雌、雄株和金叶银杏光合生理及黄酮成分年动态变化研究

【目的】为了解黄酮类化合物在银杏叶片中的合成代谢规律,确定银杏合适采摘期,以及选育优良的银杏品种,探讨了雌、雄株和金叶(芽变品种)银杏叶片光合生理与黄酮含量的周年变化及相关性。【方法】以银杏种质资源圃的雌株、雄株及嫁接的金叶银杏为材料,对4—11月银杏的光合色素、叶绿素荧光参数、黄酮成分及含量间的变化进行了研究。【结果】在整个叶片生长周年动态变化中,雄株银杏的含水量低于雌株和金叶银杏,特别是在6—9月夏季高温时期的差异更显著;雌株银杏的含水量、相对叶面积、叶绿素含量都大于雄株与金叶银杏,特别是在5—8月,但雄株与金叶银杏的相对叶面积增加速度较快;雌株银杏的光化学淬灭系数(qP) 及非光化学淬灭系数(NPQ)高于雄株和金叶银杏,雌株具有更强的抗氧化能力。银杏叶中黄酮苷含量及总黄酮含量的高点分别出现在4—5月和9月,各银杏叶总黄酮的含量依次为金叶银杏>雄株>雌株;雄株的叶绿素、类胡萝卜素与槲皮素之间,雌株的叶绿素a、类胡萝卜素与总黄酮之间都存在极显著正相关。金叶银杏叶色在4—6月为金黄色,其叶绿素含量均比雄株、雌株银杏低,7月转绿后与雌株和雄株差异不大,其光合、黄酮代谢的变化更接近于雄株,且其黄酮合成的能力高于雄株及雌株。【结论】银杏叶的最佳采收期在9月,雄株和金叶银杏更适用于叶用林的培育,雌株的抗逆性高于雄株与金叶银杏,金叶银杏既有观赏价值,又有优良的经济性状,因而具有良好的开发利用前景。     

银杏雌、雄植株花芽分化后期及开花期间生理代谢的比较

【目的】研究银杏雌、雄株花芽分化后期及开花期间内含物和激素代谢的动态变化,为银杏雌、雄株的定向培育、授粉、性别鉴定提供参考。【方法】通过采集银杏雌、雄株花芽分化后期(11月25日—次年3月16日)、开花期(3月17日—4月7日)、开花后(4月8日—4月28日)3个阶段短枝果芽及开花后的叶片,测定其可溶性糖、可溶性蛋白、黄酮和内酯等内含物及激素含量。【结果】在花芽分化后期,银杏雄株普遍比雌株含有更多的可溶性糖和可溶性蛋白,其苯丙氨酸解氨酶(PAL)活性也更高;而在开花期,银杏雌株比雄株含有更多的可溶性糖、淀粉和可溶性蛋白,其PAL活性也更高,但此期间雄株的赤霉素(GA)和玉米素(ZT)含量远高于雌株。雌、雄植株芽期的过氧化物酶(POD)活性远高于开花期和花后期,而开花期间雌、雄株叶片都具有较高的ZT、GA、总黄酮和萜内酯水平。【结论】银杏雌、雄株在开花时间各节点的生理代谢水平出现不同步性,雄株的可溶性糖、可溶性蛋白、总黄酮和萜内酯的高点比雌株早2周左右。较高水平的GA和ZT、总黄酮和萜内酯可能是银杏雄株开花及雌株胚珠发育所必需的。     

银杏营养贮藏蛋白质的细胞学及生物化学分析

采用显微观察和凝胶电泳（SDS—PAGE）技术对银杏（Ginkgo biloba L．）枝条营养贮藏蛋白质的动态变化规律及蛋白质组分进行了测定分析。结果表明：贮藏蛋白质含量在银杏越冬期间一直保持较高水平，到翌年春季芽萌发时，贮藏蛋白质迅速转移再利用；新梢生长到了夏末秋初，又重新开始积累贮藏蛋白质。银杏枝条贮藏蛋白质组分可分为高分子量、中分子量和低分子量3类；变化最明显的是高分子量的45kD蛋白，其在芽萌发前可以清晰地辨认，展叶后逐渐消失，因此，45kD蛋白可能是银杏营养贮藏蛋白质的主要类型。     

