微生物发酵对川乌、附子中生物碱含量的影响

探讨了微生物发酵对川乌、附子中新乌头碱、乌头碱、次乌头碱含量的影响。将菌种以孢子悬液的形式接入灭菌生川乌、生附子、制川乌、制附子药材中,30℃固态发酵培养7 d提取生物碱,对照组为未发酵药材。采用高效液相色谱法测定其含量。研究发现发酵药材中新乌头碱、乌头碱、次乌头碱质量分数明显低于原药材:生川乌中新乌头碱、乌头碱、次乌头碱的质量分数分别为0.1390%、0.0195%、0.0320%,而发酵生川乌中分别为0.0231%、0.0039%、0.0117%;生附子中新乌头碱、乌头碱、次乌头碱的质量分数分别为0.2750%、0.0670%、0.0550%,而发酵生附子中分别为0.0633%、0.0552%、0.0291%;生川乌+附子中新乌头碱、乌头碱、次乌头碱的质量分数分别为0.1395%、0.0075%、0.0078%,而发酵生川乌+附子中分别为0.0202%、0.0022%、0.0026%。该结果表明微生物发酵有助于降低川乌、附子中有毒生物碱的含量。     

附子不同组织中生物碱含量的测定

对附子不同组织中乌头总碱和3种双酯型生物碱一新乌头碱、乌头碱和次乌头碱的含量进行了测定。用酸性染料比色法测定乌头类总生物碱的含量;反相高效液相色谱法测定新乌头碱、乌头碱、次乌头碱的含量,色谱柱为：Zorbax extend—C18（150mm×4．6mm,5．0μm）,流动相为乙腈-0．1％乙二胺,梯度洗脱,流速为1mL／min,检测波长为240mn,柱温30℃。结果表明：附子不同组织中生物碱的含量呈现明显的差异性。子根、茎秆、叶、须根和母根中乌头类总生物碱含量分别为：5．53,3．81,14．77,8．87和4．58mg／g;3种双酯型生物碱含量在不同组织中的含量顺序为：须根〉子根〉母根〉叶片〉茎秆。该研究可为附子资源的综合利用提供科学依据。     

反相高效液相色谱法测定附子有效成分含量的方法研究

运用RP-HPLC测定不同地区附子药材中3种酯型生物碱———新乌头碱、乌头碱和次乌头碱的含量.实验以RP-C18色谱柱为固定相,乙腈-0.1%的乙二胺水溶液为流动相进行梯度洗脱.梯度洗脱程序:乙腈和0.1%的乙二胺水溶液的比率0~17 min为46∶54,17~37 min为82∶18;37~50 min为46∶54,流速为1.0mL/min;紫外检测波长为230 nm.新乌头碱、乌头碱和次乌头碱的标准曲线范围分别是5.62×10-6~5.062×10-5mol/L、2.614×10-6~2.614×10     

高乌头生物碱的研究(一)

对于乌头属植物的研究,我国有悠久的历史。本草记载乌头植物的母根(主根)名乌头,附乌头而生的名附子。陶宏景谓:“乌头与附子同根,附子八月采……乌头四月采”。历代本草根据乌头类植物块根的母根、子根、支根等形状与生长、采集时期的不同分为侧子、乌喙、附子、乌头、天雄等五种名称;又因其性辛温有大毒列入毒草类,经炮制后用治诸风半身不遂、除寒冷、暖脾胃等。约在17世纪就有人提取其有毒成份名为“射网膏”,猎人用为制毒箭。近代随着科学的发展,国内外对于乌头的研究工作亦逐步深入,尤其是在生物碱方面,到目前为止已有一百多种乌头类生物碱被发现,有些已为人类所利用。我国近二十年来对12种乌头属植物进行了研究,分得30余种生物碱,如北草乌碱、紫草乌碱甲,宣乌碱及一枝蒿丙素、滇乌碱等的分子结构亦已阐明。本文所述的乌头采于兰州地区七道     

北草乌生物碱的超声辅助浸提及含量测定

对北草乌的生物碱的溶剂提取及超声辅助浸提进行了比较，结果表明通过超声辅助浸提，可以提高总碱的提取收率，缩短浸提时间，测定了生物总碱的含量为0.43%，通过反相离子对高效液相色谱分离得到的总乌头碱进行了分析，结果看出北草乌中所含生物碱主要有四种，其中的三种为：新乌头碱、次乌头碱，在北草乌中上述三种乌头碱的含量分别为0 24%、0.05%、0.01%。     

接骨木提取物有效成分含量与抑菌活性的关系

采用索氏提取法对接骨木叶片进行平行提取和顺序提取,并采用生长速率法测定了提取物对灰葡萄孢菌的抑菌活性,采用比色法测定了提取物中可溶性糖、可溶性蛋白、总黄酮和盐酸小檗碱的含量,以研究接骨木提取物有效成分含量与抑菌活性的关系,为接骨木活性物质的研究及更好的开发利用该属植物提供理论基础.结果表明,接骨木不同溶剂提取物的抑菌效果与以上四种有效成分的含量有关:提取物中可溶性糖或可溶性蛋白的含量越高,其对菌丝生长的促进作用越强,总黄酮或盐酸小檗碱的含量越高,其对菌丝生长的抑制作用越强.     

