高活力水稻种子萌发过程中DNA甲基化变化的MSAP分析

DNA甲基化是基因组DNA的一种主要表观遗传修饰形式,是调节基因组功能的重要手段。本实验采用MSAP方法分析,旨在研究高活力水稻种子萌发过程中的甲基化与去甲基化变化的规律,为研究种子的老化机理和种子的长期保存提供依据。结果表明:水稻种子萌发过程中,同时发生了甲基化与去甲基化作用,且去甲基化作用先于甲基化作用发生。发生去甲基化可能与基因活化有关,发生甲基化可能与组织特异性有关。     

长筒石蒜组织培养中器官发生的MSAP分析

采用甲基化敏感扩增多态性技术,从64对MSAP选扩引物中,选出扩增清晰、可辨且可重复的51对MSAP引物组合,扩增获得长筒石蒜种子胚、愈伤组织、苗等3个不同发育时期的DNA胞嘧啶甲基化修饰水平及MSAP扩增图谱。结果表明,种子胚基因组中有68.0%(全甲基化50.2%、半甲基化49.8%)、愈伤组织60.0%(全甲基化52.2%、半甲基化47.8%)、苗64.3%(全甲基化40.8%、半甲基化59.2%)的CCGG/GGCC位点发生胞嘧啶甲基化。3个不同时期甲基化的水平互有差异,依据超甲基化/去甲基化的修饰机理分析,甲基化水平的变化或许导致了长筒石蒜不同的器官发生。     

小鼠Cajal-Retzius细胞DNA甲基化在新皮质发育过程中的改变

对P0、P7、P14、P30小鼠的大脑组织切片进行DNA甲基转移酶1(Dnmt1)、Reelin免疫荧光标记,在荧光显微镜下观察小鼠大脑皮质Cajal-Retzius(CR)细胞中Reelin与Dnmt1阳性细胞分布与密度变化,探讨小鼠大脑新皮质片层化发育过程中CR细胞DNA甲基化的改变以及对新皮质发育的影响.结果表明,Reelin-Dnmt1双标记阳性细胞、Reelin阳性细胞密度随大脑皮质的发育逐渐降低,但是Reelin-Dnmt1双标记阳性细胞占Reelin阳性细胞的比例先升高,并在14d日龄时达到最大值,然后逐渐降低.提示随着大脑皮质的发育,CR细胞DNA甲基化状态发生改变,CR细胞DNA甲基化在神经元的迁移与定位中发挥重要作用.     

组蛋白甲基化修饰在小鼠早期胚胎发育中的建立与调控

 组蛋白修饰作为重要的表观遗传修饰，在调控胚胎基因表达、胚胎细胞的命运决定及胚胎基因组的稳定性等方面均起了很重要的作用。微量测序技术的发展使从全基因组水平上检测植入前胚胎的组蛋白修饰成为可能。综述了近年来利用该技术对小鼠早期胚胎发育过程中的组蛋白甲基化修饰研究的最新进展，总结了在胚胎基因激活及第一次细胞分化过程中组蛋白H3K4me3和H3K27me3修饰不同的建立和动态变化趋势，这些研究为探索胚胎发育和细胞分化的表观调控机制奠定了基础。     

m6A RNA甲基化对神经系统发育及其相关疾病的调控作用

N6-甲基腺苷(m6 A)甲基化是RNA水平转录后的表观遗传学修饰,由RNA甲基转移酶催化腺嘌呤在N6位置发生甲基化的过程,调控RNA稳定性、定位、运输、剪切和翻译,将影响mRNA的命运与转归,进而影响机体结构和功能的改变.新近研究表明m6 A甲基化修饰在神经发育、传导、再生及学习记忆功能等方面发挥重要的作用,并与神经...     

C57小鼠胸腺和睾丸中roPer1基因启动子区CpGs甲基化分析

利用实时定量PCR方法检测胸腺和睾丸组织中roPer1基因表达时相特点,采用亚硫氢酸修饰法对两种组织两个时间点该基因2个启动子区域5个E-boxCpGs甲基化情况进行研究．结果显示：C57BL／6J小鼠胸腺和睾丸组织中mnrl基因表达没有显著波动性,roPer1基因启动子区CpGs呈低甲基化状态（〈10％）．两种组织中E3和E4甲基化频率存在显著差异（P〈0．01）．在睾丸中,不同时间点E3和E4甲基化频率有显著变化（P〈0．01）．说明在睾丸中,roPer1启动子E-box3的甲基化状态能够随时间波动．但在胸腺和睾丸中,甲基化并不是roPer1基因调节的主要方式．     

