异柠檬酸裂解酶肽类抑制剂的优化筛选

利用噬菌体肽库筛选与计算机模拟分子对接技术, 优化异柠檬酸裂解酶肽类抑制剂的筛选. 先通过噬菌体肽库筛选出与异柠檬酸裂解酶（ICL）具有高亲和力的结合肽, 再利用Discovery Studio 2.1模拟多肽与ICL蛋白晶体（1F8I）的分子对接, 最后用Fmoc固相合成法合成多肽, 并对其生物活性进行检测. 实验结果表明, 通过噬菌体肽库筛选得到了29条七肽序列, 其中12条可与ICL蛋白晶体成功对接. 体外生物活性检测结果显示, 得到的12条七肽均对ICL的活性有明显抑制作用（抑制率均超过50%）.     

果胶裂解酶液态发酵条件的研究

通过单因素及正交实验对黑曲霉(Aspergillus niger)产生果胶裂解酶的发酵条件进行优化,研究了该酶的性质。实验表明,该酶的最适产酶培养基组成为(g·L-1):麸皮60,玉米秸杆40,尿素20,K2HPO4·3H2O 2．0,KCl 7．0,CaCO310．0。最适培养条件为:初始pH 6．0,30℃,接种量8％,培养2 d,此时酶活力为8．47 U／mL。该酶的最适温度50℃,最适pH 6．0。     

可控性自裂解乳球菌的构建

为阐明发酵乳杆菌温和噬菌体φPYB5编码的由穿孔素(Hyb5)和裂解素(Lyb5)组成的裂解盒在乳酸菌中的作用特征,将hyb5-lyb5基因克隆到E. coli/L. lactis穿梭质粒pSEC的nisin诱导型启动子下游,构建了重组质粒pSEC-hyb5-lyb5。将pSEC-hyb5-lyb5电转入Lactococcus lactis NZ9000,获得重组菌株NZphl。经nisin诱导表达后,Hyb5-Lyb5表现出高的裂解活性,使NZphl菌液的浊度（OD600）急剧下降,并释放出大量胞内蛋白,为利用自裂解菌株生产优质乳制品奠定了基础。     

搅拌转速对Bacillus subtilis分批发酵碱性果胶裂解酶的影响

在5L小型发酵罐上，考察了不同搅拌转速对细胞生长和碱性果胶裂解酶生产的影响。根据细胞生物量、酶活水平、比细胞生长速率和比产物合成速率的变化情况，提出了两阶段搅拌转速控制策略：0～5h搅拌转速500r／min;5h后搅拌转速600r／min。PGL和PIVIGL酶活分别提高5．3％和15．1％；FGL和PMGL最大平均比生成速率分别提高15．9％和23．1％。     

致病性鸡大肠杆菌噬菌体的分离与效价测定

鉴于临床分离的致病性大肠杆菌的耐药谱很广,常规抗生素的治疗效果较差,死疫苗往往存在毒力返祖的问题.实验从污水中分离得到了5株噬菌体,采用自行分离和鉴定的大肠杆菌为宿主菌,经纯化增殖提高效价后进行裂解试验,取得了比较满意的效果.     

海洋来源褐藻胶裂解酶分离纯化及酶学性质研究

以假交替单胞菌(Pseudoalteromonas sp.zb7-4)发酵制备褐藻胶裂解酶粗酶液,采用弱阴离子DEAE交换层析分离褐藻胶裂解酶,分析纯化褐藻胶裂解酶Alg L的酶学特性.结果表明:Alg L的表观分子质量约为32 ku,比活力为(208.26±5.87)U·mg-1;其最适反应pH为7.0,在pH为6.0~10.0范围内稳定性较好,保温1 h仍能保持80%以上的相对酶活力;最适反应温度50℃,在40℃保温30 min,其残余酶活力高于80%;Cu2+、Cr3+、Co2+、Ba2+、Sr2+、Hg2+对该酶具有不同程度的抑制作用,Hg2+抑制作用最为明显;该酶具有较好的盐耐受性,在3 mol·L-1Na Cl反应体系中保温2 h,仍残余66%酶活力.动力学参数Km、Vmax、Kcat测定表明,该酶对聚古罗糖醛酸钠(PG)亲和力较高,为偏好聚甘露糖醛酸钠(PM)裂解作用的双功能酶.     