新疆戈壁野生木贼麻黄中麻黄碱和盐酸伪麻黄碱含量的测定

采用半仿生提取法提取生物碱,以薄层色谱法(TLC)对戈壁野生木贼麻黄的根、茎与果中提取的生物碱进行了签别,用HPLC同时测定新疆和田皮山戈壁野生木贼麻黄中的盐酸麻黄碱与盐酸伪麻黄碱等生物碱的含量,色谱柱为Agilent HC-C18(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相为甲醇-0.2%磷酸水溶液(体积比10∶90),测定波长为210 nm,流速为1.0 m L/min.结果显示,测定盐酸麻黄碱和盐酸伪麻黄碱分别在0.7-4.2μg/m L(r=0.999),0.05-0.3μg/m L(r=0.999)范围内,线性关系良好,平均加标回收率分别为101.6%(RSD=0.3%),102.1%(RSD=0.7%).该法结果准确,重现性好,可用于新疆和田皮山戈壁野生木贼麻黄2种生物碱的含量测定.     

乌头碱联合聚肌胞苷酸免疫抑瘤机制及减毒作用

拟筛选出与聚肌胞苷酸(PolyIC)联合应用的附子有效剂型及给药方式,用于抗肿瘤治疗,初探其抑瘤免疫机制及PolyIC对附子有效成分的减毒效应.应用附子不同层次剂型,水煎剂、总生物碱及乌头碱纯品,分别联合PolyIC灌胃或腹腔给药移植瘤小鼠,测抑瘤率,苏木精-伊红染色法染色分析坏死面积,酶联免疫吸附测定血清干扰素,噻唑蓝、流式细胞术分别测脾脏淋巴细胞相对活性、T细胞亚型及细胞毒T淋巴细胞相关抗原4 (CTLA4)表达;再选抑瘤最佳的药物测其毒性,乌头碱单倍剂量每日给药联合PolyIC隔日给药(非同步)、或乌头碱双倍剂量联合PolyIC均隔日给药(同步),测体重、血清酶、器官指数及存活率.结果显示,单独用药组、乌头碱灌胃联合组抑瘤率低于阳性对照,其余4个联合组与其无差异,其中乌头碱腹腔联合组抑瘤率最高为59.12%±19.64%,且仅该组肿瘤坏死面积大于阳性对照;其血清干扰素α(IFN-α)、干扰素γ(IFN-γ),脾脏淋巴细胞活性、分化决定簇抗原3、分化决定簇抗原4、分化决定簇抗原8 (CD8+) T细胞百分比高于未治疗组, CD8+T细胞CTLA4表达降低.乌头碱与PolyIC同步给...     

HPLC-DAD法同时测定三种来源丹参饮片中水溶性和脂溶性成分

测定不同来源丹参饮片中水溶性和脂溶性成分含量，为丹参的质量评价和合理利用提供数据支持。发展了HPLC-DAD同时测定丹参中的6种水溶性和脂溶性成分的方法，利用该方法对来源于山东、四川和云南的丹参饮片样品进行含量测定，结合聚类分析进行不同来源丹参饮片的差异性对比。结果表明：该方法简单、快速，可以实现丹参中不同极性成分的同时提取、分析；不同来源的丹参饮片中水溶性和脂溶性成分含量均存在一定的差异，来源于四川产区的丹参饮片中各成分含量最高，来源于山东产区的丹参饮片酮类成分含量优于云南产区，采用活性成分含量结合聚类分析可以实现其来源区分；不同来源的丹参饮片中各活性成分含量存在一定的差异。研究结果为丹参饮片的质量评价和合理利用提供了方法和数据支持。     

UPLC-MS/MS法同时测定云南黄草乌中滇乌碱、粗茎乌头碱甲和塔拉萨敏的含量

用UPLC-MS/MS法同时测定云南5种不同产地黄草乌中滇乌碱、粗茎乌头碱甲和塔拉萨敏的含量.采用安捷伦C18色谱柱,以乙腈-甲酸(φ=0.1%)水溶液为流动相进行梯度洗脱,电喷雾离子源正离子多反应监测模式进行质谱分析,采用多个特征离子对和外标标准曲线法对3种生物碱进行定性、定量分析.滇乌碱、粗茎乌头碱甲和塔拉萨敏在质量浓度1~100 ng·mL~(-1)范围内线性良好(r≥0.9990),检出限(LOD)分别为0.01、0.01 ng·mL~(-1)和0.02 ng·mL~(-1),定量限分别为0.03、0.04 ng·mL~(-1)和0.07 ng·mL~(-1);准确度均大于90%,日内及日间精密度均小于5%.5种黄草乌中均检出滇乌碱、粗茎乌头碱甲和塔拉萨敏,但不同产地黄草乌中3种成分的含量差异较大.     

