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相似文献
 共查询到19条相似文献,搜索用时 125 毫秒
1.
基因枪法转化香蕉薄片外植体的参数优化   总被引:15,自引:1,他引:14  
采用果用香蕉(Musa spp.)的薄片外植体作为转化受体,通过对GUS基因瞬间表达的研究,找出了较适合的轰击条件和外植体培养条件,研究表明,高渗处理对转化的影响较大,轰击前后对体外植体进行高渗处理的瞬间表达率(14.11%)是对照(3.68%)的3.86倍。预防培养外植体转化的瞬间表达率(17.5%-42.11%)普遍高于没有预培养的外植体(12.20%),并以预培养6d为好。最适压力和射程分别  相似文献   

2.
超声波辅助的发根农杆菌对黄瓜的遗传转化   总被引:14,自引:0,他引:14  
由于超声波处理可在外植体上产生许多微小伤口,从而提高农杆菌与外植体之间的接触面积,提高农杆菌对外植体的转化频率。用野生型发根农杆菌(Agrobacterium rhizogenes)A4菌株感染黄瓜(Cucumis sativus L.) 无菌苗的子叶和下胚轴,建立了黄瓜的发根遗传转化体系。同时,对超声波处理时间、外植体放置方向、预培养时间、外植体类型、乙酰丁香酮的添加与否等影响因素进行了研究。结果表明,采用外植体在添加0.5mg/L NAA和2mg/L 6-BA的MS培养基上预培养4d,超声波处理2s,共培养3d,在预培养共培养期间子叶上表皮向下可以取得最佳的转化效果,发根诱导率为94.7%。乙酰丁香酮对发根诱导频率影响不明显。冠瘿碱检测表明,发根确定能合成农杆碱。  相似文献   

3.
影响农杆菌介导的辣椒基因转化因素的研究   总被引:4,自引:0,他引:4  
试验设置农杆菌类型、辣椒基因型、外植体、vir基因活化培养基、方法5个因素,研究了利用根癌农杆菌介导法辣椒遗传转化的效果。以获得Km抗性芽外植体频率为指标,发现农杆菌菌株类型和辣椒基因型对转化效率都有较大影响,直接影响着转化效率。采用预培养2d的子叶外植体,用农杆菌侵染5~7min,可获得最高的转化效率。  相似文献   

4.
提高农杆菌介导小麦遗传转化效率的几个因素   总被引:5,自引:0,他引:5  
利用gua基因的瞬时表达研究了农杆菌介导的小麦遗传转化,探讨了影响转化效率的几个因素.结果发现,当转化时茵液浓度的OD600为1.0、侵染时间为1h、超声波处理30s、共培养期间使用抗氧化剂以及用胚性愈伤组织作为外植体等,均可使转化效率得到明显提高、综合使用这些优化的转化条件,可使小麦的瞬时转化效率提高3倍多.  相似文献   

5.
通过非洲菊(Gerbera hybrida)组织培养建立起适合于农杆菌介导的基因转化受体系统,非洲菊叶柄外植体在MS 3mg/L BA 0.01mg/L NAA培养基中直接诱导芽生长,在MS 0.1mg/L NAA培养基中生根培养,获得再生植株,诱导率达57%。带有云南矮牵牛(Petunia hybrida)二氢黄酮醇3’5’羟化酶cDNA的pEH表达载体与农杆菌(Agrobacterium tumefaciens)LBA4404融合后,与非洲菊叶柄外植体共培养3d,通过含有卡那霉素25mg/L和羧苄菁霉素500mg/L的选择培养,诱导出转基因非洲菊。经PCR和Southern分子杂交检测,证明目的基因已整合入非洲菊的基因组中,转基因非洲菊花色、花型及叶型都有显变化。  相似文献   

6.
农杆菌介导的棉花遗传转化过程中诸因素对出愈率的影响   总被引:1,自引:0,他引:1  
研究了农杆菌介导的棉花遗传转化过程中影响外植体出愈率的一些相关因素.结果表明:卡那霉素(Kan)的浓度以50 mg/L或75 mg/L为最好,农杆菌菌株EHA105的浸染能力较强,7 d苗龄的棉花无菌苗下胚轴为最佳的遗传转化外植体材料,下胚轴外植体经预培养后再经农杆菌菌液浸染更有利于胚性愈伤组织的形成,同时农杆菌菌液浸染时间以3 min为最佳.  相似文献   

