未来的丙型肝炎疫苗

丙型肝炎病毒（hepatitis C virus,HCV）是丙型肝炎的病原体,是导致输血后肝炎和非甲非乙型肝炎的主要致病因子。HCV感染常导致慢性肝炎、肝硬化和肝细胞癌。HCV在细胞内和动物体内复制能力很差,没有理想的细胞模型和动物模型。丙型肝炎目前尚无疫苗,还有很多病人在等待治疗。研制预防性和治疗性疫苗,以控制HCV感染有着重要意义。经过几代科技工作者的努力和奉献,丙型肝炎疫苗研究取得了重大进展。用核酸疫苗作首次免疫,用多肽疫苗或树突状细胞疫苗作加强免疫,不但有预防作用,而且有治疗效果。核酸疫苗将为改善人类和动物健康作出巨大贡献。     

乙型肝炎病毒标志物与肝功能相关分析

目的探讨乙型肝炎病毒标志物与肝功能的关系.方法对比分析乙型肝炎102例病人中大三阳(HB-sAg、HBeAg、HBcAb阳性)44例、小三阳(HBsAg、HBeAb、HBcAb阳性)58例的谷丙转氨酶(ALT)、谷革转氨酶(AST)及总胆红素(T-BIL)浓度及白蛋白/球蛋白(A/C)异常情况.结果大三阳组ALT为(345.72±198.40)u/L,AST为(335.63±169.61)u/L,T-BIL为(78.68±26.78)μmol/L,A/G异常率为59.09%;小三阳组ALT为(155.63±98.53)u/LAST为(161.27±89.50)u/L,T-BIL为(38.68±16.78)μmol/L,A/G异常率为29.31%.两组比较有显著性差异(P＜0.05).结论乙型肝炎的病毒标志物与肝功能损害有关,大三阳病人的肝功损害比小三阳的明显严重.     

乙型肝炎病毒标志物与肝功能相关分析

目的探讨乙型肝炎病毒标志物与肝功能的关系.方法对比分析乙型肝炎102例病人中大三阳(HB-sAg、HBeAg、HBcAb阳性)44例、小三阳(HBsAg、HBeAb、HBcAb阳性)58例的谷丙转氨酶(ALT)、谷革转氨酶(AST)及总胆红素(T-BIL)浓度及白蛋白/球蛋白(A/C)异常情况.结果大三阳组ALT为(345.72±198.40)u/L,AST为(335.63±169.61)u/L,T-BIL为(78.68±26.78)μmol/L,A/G异常率为59.09%;小三阳组ALT为(155.63±98.53)u/LAST为(161.27±89.50)u/L,T-BIL为(38.68±16.78)μmol/L,A/G异常率为29.31%.两组比较有显著性差异(P＜0.05).结论乙型肝炎的病毒标志物与肝功能损害有关,大三阳病人的肝功损害比小三阳的明显严重.     

丙型肝炎病毒抗体快速诊断试剂的方法学研究

通过将抗原片段用点膜仪固相在硝酸纤维素膜上,依次加入标本、生物素标记的IgG、链霉亲和素-碱性磷酸酶,最后加底物显色,建立一种快速、敏感、实用的丙型肝炎病毒抗体(抗-HCV)检测方法.结果表明,整个检测过程仅需15～25 min,操作简便,已通过"第3代ELISA抗-HCV诊断试剂国家参考品".该方法简便、快速,结果易判断,既有ELISA的特异性和灵敏性,又有金标记法的检测速度;既适合输血筛查实验,又适合临床常规检查.     

