外源基因表达量。褐飞虱喂养试验表明,这些纯系对褐飞虱具有显著的抑制作用。这些褐飞虱抗性提高的转基因纯系将应用于水稻抗虫育种中。实验证明,通过遗传转化和筛选可获得含在农业上有应用价值基因的转基因水稻纯系。  相似文献   

10.
应用农杆菌介导法的多年生黑麦草遗传转化研究   总被引:4,自引:0,他引:4  
以草坪型多年生黑麦草Lolium perenne L.成熟种子为外植体,经过愈伤组织诱导和植株再生研究,建立了该草种的遗传转化体系,并成功地应用农杆菌介导法将克隆自辽宁碱蓬的甜菜碱醛脱氢酶基因(BADH)转移进多年生黑麦草,获得的转基因株系Gsc-LP5通过PCR检测证明了目的基因的存在,通过叶片离体检测法证明了作为检测基因随同质粒一同转入的抗潮霉素基因的表达,通过盆栽耐盐试验证明了转基因植株具有较强的耐盐能力.  相似文献   

11.
GPDl是3撕酸甘油脱氢酶的编码基因,在酵母的耐盐通路中发挥着重要的作用.为了探讨耐盐酵母家族成员鲁氏酵母的GPDl对酿酒酵母的影响,本文利用分子生物学方法构建了质粒YEplacl95一GPDl,并将其转入到酿酒酵母菌株W303中,得到工程菌株WYS.研究发现在菌株WYS中过量表达鲁氏酵母的GPDl,其耐盐性、抗性及甘油产量均明显高于对照菌株wY,特别是在含盐量为18%的情况下菌株WYS甘油产量提高了14.35%.说明GPDl的过量表达是菌株耐盐性提高的重要原因.  相似文献   

12.
玉米自交系苗期耐旱性鉴定指标的模糊综合评价   总被引:1,自引:0,他引:1  
以与玉米自交系幼苗质膜损伤程度有关的过氧化物酶、超氧化物歧化酶、过氧化氢酶、丙二醛、维生素C和电导率为指标,用模糊隶属函数法对玉米自交系的苗期耐旱性进行综合分析,结果表明,本试验所选择的6项指标,按隶属函数计算加权平均值的方法对参试自交系进行耐旱性综合评价是有效的。  相似文献   

13.
A genomic library derived from leaves of spinach was constructed with the λGem11_BamHI Arms as the vector. The library was screened using the BADH cDNA of mountain spinach as a probe and six positive clones were obtained through three rounds of screening. One of the positive clones named D, which was hybridized with the 5′600 bp fragment of mountain spinach BADH cDNA, was selected and further analyzed. The size of the insert in clone D was about 12 kb. 8 856 nucleotides of the insert were sequenced which contained 2 459 nucleotides of 5′ noncoding region, 6 111 nucleotides of the complete sequence of the BADH gene, and 286 nucleotides of a 3′ noncoding region. The result of sequence analysis indicated that the BADH gene contained 14 introns and the junction sequences at splicing sites followed the GT_AG rule basically.  相似文献   

14.
玉米(Zea mays L.)矮花叶病在国内外广泛发生,且在玉米生产中造成了重大损失.通过RT-PCR法从具有典型的玉米矮花叶病症状的玉米叶片中克隆了外壳蛋白(Coat protein,CP)基因,测序和同源性比较表明所克隆的CP基因来自玉米矮花叶病毒(Maize dwarf mosaic virus,MDMV)B株系,全长920个碱基对,开放阅读框编码219个氨基酸,该基因可进一步用于玉米抗矮花叶病的转基因研究,以获得生产应用的抗病材料.  相似文献   

15.
玉米耐盐早期筛选体系的初步研究   总被引:9,自引:0,他引:9  
耐盐性鉴定是植物耐盐分子育种的重要环节,为了建立玉米耐盐性鉴定的早期筛选体系,选用了丹340,Mo17和TL94B 3个自交系,设置了10个NaCl浓度梯度,并通过室内沙培盐胁迫处理实验,对出苗率、6天株高、10天株高、14天株高、地上部和根系鲜重等性状进行了考察.结果表明:丹340和TL94B的耐盐性较强,而Mo17的耐盐性较弱,且对盐胁迫敏感;出苗率与盐浓度无显著相关,不宜作为耐盐性筛选的定量指标;株高、地上部和根系鲜重都与盐浓度高度负相关,达极显著水平,可以作为玉米耐盐性早期筛选的指标.研究还发现:在沙培条件下,20 mmol.L-1左右的NaC l浓度对幼苗的生长有促进作用;进行玉米耐盐性鉴定的NaC l临界下限浓度是100~120 mmol.L-1.  相似文献   

16.
根据已经克隆的植物抗病基因和候选抗病基因的保守序列P-loop、Kinase-2及GLPLAL设计一系列简并引物,利用同源序列扩增法,对玉米的基因组DNA进行PCR扩增,并对5个扩增产物的克隆进行测序.测序结果在Gen—Bank内进行BLAST检索,发现A9克隆序列与玉米BAC库中的206C17克隆的部分序列有很高的相似性,并且距离GenBank内注册的玉米抗锈病基因rpl位点中的rpl-3基因、rpl-4基因分别约有66Kb、20Kb,且A9克隆序列在玉米基因组中是单拷贝的.这为玉米抗锈病性状的分子标记辅助选择和抗锈病基因的克隆奠定了良好的基础。  相似文献   

17.
不同浓度的壳聚糖处理对玉米种子萌发的影响初报   总被引:19,自引:0,他引:19  
本文探讨了不同浓度壳聚糖处理对玉米种子萌发的影响,结果表明:0.5%的壳聚糖处理玉米种子的发芽率,发芽指数最高,淀粉酶的活性最强;POD维持较长时间,该处理的活性持续时间长,这些说明了适合浓度的壳聚糖处理玉米种子能提高种子的活力。  相似文献   

18.
本实验以1株耐盐细菌My23(耐18%NaCl)作为研究对象,采用碱裂解法对其进行质粒提取,结果表明可以提取得大小2个不同质粒;改变常规提取方法中的部分环节,如加入STE清洗菌体的培养基成分,溶菌酶的使用,以及加入碱裂解液Ⅰ后静置20min,对该耐盐菌质粒的提取有较好的作用。经SDS法将小质粒消除后的菌株与野生型菌株的耐盐功能比较,发现提取出的小质粒与耐盐无关。将大肠杆菌DH5α制备成感受态细胞,将耐盐菌的质粒进行转化,结果进一步表明耐盐性状与质粒没有关系。  相似文献   

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