雌雄异株植物银杏特异蛋白初步分析

本文采用SDS-PAGE单向电泳技术对银杏(Ginkgo biloba)雌雄树叶片及花的蛋白质进行了研究。结果发现,银杏雄树叶片的特异带在相对分子量约为106KD;而雄树花序的特异带在相对分子量约为28KD处,雌树花序的特异带在相对分子量约92KD和36KD处。     

不同生境对银杏雌、雄株嫁接苗叶中聚戊烯醇等成分积累的影响

【目的】探究生境对银杏(Ginkgo biloba)叶中聚戊烯醇、可溶性糖、可溶性蛋白和类脂4类代谢产物积累的影响,探索影响代谢产物积累的主要立地因子,为银杏栽培提供理论依据。【方法】采用随机区组试验设计,方差分析、多重比较、相关性分析和逐步回归分析等方法,研究雌株和雄株银杏在7个生境下叶中聚戊烯醇、可溶性糖、蛋白质和类脂等变化规律。【结果】来自不同生境银杏叶中聚戊烯醇、可溶性糖、蛋白质和类脂的含量存在显著差异(P<0.05),来自石家庄地区叶中聚戊烯醇、可溶性糖、可溶性蛋白和类脂的含量最高;聚戊烯醇含量与类脂含量呈极显著正相关关系(P<0.01),但与蛋白质含量呈显著负相关关系(P<0.05);平均最暖月气温是影响银杏叶中聚戊烯醇、可溶性糖、可溶性蛋白和类脂积累的关键环境因子,此外日照时长和土壤中P、K含量对其的积累也具有较大的影响。【结论】环境因素会显著影响银杏叶中代谢产物的含量,温暖的生境有助于聚戊烯醇等类脂类物质的合成与积累。     

适于双向电泳分析的银杏叶绿体蛋白质提取方法

【目的】获得银杏叶绿体蛋白质的提取方法,在蛋白质水平探讨银杏光合作用对环境的响应机制。【方法】建立一种适合银杏叶绿体蛋白双向电泳分离的实验体系,采用Tris-平衡酚抽提法对银杏叶绿体蛋白质进行提取,并与三氯乙酸(TCA)-丙酮沉降法进行对比分析。【结果】Percoll密度梯度离心法适用于银杏叶绿体的提取,提取的叶绿体平均完整率在85%左右。单向电泳结果显示,与TCA-丙酮沉降法相比,在用Tris-平衡酚抽提法分离的叶绿体蛋白质泳道中,低分子质量蛋白质条带更多、更清晰。进一步的双向电泳结果表明,用Tris-平衡酚抽提法对银杏叶绿体蛋白质进行提取,蛋白质产量更高,图谱清晰,所分离的蛋白点更多,形态更好,条纹影响相对较小。【结论】Tris-平衡酚抽提法可有效地提取高质量的叶绿体蛋白质并进行双向电泳,可用于银杏叶绿体的蛋白质组学分析。     

毛白杨雌雄株过氧化物酶同工酶的等电聚胶电泳分析

用聚丙烯酰胺等电聚胶电泳分离毛白杨过氧化物酶同工酶,可以克服聚丙烯酰胺凝胶垂直平板电泳的分辨率低、酶易扩散、电泳时间长等缺点。雌株可分离到10～12条电泳区带,雄株仅得到4～5条。电泳时间由原来的7h缩短至4h。另外,雌雄株间的可溶性蛋白质含量、过氧化物酶活性及色谱扫描曲线都有明显的差异。     

甘蔗叶片蛋白质组双向电泳技术优化

为了建立适合甘蔗叶片蛋白质组研究的双向电泳技术,对甘蔗叶蛋白质的溶解方法、IEF电泳、上样量等关键步骤进行了优化.结果表明:裂解液中有2 mmol/L的硫脲才能更充分地溶解蛋白;上样量1.0 mg时得到质量较好的凝胶图谱;甘蔗叶片蛋白质主要分布在pH4～7范围.通过对甘蔗叶片蛋白双向电泳技术的优化,提高了双向电泳图谱分...     