麻黄附子细辛汤刍议

麻黄附子细辛汤为《伤寒论》中治疗少阴病要方。方中麻黄发越阳气，附子温补通运阳气，细辛配合附子通达阳气，全方融温补阳气、通达阳气、发越阳气，包括阳气产生、运送、敷布全过程的“全阳之剂”。主治证候为阴寒内盛、阳气虚衰，布达不畅。临床可根据具体情况调整用量和药物比例     

麻黄附子细辛汤刍议

麻黄附子细辛汤为《伤寒论》中治疗少阴病要方。方中麻黄发越阳气,附子温补通运阳气,细辛配合附子通达阳气,全方融温补阳气、通达阳气、发越阳气,包括阳气产生、运送、敷布全过程的"全阳之剂"。主治证候为阴寒内盛、阳气虚衰,布达不畅。临床可根据具体情况调整用量和药物比例     

基于网络药理学和高分辨质谱分析半夏厚朴汤潜在药效成分

以系统药理学方法寻找半夏厚朴汤可能的作用靶点,以分子对接方法对半夏厚朴汤中化合物进行虚拟筛选打分。采用高分辨质谱,研究不同提取方法下半夏厚朴汤的成分及含量。结果表明:基于药效成分的整合药理学共筛选出4个靶点,虚拟筛选评分中活性较高的物质以黄酮类化合物为主;高分辨质谱数据显示,提取物中主要有黄酮和三萜酸类化合物。半夏厚朴汤主要对炎症相关以及神志病有关靶点发挥作用,这与本方的临床应用吻合。质谱离子流峰面积与亲和能加和赋权结果提示,发挥药效的主要物质基础可能是黄酮和三萜酸的组合物。     

影响美洲大蠊药材中游离氨基酸测定的因素研究

目的:研究影响美洲大蠊药材中游离氨基酸含量测定的各因素,确定最佳检测条件。方法:采用单因素实验和正交设计实验,对溶剂浓度、物料比、提取时间、提取次数、活性炭用量、脱色时间、缓冲溶液的pH值、显色时间进行考察。结果:美洲大蠊药材中游离氨基酸的最佳提取条件为:8倍量65%乙醇,回流提取3次,每次60 min;最佳测定条件为:脱色时活性炭和样品的比例为4∶100,脱色时间10 min,显色时缓冲溶液的pH=6.0,水浴加热显色30 min。结论:该提取条件和测量方法适用于美洲大蠊中游离氨基酸的含量测定。     

基于网络药理学和分子对接探究麻黄加术汤治疗类风湿关节炎的潜在作用机制

利用网络药理学和分子对接方法探究麻黄加术汤治疗类风湿关节炎的潜在作用机制。通过数据库检索、筛选得到麻黄加术汤主要活性成分及其作用靶点,通过GeneCards、OMIM和Drugbank数据库筛选得到类风湿关节炎疾病靶点,使用STRING数据库和Cytoscape软件构建PPI(protein-protein interaction)网络;使用Metascape数据库对麻黄加术汤治疗类风湿关节炎的作用靶点进行GO(gene ontology)和KEGG(Kyoto encyclopedia of genes and genomes)富集分析;Cytoscape软件构建药物成分-靶点-通路网络;使用AutoDock软件对关键成分和靶点进行分子对接。结果筛选得到麻黄加术汤的潜在活性成分共131个,治疗类风湿关节炎的关键靶点133个,主要成分包括槲皮素、木犀草素、山奈酚等,关键靶点包括IL-6、TNF、TP53、STAT3等。GO和KEGG分析显示生物过程2 250条,细胞成分89条,分子功能152条,富集通路主要涉及AGE-RAGE信号通路、IL-17信号通路和TNF信号通路等。分子对接结果显示Phaseol和甘草酚与AKT1、PTGS2、MAPK1、MAPK8等关键靶点具有较好的结合活性。研究发现麻黄加术汤是通过多成分、多靶点、多通路的作用方式发挥治疗类风湿关节炎的作用,为类风湿关节炎的治疗提供了重要的科学信息。     