丙型肝炎病毒抗体免疫酶快速检测试剂的评价

对丙型肝炎病毒抗体免疫酶快速检测试剂(IEA)检测丙型肝炎病毒抗体(HCV-Ab)的性能、结果等技术参数进行评价,为实验室的选用提供参考.采用IEA法、ELISA法和胶体金法对中国生物制品检定所“第三代ELISAHCV-Ab诊断试剂国家参考品”和3297份血清或血浆标本同时测定,对IEA的敏感性、特异性、重复性和检测时间等结果进行评价.结果表明:IEA可通过中国生物制品检定所“第三代ELISAHCV-Ab诊断试剂国家参考品”检验;与ELISA法比较,IEA的检出率为99.06%,灵敏度与ELISA相当,胶体金的检出率为86.01%,灵敏度比ELISA低;IEA检测所需时间15～25min.IEA既有ELISA的敏感性、特异性,又有胶体金简便、快速的特点.适用于献血员及高危人群中HCV抗体的筛查和临床诊断HCV感染,以及门诊、急诊和基层医疗单位的现场检测.     

乙型肝炎病毒与乙型肝炎疫苗

介绍了乙型肝炎病毒的形态、结构及功能 ,并对乙型肝炎疫苗的制备和使用作了详细的分析     

HCV基因分型在丙肝诊断和治疗中的应用

目的 建立ＨＣＶ基因分型方法,研究ＨＣＶ基因型与肝病程度的关系,探讨ＨＣＶ基因型与ＩＦＮ－ａ２ｂ抗病毒疗效的关系。方法 ＨＣＶ基因组ＮＳ５区ＰＣＲ扩增产物酶切分型。结果 ７３例ＨＣＶ感染者中有ＨＣＶⅡ型４５例,ＨＣＶⅢ型２８例。Ⅱ型ＨＣＶ感性肝炎３１例,肝硬化１４例;Ⅲ型ＨＣＶ感染者中有慢性肝炎２６例,肝硬化２例。Ⅱ型ＨＣＶ感染者的肝硬化发生率显著高于Ⅲ型ＨＣＶ感染者（Ｐ〈０．０５）。所有病人均应     

EGCG棕榈酸酯体外抗HCV作用的研究

为探讨表没食子儿茶素没食子酸棕榈酸酯(EGCG-P)抗丙型肝炎病毒(HCV)的作用,本研究采用cck-8法检测EGCG-P对Huh7.5.1细胞系的毒性作用,丙型肝炎病毒核酸定量检测试剂盒检测HCV滴度,通过实时荧光定量PCR(RT-PCR)选择合适的病毒感染复数(MOI),进而研究药物抗病毒的作用效果。结果:EGCG-P浓度为0~50mg/L时对Huh7.5.1细胞无毒害作用,且抗病毒作用显著;当其浓度为25mg/L时病毒表达量为阳性对照的1/6,可见EGCG-P能高效抑制HCV的增殖。     

丙型肝炎病毒(HCV)截短型E2的原核表达和蛋白纯化

对丙型肝炎病毒(HCV)截短型包膜糖蛋白E2-661基因进行原核表达和纯化.利用PCR法扩增出661 bp的截短型HCV E2区基因片段,并将测序正确的E2-661基因克隆入原核表达载体pET28a中,转化大肠杆菌BL21(DE3),经IPTG诱导表达后,通过SDS-PAGE和Western-blot对表达产物进行分析和鉴定.结果表明目的蛋白分子量约为35 kDa,主要以包涵体形式大量存在.Western-blot结果显示目的蛋白与抗His标签单抗及HCV阳性血清均具有良好的反应原性.并通过镍离子亲和层析方法获得纯化的重组蛋白.以上结果为HCV E2功能的进一步研究奠定了基础.     