TET双加氧酶和TDG糖苷酶介导的DNA主动去甲基化

<正>DNA甲基化是表观遗传修饰的一种重要方式。哺乳动物中DNA甲基化主要发生在Cp G双核苷酸中胞嘧啶的五位碳原子上,可以引起染色质结构和基因活性的改变,在基因印迹、X染色体失活、发育调控以及转座子沉默和基因组稳定性的维持等方面发挥重要作用。有人把基因组甲基化比作细胞的记忆,当分化成生殖细胞和精卵结合产生下一代时就要抹去"前世"的记忆,涅槃重生。这么比喻是由于在哺乳动物中,基因组甲基化水平随着个体发育和繁殖呈现周期性的变化,其     

低氧与表观遗传学互作的研究进展

表观遗传学是指基因组DNA序列不发生改变的情况下,基因表达水平发生变化从而导致的可遗传表型变化的现象.表观遗传可通过与低氧诱导因子(HIF)家族协同作用,以促使细胞适应低氧环境,从而参与到低氧应答的调控过程中.现就表观遗传学通过以下四个方面与低氧应答进行综述:1)VHL与PDH3调控HIF稳定性;2)通过影响HIF-1α共激活复合物的活性、HRE位点的修饰、HIF结合位点或附近区域的染色质活性,阻止HIF与HRE位点结合;3)组蛋白脱甲基酶对低氧应答相关基因的转录调控;4)低氧环境引起细胞内整体的组蛋白修饰程度和DNA甲基化水平改变.     

DNA甲基化在肿瘤形成中的作用（综述）

DNA甲基化改变是肿瘤细胞中常见的现象,DNA甲基化与肿瘤的发生有密切关系。从以下几方面对此做一综述。（1）简介哺乳动物细胞的DNA甲基化;（2）DNA甲基化与肿瘤基因突变;（3）肿瘤DNA甲基化的基因外作用,其中包括：原癌基因的低甲基化和抑癌基因的高甲基化。     

内毒素诱导急性肺损伤小鼠支气管肺泡灌洗液中谷氨酸含量变化的初步研究

目的 观察LPS诱导急性肺损伤时肺内是否存在谷氨酸（Glu）的释放.方法 腹腔注射内毒素制备小鼠急性肺损伤模型,于6h后采用生理盐水行支气管肺泡灌洗,用高效液相色谱法测量灌洗液中氨基酸的浓度.结果 与生理盐水对照组相比,LPS处理组支气管肺泡灌洗液中Glu的浓度增高（P〈0.01）;苏氨酸、蛋氨酸及精氨酸的浓度降低（P〈0.05）,其它氨基酸浓度无显著性变化.结论 在LPS诱导的肺损伤过程中肺组织中部分氨基酸代谢发生显著变化,肺内谷氨酸的释放增多,进一步提示Glu参与了内毒素诱导的肺损伤的病理生理过程.     

Genomic imprinting determines methylation of parental alleles in transgenic mice

Mouse embryogenesis relies on the presence of both the maternal and the paternal genome for development to term. It has been proposed that specific modifications are imprinted onto the chromosomes during gametogenesis; these modifications are stably propagated, and their expression results in distinct and complementary contributions of the two parental genomes to the development of the embryo and the extraembryonic membranes. Genetic data further suggest that a substantial proportion of the genome could be subject to chromosomal imprinting, the molecular nature of which is unknown. We used random DNA insertions in transgenic mice to probe the genome for modified regions. The DNA methylation patterns of transgenic alleles were compared after transmission from mother or father in seven mouse strains carrying autosomal insertions of the same transgenic marker. One of these loci showed a clear difference in DNA methylation specific for its parental origin, with the paternally inherited copy being relatively undermethylated. This difference was observed in embryos on day 10 of gestation, but not in their extraembryonic membranes. Moreover, the methylation pattern was faithfully reversed upon each germline transmission to the opposite sex. Our findings provide evidence for heritable molecular differences between maternally and paternally derived alleles on mouse chromosomes.     

普通（一级）动物肺脏自发感染病理观察

用两个亚慢性动物试验（６４ｄ,９０ｄ）对照全的７４只Ｗｉｓｔａｒ大鼠肺脏进行病理组织学检查,发现其对环境的应激反应表现为肺内各级呼吸组织的炎症,病变较为明显的是支气管旁淋巴组织套袖样围管浸润,并浸润支气管粘膜上皮细胞,两组动物的发生率分别为８５．７１％,９２．３１％,同时肺内血管周围炎细胞浸润,肺泡隔增厚,肺内可见点状,片状炎细胞浸润灶,随着试验周期的延长,病变发生率有升高的趋势。     

Retrovirus-induced de novo methylation of flanking host sequences correlates with gene inactivity