兔抗Ｍ１３噬菌体酶标抗体的制备

M13噬菌体已被广泛地应用于噬菌体展示技术.M13的酶标抗体,是在噬菌体展示技术筛选结果ELISA检测中不可缺少的试剂.我们制备了兔抗M13抗血清,其效价高于1:6000;经两步饱和硫酸铵沉淀,初步纯化了兔抗M13抗体;用过碘酸钠法对抗体进行了辣根过氧化酶的标记,酶标记抗体活性为1:6400.     

褐藻胶裂解酶发酵工艺优化及其中试放大

对产微球茎菌（Microbulbifer sp.）ALW1发酵产褐藻胶裂解酶5 L罐发酵工艺进行优化,建立褐藻胶裂解酶的高产发酵工艺。结果表明:海藻酸钠质量浓度为1 g/L时效果最好,浓度减半或加倍都会使酶活力下降;25 ℃比20 ℃更利于产酶;pH值控制在7.5时比自然条件下发酵产酶高峰提前,产酶量变化不大;在此基础上,对罐上工艺进行中试放大,20 L发酵罐酶活力最高为57.0 U/mL,200 L罐酶活力最高为43.5 U/mL,500 L罐酶活力最高为38.3 U/mL,分别是小试水平的39.6%、30.2%、26.5%。     

硫酸软骨素裂解酶ABC产生菌的筛选及酶学性质的初步研究

从成都市井研县生猪屠宰厂等地采集的样品中筛选出一株高产、稳定的硫酸软骨素裂解酶ABC产生菌株GT38,初步鉴定为彭氏变形杆菌(P．penneri),其酶活力单位高达112U／L．酶学性质经初步研究表明：该酶的最适反应pH值为7．0,最适反应温度为30℃,在pH值6～8之间较稳定,温度在30℃～45℃较稳定,金属离子对酶活力影响不大．     

异柠檬酸裂解酶肽类抑制剂结构的修饰

利用Fmoc固相多肽合成法, 按已知异柠檬酸裂解酶抑制剂的直链肽氨基酸序列合成首尾相连的环肽抑制剂. 经色谱纯化和质谱鉴定, 其相对分子质量的实测值与理论值相符. 抑制率实验结果表明, 合成的环肽对异柠檬酸裂解酶有明显抑制作用, 抑制率大于50%. 采用高效液相色谱法分别检测直链肽和环肽在血浆中的半衰期, 实验
结果表明, 环肽在血浆中的半衰期为11 min, 比直链肽的半衰期延长175%.     

Interactions between marine microorganisms and their phages

Viruses are the most abundant biological entities in marine ecosystems. Most of them are phages that infect bacteria and archaea. Phages play important roles in causing the mortality of prokaryotic cells, structuring microbial communities, mediating horizontal gene transfer between different microbes, influencing the microbial food web process, and promoting biogeochemical cycles (such as C, N, etc.) in the ocean. Here we provided an overview of recent advances in research on the interactions between marine microorganisms and their phages, and suggest future research directions based on our understanding of the literature and our own work.     

抗菌药物的研究现状及临床应用

综述抗菌药物的研究现状及临床应用情况,为临床医生合理使用抗菌药物提供指导.通过对相关文献的整理、分析与归纳,发现多种病原菌已对现有抗菌药物产生耐药性,同时,针对临床上对抗菌药物的使用存在不合理现象,提示医药工作者应引起重视.     

重症监护室非发酵菌的检出率及其耐药性分析

目的:回顾性分析某医院重症监护室(ICU)2010年1月1日-2010年12月31日之间感染病原菌中非发酵菌的分布及其耐药情况。方法:用VITEK-32仪鉴定细菌,K-B纸片扩散法做体外药敏试验,统计、分析非发酵菌的检出率和药敏结果。结果:560份ICU标本,医院感染分离菌株335株。其中,非发酵菌181株。非发酵菌的阳性检出率为32.32%,其中,铜绿假单胞菌最为常见(65株,19.40%),其次为鲍曼不动杆菌(53株,15.82%)、洋葱假单胞(31,9.25%)和嗜麦芽窄食单胞菌(28,8.36%)。分离菌中标本来源以口痰最常见,其次为静脉导管、静脉血和胸腹水。铜绿假单胞菌、鲍曼不动杆菌、洋葱假单胞和嗜麦芽窄食单胞菌对多种抗菌药物均具有较高的耐药性。结论:医院感染病原菌中非发酵菌的检出率较高且耐药性强;治疗非发酵菌感染应根据体外药敏试验结果选用敏感的抗菌药物,以减低耐药率。     