基于网络药理学和分子对接探讨黄连温胆汤治疗幽门螺杆菌相关性胃炎的作用机制

运用网络药理学和分子对接方法探索黄连温胆汤治疗幽门螺杆菌相关性胃炎的分子机制。应用中药系统药理学数据库与分析平台对黄连温胆汤药物活性成分及药物作用靶点基因进行筛选。通过Genecards数据库、DisGENET数据库查找幽门螺杆菌相关性胃炎疾病相关靶点,利用维恩在线绘图工具获得疾病与药物的共同靶点基因。利用Cytoscape 3.8.2软件以及STRING数据库分别构建药物-化合物-靶点相互作用网络及蛋白质-蛋白质相互作用网络图。运用DAVID数据库进行基因本体功能和京都基因与基因组百科全书通路富集分析。选取度值排名前3的靶点蛋白和活性成分使用AutoDockTools 1.5.6软件进行分子对接。共筛选得到槲皮素、川皮苷、柚皮素等127种黄连温胆汤药物活性成分,并获得Akt1、JUN、TNF-α、STAT3等101个潜在靶点蛋白,涉及P53信号通路、NOD样受体信号通路、TNF信号通路等90条信号通路。分子对接结果显示关键靶点STAT3、TP53、Akt1与活性成分槲皮素、川皮苷、柚皮素的亲和力较好,其中以Akt1与柚皮素的结合能力最强。通过分析黄连温胆汤治疗幽门螺杆菌相关性胃炎的作...     

难溶性盐钙芒硝在碱液中溶解特性的实验研究

在分析钙芒硝矿的化学组成和其溶解原理的基础上,通过实验研究了钙芒硝矿在不同碱性溶液中和不同溶解条件下溶解特性。结果表明,钙芒硝在碱性溶液中的溶解速度比较快,由于部分Na2SO4是由化学反应产生,因此属于化学溶解的范畴;钙芒硝在碱性溶液中的溶解速度与碱性强弱有关,碱性强溶解速度快,反之较慢;在溶解过程中会产生微溶物CaSO4,决定了钙芒硝在溶液流动的情况下速度较静态溶液的溶解速度快;实验结论的得出为较难溶于水的钙芒硝矿的地下水溶开采提供了一种有益的方法。     

The Dissolution of the Cellulose in the N - ethylmorpholine - N - oxide (NMMO) - Water System with Hydrothermolysis

Tbe N - methylmorpholine - N - oxide (NMMO) - water solvent was used to dissolve the cellulose that was achieved by means of hydrothermolysis. Sample B, RS and WS used here were made from beech, rice straw and wheat straw respectively. They could be completely dissolved in the NMMO - water system. A commercial a - cellulose was employed in the comparative experiment. The entire dissolving process was Investigated. At a given temperature, the vacuum condition applied to the mixture of the cellulose and NMMO - water was very important in order to accelerate the dissolution of cellulose and shorten the dissolving period. After dissolution, degree of polymerization (DP) of all samples was measured by viscometry. Longer dissolving time and higher temperature could cause the degradation of the dissolved cellulose. N- propyl gallate could prevent the degradation of cellulose during the process of dissolution.     

基于网络药理学探讨玫瑰花抗抑郁物质基础及作用机制

利用网络药理学和分子对接方法探究玫瑰花抗抑郁的物质基础及作用机制。通过中国知网收集抗抑郁单体和玫瑰花的化学成分,借助PubChem、SwissTargetPrediction数据库预测玫瑰花的抗抑郁活性成分及作用靶点,通过DAVID数据库进行通路富集分析,运用Discovery Studio 2017软件对关键成分和靶点进行分子对接。收集抗抑郁单体117个,玫瑰花成分127个,筛选出玫瑰花与抗抑郁相关的核心成分17个,分子对接显示玫瑰花所含芹菜素、槲皮素、山柰酚、异丁香酚、异槲皮苷、矢车菊素-3-O-葡萄糖苷6个活性成分,可较好地与AKT1、PTGS2、ESR1 3个抑郁相关靶点结合。结果表明玫瑰花抗抑郁的物质基础为芹菜素、槲皮素、山柰酚等黄酮类化合物,主要通过影响HIF-1信号通路、神经活性配体-受体相互作用信号通路、催乳激素信号通路、多巴胺能神经突触信号通路发挥抗抑郁作用。该研究为抗抑郁新药研发提供了理论依据及新的研究思路。     

乳酸发酵高菜加工工艺研究

以乳酸发酵高菜为主要原料,研究脱盐条件、原料配比及杀菌方式对品质的影响。结果表明,对高菜脱盐效果影响最大的因素是时间,其次是大小规格,影响最小的是料水比,分析结果可知最佳组合为A2B1C2,即大小规格8mmx20mm、料水比1：2、脱盐时间15min。不同配料研究以配料Ⅱ感官评定效果最好;产品以温度90℃,时间20min杀菌效果最佳。