7.
以向日葵无菌苗的子叶节为外植体,通过农杆菌介导法,对其遗传转化条件进行了研究,建立了向日葵子叶节农杆菌介导的遗传转化体系.结果表明:在农杆菌浸染前(浸染浓度为OD600=0.6)进行2 d的预培养、浸染8 min的外植体在MS+1.2 mg/L 6-BA+0.03 mg/L IAA的培养基上转化效率较高.PCR检测初步证明,LycB基因已整合到向日葵再生植株中.  相似文献   

8.
龙胆毛状根的诱导培养   总被引:2,自引:0,他引:2  
江洪如  涂艺声 《江西科学》1995,13(4):244-248
发根农杆菌(A.rhizogenes)R1500感染龙胆茎段、叶片外植体,15d后可诱导出毛状根。茎段诱导率高于叶片,可达42.3%。毛状根的诱导与温度和光照有关。转化根具有抗卡那霉素的特征,在不含激素的MS培养基上培养,筛选出了生长正常的毛状根系。  相似文献   

9.
肝片吸虫抗原基因转基因苜蓿再生的研究   总被引:29,自引:0,他引:29  
用直接转化法,将构建有肝片吸虫保护性抗原基因FH3的植物表达载体pBI121-FH3,导入感受态的根瘤农杆菌EHA105;以重组的根瘤农杆菌为介导,用叶盘法转化苜蓿外植体,筛选得到抗Kan转化外植体;抗性外植体通过诱导丛生芽和诱导生根,再生出完整植株,提出植株总DNA进行Southern blot,结果表明,FH3基因已经整合入苜蓿基因组中。  相似文献   

10.
 利用根癌农杆菌介导法将拟南芥多效性基因CPR5转化水稻中花11,同时优化了其再生体系和遗传转化体系。结果表明:相比27 ℃、暗培养,32 ℃、持续光照培养可使诱导率提高到100 %,且缩短了诱导周期;〖JP2〗预分化培养后,在附加5 mg/L 6 BA和1 mg/L NAA的分化培养基上分化率和再生率可分别达到100 %和90.50 %。同时探索了较高转化频率的条件为 A600≈ 0.05~0.1的农杆菌菌液浸染5 min,共培养时间为3 d,同时添加1张用AAI培养液浸湿的无菌滤纸。对部分转化植株进行PCR、Southern blot和半定量RT PCR检测,结果表明AtCPR5基因已经整合到水稻基因组中,在所试验的转化植株中均为单拷贝,但表达程度存在差异。  相似文献   

11.
农杆菌介导东方百合“西伯利亚”遗传转化体系建立   总被引:1,自引:0,他引:1  
以东方百合"西伯利亚"(Lilium seberia)为材料,建立了百合再生和农杆菌介导的遗传转化体系.采用LBA4404和GV3101菌株对鳞片来源的愈伤组织进行侵染,并以鳞片作为对比转化材料,两种菌株携带有相同的双元载体pCAMBIA1301.研究结果表明,农杆菌侵染愈伤组织外植体转化率较高;乙酰丁香酮(AS)的添加能大大提高根癌农杆菌转化百合的效率.另外,共培养时间、不同菌株均对转化效率有一定的影响.筛选后获得的抗性植株经PCR检测和GUS组织化学染色证实外源基因已经整合到基因组DNA中并获得表达,转化率为5%~8%.  相似文献   

12.
SpltNPVp49基因的克隆和序列分析   总被引:6,自引:0,他引:6  
根据新发现的杆状病毒凋亡抑制基因p49基因的序列设计了一对引物,以SpltNPV基因组DNA为模板,通过PCR扩增获得了预期大小的约1.3kb的DNA片段,将此片段克隆到pGEM-T载体上并直接测序。序列分析表明,该片段为SpltNPV完整的p49基因开放读码框。与已知的杆状病毒p49基因的序列同源性为87%,与之对应的氨基酸序列的同源性高达93%。它是首次从SpltNPV中克隆到的抑制细胞凋亡的  相似文献   