Therapeutic applications of bone marrow-derived stem cells in liver transplantation for end-stage liver diseases

Today, liver transplantation (LT) is the only established treatment for end-stage liver diseases. The de- velopment of LT, including OLT, cadaveric LT, split LT, living donor LT (LDLT), brings hopes to patients with these diseases. However, increasing donor shortage, rejection and life-long immunosuppression with its side effects are the major limitations of this therapy strategy. Bone marrow-derived stem cells (BMDSCs) are capable of differentiating into hepatocyte-like cells and contribute to liver injury repair. The microenvironment of liver injury caused by rejection, ischemia/reperfusion, loss of liver mass, recurrence of HCV and \"small-for-size syndrome\" after LT can attract a variety of bone marrow-derived stem cell population to the peripheral circulation and then migration to the injury liver to promote the hepatic function restoration. Additionally, BMDSCs can also take part in the functional regeneration of living donor liver after LDLT. This participation in liver regeneration may be associated to the interac- tion between SDF-1and its receptor CXCR4, involving HGF, IL-8, MMP9, and VEGF/VEGFR-2. BMDSC with its bio-characteristics could maintain the allograft tolerance from different angles and in different ways. In conclusion, BMDSCs transplantation, as a new assistant therapeutic method for LT, will ex- pand the space of LT, and provide more survival opportunities for the patients suffering liver diseases in the future.     

丙型肝炎病毒E2基因在转基因番茄植株中的表达

以T-E1E2为模板扩增得到丙型肝炎病毒包膜蛋白基因E2,构建该基因的植物表达载体p35s-E2．通过农杆菌介导的叶盘法转化番茄子叶．转基因番茄植株叶片总DNA的PCR、Southern blot检测结果表明,E2基因已整合进了转基因番茄植株基因组中;RT-PCR,Western blot分析证实E2基因在转基因番茄植株叶片中表达．     

HCV-RNA与HCV-Ab、ALT、TP相关性研究

探讨丙型肝炎患者体内HCV-RNA、HCV-Ab、ALT和TP间的相互关系。采用ELISA检测708例HCV-Ab阳性的丙型肝炎疑似患者,以RT-PCR检测血清HCV-RNA载量,全自动生化仪定量检测ALT和TP。HCV-Ab表达水平与HCV-RNA载量有关,HCVRNA载量与ALT异常率呈正相关性,但HCV-RNA载量与ALT含量无相关性,与TP含量亦无相关性。708例HCV-Ab阳性患者中男性多于女性,差异无统计学意义(P0.05);40岁以上患者比例多于40岁以下患者比例,差异有统计学意义(P0.05)。HCV-RNA与HCV-Ab、ALT具有一定相关性,丙型肝炎以40岁以上男性患者多见,应引起临床重视。     

西藏地区的主要乙肝病毒基因型C/D杂交型

虽然在西藏高原地区有着大量的乙肝表面抗原阳性的群体，但是目前还未见报道来自这一地区的乙肝病毒（HBV）的DNA序列，因此我们将对26例乙肝表现抗原阳性的藏民血清中分离到的乙肝病毒进行定性研究，为了确定HBV的基因型及它的多基因联系，我们对两个基因部位进行了测序，其中一个包括preS1/preS2/S部位，另一个包括preC/C部位，并基于所处部位的不同而分为两种不同的基因型，为了更明确这一发现，我们又对代表不同组别的HBV基因组进行了测序，结果表明存在于西藏的HBV属于C基因型，而在C基因型中至少存在两种亚群，一为占多数的亚群为C／D杂交型，其血清型为ayw，另一为C基因型，其血清型为adw。本首次报道来自西藏的HBV的全部核苷酸序列，这一结果将有助于全球的关于重组HBV的研究，并促进来自这一地区的HBV的基因型及基因重组的探索。     

Inhibition of Hepatitis C Virus Translation with Synathetic Nucleic Acids-A Molecular Approach to Antiviral Therapy

ＣａｓｅｌｍａｎｎＷ．Ｈ．（Ｄｅｐｔ．ｏｆＧｅｎｅｒａｌＩｎｔｅｒｎａｌＭｅｄｉｃｉｎｅ,ＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙｏｆＢｏｎｎ,Ｓｉｇｍｕｎｄ－Ｆｒｅｎｕｄ－Ｓｔｒａｓｅ２５,Ｄ－５３１０５Ｂｏｎｎ,Ｇｅｒｍａｎｙ）Ｔｈｅｌａｃｋｏｆａｎｅｆｅｃｔｉｖｅ...     