The pattern of DNA methylation changes during development of eukaryotes, and hypomethylation frequently correlates with gene expression (for reviews see refs 1-4). A causal relationship between hypermethylation and gene inactivity has been established for retroviral genomes which are methylated de novo when inserted into the germ line of mice (ref. 5; for review, see ref. 6). The mutual interaction of the provirus with the host genome can influence virus expression and can result in inactivation of the host gene by insertional mutagenesis. We report here that the insertion of a provirus can change the methylation pattern of the host DNA. Sequences flanking the provirus become methylated de novo within 1 kilobase (kb) of the integration site. In Mov-13 mice, which carry a lethal mutation of the alpha 1(I) collagen gene, de novo methylation of host DNA is associated with a change in chromatin conformation. This suggests that virus-induced DNA methylation can alter DNA-protein interactions and thereby interfere with correct gene activation during embryonic development.     

MSAP在水稻害虫白背飞虱中的应用研究

甲基化敏感的扩增多态性分析方法 (MSAP)是在扩增片段长度多态性技术基础上建立起来的主要用来检测样品基因组DNA甲基化情况的一种方法,特别适用于全基因组范围内检测CCGG位点的胞嘧啶甲基化情况,在高等动物和许多植物上已广泛应用,但尚未有在昆虫中应用该方法的报道。从DNA提取、酶切基因组DNA用量、酶切和接头连接时间、电泳图谱显影方法等方面对MSAP方法进行了改进,并在水稻重要害虫白背飞虱上得到成功应用。这为将来在其它昆虫中使用该方法研究基因组DNA甲基化情况提供了一定借鉴和指导价值。且通过比较白背飞虱雌雄性别间和长短翅型间的MSAP图谱,发现雌雄性别间和长短翅型间的基因组DNA甲基化式样都存在明显的差异,说明DNA甲基化可能参与了性别和翅型分化的调节。     

癌症与DNA甲基化异常

DNA甲基化是哺乳动物基因组最常见的修饰方式,它存在于生物体正常的生理过程,DNA异常甲基化和疾病的发生发展有关.该文综述了癌症中存在着的DNA的异常甲基化现象,即抑癌基因的高度甲基化,低表达,及癌基因的低甲基化,高表达,检测这些基因的甲基化状态可以为癌症的早期诊断及治疗提供参考依据.     

封闭群东方田鼠的病理生物学特征观察

在野生动物进行实验动物化过程中 ,制定微生物控制的标准 ,可以采用两种方法 :(一 )从野生动物的各种器官组织 ,对各类病原体进行逐一分离 ,制定微生物控制的标准 ;(二 )先对野生动物进行病理学检查 ,全面了解在正常饲养繁殖条件下 ,动物各器官以及各种生理状态下它们的病理变化 ,根据病理变化的特点 ,筛选病原体。采用第一种方法 ,较盲目 ,费时。用第二种方法 ,一方面可以了解动物的病理生物学特点 ,积累基本的生物学数据 ;另一方面 ,可以根据病变的程度与特点 ,估计和预测可能的病原体的种类 ,达到筛选病原体的目的。通过对封闭繁殖的东方…     

糖尿病大鼠肾、胰基因组DNA甲基化状态的变化

从正常大鼠，糖尿病大鼠，中药糖微康治疗的糖尿病大鼠，西药开搏通治疗的糖尿病大鼠的肾，胰等组织中提取出其基因组DNA，应用对DNA甲基化作用敏感的限制性核酸内切酶HpaⅡ和MspⅠ（为一组同裂酶（进行了限制性酶切图谱分析，结果表明，DNA化作用的主要位点在CpG二核苷酸处，且“糖微康”在关闭患糖尿病后肾组织中被异常活化的基因的同时，还能活化糖尿病动物胰组织中处于静息状态的基因，由此可见糖尿病的发病和治疗都与DNA甲基化作用密切相关。     

Maternal inhibition of hepatitis B surface antigen gene expression in transgenic mice correlates with de novo methylation

Differential modifications of the genome during gametogenesis result in a functional difference between the paternal and maternal genomes at the moment of fertilization. A possible cause of this imprinting is the methylation of DNA. The insertion of foreign DNA into transgenic mice allows the tagging of regions that are differentially methylated during gametogenesis. We describe here a transgenic mouse strain in which the expression of the hepatitis B surface antigen gene is irreversibly repressed following its passage through the female germ line. This inhibition is accompanied by the methylation of all the HpaII and HhaI sites within the foreign gene, which we have shown to be integrated into a site on chromosome 13. The irreversibility reported here contrasts with what is found with other transgenic mice sequences which are reversibly methylated after passage through the male or female germ line, though in both cases methylation appears to be important in the imprinting process.