东亚飞蝗消化系统蛋白质组双向电泳的分析

为了优化东亚飞蝗消化系统双向电泳技术,建立东亚飞蝗消化系统蛋白表达图谱,探讨雌、雄东亚飞蝗消化系统蛋白组分的差异,利用pH值为3~10和pH值为4~7的胶条分别对雌、雄东亚飞蝗消化系统进行双向电泳分析,进行蛋白组学分析.研究结果发现:雌性东亚飞蝗消化系统蛋白种类多于雄性,雌性东亚飞蝗消化系统特异蛋白中偏酸性蛋白数量与偏碱性蛋白相当,而雄性东亚飞蝗消化系统特异蛋白中酸性蛋白多于碱性蛋白.在雌、雄东亚飞蝗消化系统相匹配蛋白中,含量差异达3倍以上的蛋白约占总匹配蛋白的50%.可见,雌、雄东亚飞蝗消化系统蛋白组分存在差异.     

桑树雌雄幼苗抗氧化酶系统和光合色素对UV-B辐射的响应差异

以桑树雌雄幼苗为研究对象,研究其抗氧化系统在增强UV-B辐射下(比对照组增加10%)的性别响应差异.结果表明:1)UV-B辐射使雌雄桑苗叶片的SOD、POD活性显著升高,雌株的CAT活性显著降低,且处理下桑苗雄株的POD活性显著高于雌株.2)桑苗叶片MDA和Pr含量在UV-B辐射下显著增高,且雄株叶片MDA含量显著低于雌株,Pr含量显著高于雌株.3)UV-B辐射增强的情况下桑树雌雄幼苗的叶绿素a、b和总叶绿素含量显著降低,同时雌株的叶绿素a和总叶绿素含量显著低于雄株.研究结果表明了在增加UV-B辐射的情况下,雄性桑苗在叶绿素含量及渗透调节能力方面要高于雌株,雄株抗氧化酶对UV-B辐射的响应更积极.     

利用两种电泳技术分析番茄品种醇溶蛋白及其亲缘关系

本文利用番茄种子醇溶蛋白电泳图谱鉴定番茄各个品种之间的亲缘关系,采用酸性聚丙烯酰胺凝胶电泳（A-PAGE）和十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS-PAGE）对枣庄市售10种番茄品种的醇溶蛋白电泳图谱的分析.结果表明：不同物种间的醇溶蛋白谱带存在一定差异且这种差异反映一定的关系.10种番茄醇溶蛋白分离谱带8条,大部分具有5条相同谱带,少部分谱带数量较少,最少谱带4条,经过遗传相似性与遗传多样性分析番茄的亲缘关系,经过遗传多样性聚类分析,将10种番茄在一定水平上,聚为5类.为枣庄番茄品种的亲缘关系分析以及遗传育种工作提供了依据.     

大鼠十七种组织器官的蛋白图谱和它们的蛋白水解酶活性分析

用聚丙烯酰胺凝胶电泳和酶的原位复性电泳方法分析了大鼠脑、心脏、肺、舌、胃、小肠、大肠、肝脏、胰脏、肾脏、睾丸、附睾、输精管、阴茎、卵巢、子宫、肌肉等组织器官的蛋白质图谱和蛋白水解酶活性。     

辣椒疫霉菌蛋白质的聚丙烯酰胺凝胶电泳法鉴定

本文以辣椒疫霉菌(Phytophthora capsici)A~1和A~2两个交配型及寄生疫霉菌(P.micotianae Var.parasitica)A~1和A~2两个交配型为标准菌株,对从新疆石河子、塔城、吐鲁番、伊犁、哈密和昌吉六个不同地区辣椒病株上分离的疫霉菌株(分别编号为Ph—2、Ph—11、Ph—14、、Ph—15、Ph—16、Ph—17)的蛋白质,用聚丙烯酰胺凝胶电泳法进行了分析和比较。结果证明,这6个菌株的蛋白质电泳图谱与辣椒疫霉菌标准菌株一致,它们都有相同的5条重带和基本相同的3～4条弱带,而与寄生疫霉菌完全不同。说明该法可做为疫霉菌鉴定的重要辅助手段之一,实验中同一菌种不同交配型间的蛋白质电泳图谱完全相同,但6个菌株中Ph—2、Ph—14和Ph—16的弱带与标准菌株间稍有差异,是属于菌株间的差异还是其它原因有待进一步研究。     