13.
根癌农杆菌介导苜蓿体胚转化及转基因植株再生   总被引:5,自引:0,他引:5  
用含质粒载体pCAMBIA2301(带有受CaMV35S启动子调控的GUS基因和nptⅡ基因)的根癌农杆菌Agrobacterium tumefaciens转化晋南苜蓿Medicago sativa L.cv.Jinnan的体胚组织,发现负压处理有利于提高转化频率(可达35%),3批共158个体胚切块的转化实验共获得具有卡那霉素抗性的再生植株15株,经组织化学染色和分子检测,证实GUS基因已整合到转化植株基因组中,在芽、叶片、叶柄和根等组织中均有表达,并在土壤栽培过程中保持稳定的表达.  相似文献   

14.
15.
Rice (\%Oryza sativa\% cv. Jindao 1187) was grown in open_top chambers which contained ambient and enriched CO\-2. CO\-2 elevation stimulated rice tillering during early vegetative stage. However, panicle dry weight per plant did not change at maturity stage. Root biomass was enhanced by high CO\-2. Root / shoot ratio was increased under high CO\-2 at maturity, indicating more carbon allocation to the below_bround part in rice under high CO\-2.  相似文献   

16.
通过对五味子科的历史回顾和对大量标本花果 (包括近缘科 )的详细观察 ,结合形态学、孢粉学和细胞学资料 ,及对木兰目、八角目等多心皮原始类群的分析 ,将五味子科提升为五味子目。五味子科下设南五味子属和五味子属。南五味子属下隶离蕊五味子亚属和南五味子亚属 (共 2亚属 )。  相似文献   

17.
青花菜组织培养再生体系的研究   总被引:11,自引:0,他引:11  
采用不同培养基对青花菜(Brassica oleracea var.italica Plenk.)的子叶和下胚轴进行分化培养,结果表明:青花菜不同的外植体的组织培养效果不同,当采用MS基本培养基附加BA0.5mg/L、NAA0.1mg/L和Sucrose5%的处理时下胚轴的不定芽分化频率最高,可达50%;而当培养基中添加BA0.5mg/L、NAA0.1mg/L、Sucrose3%和AgNO34mg/L的子叶的不定芽分化频率最高,约为78%左右;同时在分化培养基中添加不同种类和浓度的激素、蔗糖和AgNO3均对其子叶不定芽的再生具有明显的效应。  相似文献   

18.
设$x:M\rightarrow A^{n+1}$ 是由定义在凸域 $\Omega\subset A^n$ 上的某局部严格凸函数 $x_{n+1}=f(x_1,\dots,x_n)$ 给出的超曲面. 我们记 $\rho(x)=\left(\det\left(\frac{\partial^2f}{\partial x_i\partial x_j}(x)\right)\right)^{-\frac{1}{n+2}} $. 假设 $(M, g)$ 是一完备的Hessian流形且具有非负的李奇曲率,如果 $\rho$ 满足 $\Delta_{g}\rho=\beta\frac{\parallel\nabla\rho \parallel_g^2}{\rho}(\beta\neq 1)$ , 则 $M$ 一定是椭圆抛物面.  相似文献   

19.
用基因枪法转bar基因以培育抗除草剂的直播稻   总被引:4,自引:0,他引:4  
用基因枪法将 p CB1 质粒 (含 bar基因和 cecropin B基因 )导入到三种有应用前景的直播稻品种中 ,受体材料为来源于水稻未成熟胚的胚性愈伤组织和来源于成熟胚的悬浮细胞系 .当代转化植株显示出很强的对除草剂 Basta的抗性 ,Southern-blot分析显示 :两个外源基因共整合到转化植株基因组中 ;子一代植株中仍含有外源基因 ;来源于同一块愈伤组织的转化植株的整合模式可能是相似的 ,也可能完全不同 .  相似文献   

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