血清肝素结合蛋白对菌血症的诊断价值

目的:探讨血清肝素结合蛋白(HBP)对细菌性血流感染的诊断价值,为临床感染性疾病的诊断提供依据.方法:检测血培养细菌感染阳性患者和健康对照组的HBP水平,统计分析两组HBP水平的差异,采用受试者工作特征曲线分析其对细菌性血流感染的特异性、敏感性,阳性似然比、阴性似然比.结果:血清肝素结合蛋白诊断菌血症的ROC曲线下面积为0.898,当肝素结合蛋白的截断值为70.35 ng/mL时,对细菌性血流感染诊断的敏感度为78.0%、特异度为88.0%.结论:血清肝素结合蛋白可作为临床医生判断是否是细菌性血流感染的一个辅助指标.     

加强青少年体育和增强青少年体质的动力与阻力

主要研究了在加强青少年体育和增强青少年体质过程中所存在的动力与阻力两大类因素,动力主要表现在学生家长渴望孩子能够健康成长和国家追求强盛这两种愿望的合力以及国家有关部门的政策约束力;阻力主要表现在学生、家长、教师和学校各自所承受的不同心理压力及体育教学物质条件不足等方面.同时,还提出了相应的对策.     

Some Effective Reading Strategies and Skills:Their Application to English Text Teaching in SSOT

I.Purpose of the Study In the essay,we hope to call the teachers' attention to the importance about reading and text teaching.Theoretically and practically,we have a try to introduce some effective strategies and skills.1.1.Introduction English learning is difficult for many Chinese learners.One of the major causes is that English and Chinese belong to different language systems.Another important cause is the fault of current methods that many teachers have been applying.In the process of text teaching,problems are mainly present in the following two aspects:One is that some teachers and students neglect the importance of reading;Another aspect is that text materials are utilized insufficiently,that is to say,enough reading strategies and skills are not applied in text teaching.     

细菌生物膜的自然属性与致病性

细菌生物膜是相对于单个分散游离状态的细菌而言的另一种独特的生存形式,其最具特征性的表型决定了这种群聚性细菌集团对人体内环境和对自然界有着广泛的适应性.     

抗菌纳米ZnO复合乳液的制备及抑菌效果

选用丙烯酸丁酯、苯乙烯等单体,对钛酸酯偶联剂改性的抗菌纳米氧化锌进行原位聚合,制备具有核壳结构的纳米ZnO复合乳液;以水溶性羧甲基纤维素钠（CMC—Na）为分散剂,制备纳米ZnO／苯丙共混复合乳液。采用活化指数、亲油化度以及红外光谱评价纳米ZnO的表面改性效果,井对复合乳液的粒径、抑菌性及紫外线屏蔽效应作了系统研究。结果表明,当偶联剂用量为纳米ZnO量的1／10时,改性纳米ZnO的活化指数、亲油化度均达最大;当pH为5—6,CMC—Na用量为3％,改性纳米ZnO的分散效果最好。当改性纳米ZnO含量为0．1％-0．4％,复合乳液具有优良的抑菌作用和紫外线屏蔽功能。     

家鹅球虫种类调查及人工感染试验

对江苏省扬州、盐城地区的鹅球虫种类进行了调查和人工感染试验.结果表明,鹅球虫感染率为74.4%.共鉴定出6种球虫,即:Eimeriaanseris、E.fulva、E.hermani、E.nocens、E.stigmosa、Tyzzeriaparvula.12日龄无球虫感染仔鹅感染5×104个混合卵囊即发生死亡.通过单种卵囊接种试验获得了5种球虫的纯种卵囊并对它们的一些生物学特征进行了观察,为这些球虫的生活史和致病性研究奠定了基础.     

探索招收和培养社会在职研究生的有效途径

笔者分析了在改革不断深入，市场经济不断发展的新形势下，社会对高层次人才的特殊需求，同时指出传统的研究生招生和培养模式已难以完全适应社会的需要，必须不断改革完善，开辟研究生招生的新途径，多招收社会在职研究生，并制订出与市场经济发展相适应的招收方式和培养方案，以培养出具有创造能力、组织能力、应变能力和竞争能力的社会工程型新一代高级跨世纪人才。