嗜碱菌与非嗜碱突变株膜蛋白比较

分别提取不同条件下培养的兼性嗜碱菌ＮＴＴ３６及该菌株的非嗜碱突变株ＮＴＴ３６ｃｓ－８（Ｅｒｙ＾ｒ）的膜蛋白进行ＳＤＳ－聚丙烯酰胺线性梯度凝胶电泳,发现膜蛋白质带有明显的不同。推测这与嗜碱菌的嗜碱性有关,对嗜碱细菌的嗜碱机理作一初探,以促进对嗜碱菌的开发利用。     

褐藻色素—蛋白质复合物PAGE分离研究

对裙带菜色素－蛋白质复合物ＰＡＧＥ分离过程中影响因素的研究表明,去污剂不同,分离得到的色素－蛋白质复合物的数目和种类有差异,在４种去污剂中,以ＤＭＧ和ＤＩＧ增溶的效果最好,游离色系较少,随着类囊体膜存放时间的延长,分离的色素－蛋白质复合物的数目和种类不变,但电泳后产生的游离色素增多,电泳分离结果与分离胶中Ａｃｒ的质量浓度有关,最适质量浓度为１００ｇ／Ｌ,可分离出８种色素－蛋白质复合物。     

超声波刺激对绞股蓝幼苗的POD同工酶影响

运用聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)方法研究了用不同时间的超声波处理对绞股蓝幼苗的过氧化物酶(POD)同工酶表达的影响.结果表明,适当剂量的超声波处理能够促进绞股蓝(Gynostemma pentaphyllum)过氧化物酶同工酶的表达;超声波处理后的绞股蓝与对照相比,过氧化物酶同工酶在酶带数目和活性上都有明显增加,尤其以T6和T12的条带数最多且染色较深.     

改良聚丙烯酰胺凝胶电泳法测定籼粳分化的同工酶带

对同工酶聚丙烯酰胺凝胶电泳法进行改进:液氮研磨样品,0.1 mol/L tris-顺丁烯二酸酐(pH=7.0)缓冲液提取,Bio-rad MP3电泳槽(凝胶规格10 cru×7.5 cm×0.5 mm)在120～150 V电泳2～4 h,得到快速、经济、分辨率高的分析效果.分析了水稻4种同工酶,发现Est-3,Est-4,Est-x和Pox-x4个新的籼粳分化位点,其中Pox-x为一新位点,该位点在籼稻中有1条带,在粳稻中为哑等位基因.     

管藻目绿藻叶绿素蛋白复合物PAGE分离方法的优化

以高等植物菠菜为对照，对管藻目绿藻刺松藻和假根羽藻叶绿素蛋白复合物的ＰＡＧＥ分离方法进行了优化。选择ＳＤＳ，ＤＯＣ，ＤＭＧ和ＴｒｉｔｏｎＸ－１００４种去污剂在不同的浓度、比例及增溶时间条件下，对色素蛋白复合物的分离效果进行了比较，并对电泳分离条件做了部分改进，提高了分辨率。     

5种黄精属植物的蛋白指纹分析

本文用聚丙烯酰胺凝胶电泳（ＳＤＳ—ＰＡＧＥ）技术分析了５种黄精属植物根状茎和叶的蛋白指纹．结果表明：（１）它们的根状茎均含有３８．５、２８、１８．６ｋＤ蛋白质;（２）根状茎和叶的蛋白质种类有很大差异;（３）５种黄精属植物各含有自己特有的蛋白质,它们在本属植物物种鉴定中一定参考价值．     

小麦耐盐系筛选及稳定性研究

以小麦幼穗、幼胚为原始材料,进行耐盐突变体的筛选,并对其愈伤组织及再生植株后代进行耐盐稳定性的生理生化分析。结果表明：耐盐系在高盐浓度下其鲜重、干重明显高于对照系;耐盐系保持较高的Ｋ＾＋／Ｎａ＾＋比;与对照组相比,耐盐系种子醇溶蛋白电泳带有１４条,其中Ｂ２,Ｂ３,Ｂ４带为耐盐系所特有,Ｂ１带含量高于对照。但对照Ｂ５带合成量增加;耐盐系再生植株后代可溶蛋白电泳带耐盐系为２８条蛋白带,而对照系为２６条