丙型肝炎病毒非结构蛋白NS3/4A的研究进展

丙型肝炎病毒(HCV)非结构蛋白NS3共有631个氨基酸组成,具有丝氨酸蛋白酶、三磷酸核苷酶(NTpase)和螺旋酶(Helicase)的功能,在HCV多聚蛋白的成熟和病毒复制过程中发挥着重要作用.非结构蛋白NS4A,其主要功能就是作为NS3丝氨酸蛋白酶的辅助因子,在HCV多氨酸成熟过程中发挥着不可替代的调节作用.此外,NS3/4A还参与NS5A的超磷酸化修饰过程.     

HCV多表位抗原基因的表达及其在小鼠中诱导的抗体应答研究

丙型肝炎病毒(HCV)是引起病毒性非甲非乙肝炎的主要病原．全世界约有1．7亿HCV的感染者,我国估计占4000万以上．发展有效的丙型肝炎疫苗刻不容缓．构建了3段串联重复的丙型肝炎病毒多表位抗原基因3如,将其克隆到His融合表达载体pET-28b( )上后在大肠杆菌BL21(DE3)中得到了高效表达．3PCX经Ni^2 -NTA—agarose柱纯化后免疫BALB／c小鼠,诱发了高水平的抗体免疫应答．     

HCV不同基因型对慢性丙型肝炎抗病毒治疗疗效的影响

目的探讨干扰素联合利巴韦林治疗慢性丙型肝炎患者临床疗效的相关影响因素.方法对110例慢性丙型肝炎患者进行PEG-IFNα-2a 180μg/周联合RBV 800~1200 mg/d的标准治疗,并完成治疗后24周随访,同时分析HCV基因型、HCV-RNA定量对持续病毒学应答(SVR)的影响.应用罗氏试剂检测丙肝病毒定量,应用反转录-套式聚合酶链反应(PT-PCR)法检测HCV基因型.结果在110例进行标准联合治疗、并完成治疗后24周随访的慢性丙型肝炎患者中,68例患者获得SVR.其中,HCV基因1b型感染者SVR率为51.4%(37/72),HCV基因N-1b型感染者SVR率为81.5%(31/38);基线HCV-RNA水平1.0×10~5IU/m L的患者SVR率为71.2%(42/59),基线HCV-RNA水平≥1.0×10~5IU/m L的患者SVR率为50.9%(26/51).结论非1b基因型SVR率高于1b基因型;基线低病毒RNA水平(血清HCV-RNA水平1.0×10~5IU/m L)SVR率高于基线高病毒RNA水平(血清HCV-RNA水平≥1.0×10~5IU/m L).     

树鼩应用于丙型肝炎病毒相关领域的研究进展

丙型肝炎病毒慢性感染已成为世界范围的公共健康问题,由于缺少合适的丙型肝炎病毒研究模型,所以对丙肝病毒感染机制、生活周期和致病机制的研究进展较为缓慢。树鼩属于低等的灵长类动物,许多生物学特性近似于人类。近年来引起医学生物界和相关管理部门的重视和关注,国内外的学者在树鼩是否可作为丙型肝炎病毒感染的动物模型方面作过十分有益的尝试。本文介绍了国内外树鼩应用于丙型肝炎病毒模型研究的进展情况及应用前景。     

二硫键寡核苷酸Microarray用于丙型肝炎病毒检测及HCV1b分型的研究

利用二硫键法制作寡核苷酸DNA Microarray,并将该技术应用到HCV检测中,建立了一种快速、灵敏、安全的寡核苷酸DNA Microarray丙肝病毒检测体系。该体系还可同时对占中国丙肝病毒75％左右的HCV1b亚型进行分型。另外,在丙肝病毒基因组RNA反转录的过程中采用随机引物,从而为进一步的多种肝炎病毒的寡核苷酸DNA Microarray混合检测奠定了基础。