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相似文献
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1.
丝素包埋SPA成膜的理化性能和生物效应研究   总被引:1,自引:0,他引:1  
研究将丝素溶液包埋金黄色葡萄球菌A蛋白(staphylococcal protein A)(简称A蛋白或SPA ),制成不溶性SPA丝素膜.用粘附生长因子RGD(序列为GLY-ARG-GLY-ASP-SER-PRO-L YS)的抗体IgG结合IgG到该丝素膜的表面,再将RGD结合到不溶性SPA丝素膜表面RGD抗体IgG 上,制备成RGD-IgG-SPA丝素膜.用酶联免疫吸附试验(简称ELISA)方法,证明RGD-IgG -SPA丝素膜是稳定的.种植培养血管内皮细胞(vascular endothelial cell,简称EC细胞) 于该改性丝素膜的表面,用四甲基偶氮唑盐比色方法(简称MTT法)检测细胞的生长,证明改性丝素膜能有效地促进EC细胞的生长.  相似文献   

2.
制备并纯化小鼠腹水IgG,鉴定IgG纯度;免疫新西兰大白兔制备兔抗小鼠IgG的抗血清并纯化血清IgG;用改良过碘酸钠法制备兔抗小鼠IgG酶标抗体,对其进行鉴定,并与市场上的同类产品对比。结果,纯化的小鼠腹水IgG,其纯度约为80%—90%;免疫新西兰大白兔所制备的抗血清免疫双扩散效价在1:32以上;用改良过碘酸钠法制备酶标兔抗小鼠IgG酶标结合物与市场同类产品相比质量优良,特异性较强,亲和力较好,并在较长时间内效价稳定。结果表明,制备的小鼠IgG抗血清和酶标抗体,适合于小鼠的血清学检测体系的建立。  相似文献   

3.
蛋白A是金葡菌中一种重要的致病因子,有较强结合多种哺乳动物的IgG的能力,因此降低机体产生特异性SPA抗体的水平,使金葡菌具免疫逃逸功能.研究一种与IgG亲和力较弱的蛋白A衍生物,对金葡菌疫苗的开发具重要意义.研究表明,蛋白A的Z结构域中位于第13、14位的Phe,Tyr是两个与IgG结合的关键位点.本文首次通过PCR突变技术,将这两个关键氨基酸均改造为Gly,构建突变体ZFY.Discovery Studio3.5受体-配体相互作用力模块分析显示,突变体ZFY与IgG结合力降低到-61.68kcal/mol,仅为原相互作用力的10.69%;构建得到ZFY蛋白,经ITC测定,ZFY与兔IgG的亲和常数降低到1.2×104 M-1,仅为原亲和常数的0.39%,证明了ZFY是一种与IgG亲和力较弱的蛋白A衍生物,为实现新型蛋白A疫苗治疗金葡菌感染奠定基础.  相似文献   

4.
野亚麻蝇幼虫凝集素的测定结果表明:它对人的A、B、O、AB血型红细胞,以及兔、豚鼠、大鼠、小鼠、鸽子的红细胞有凝集作用,其中对豚鼠红细胞凝集活性最高;但对牛、绵羊、鸡、鸭、龟、蛙、鳝鱼、鲤鱼、泥鳅的红细胞无凝集作用。对小鼠淋巴细胞凝集作用的浓度为18.75μg/ml,而对大鼠淋巴细胞凝集浓度则为150μg/ml,对牛的淋巴细胞无凝集活性。对肿瘤细胞的凝集作用很不相同,可凝集小鼠的S180、SP2/0、u14、LⅡ细胞,但不能凝集小鼠艾氏细胞,大鼠W256细胞、人Hela细胞和MGC80—3胃癌细胞。该凝集素对兔红细胞的凝集作用可被D—半乳糖,N—乙酰氨基半乳糖抑制。  相似文献   

5.
比较免疫磁珠法与A蛋白亲和层析法纯化兔抗血清中的IgG   总被引:1,自引:0,他引:1  
优化了免疫磁珠分离法纯化抗血清的实验条件,并与A蛋白亲和层析法比较纯化效果,以求得到一种简便、快速、高效的纯化IgG方法.结果表明:从5只新西兰兔获得210 mL试管凝集效价高达1∶5 120的兔抗鳗弧菌抗血清,磁珠与IgG结合10 min达到平衡,其最大结合量为0.227 mg/mL;免疫磁珠分离法与A蛋白亲和层析法...  相似文献   

6.
用小鼠IgG纯品免疫新西兰大白兔,获得兔抗小鼠IgG多克隆抗体.以兔抗小鼠lgG多抗包被聚苯乙烯微孔板.配以辣根过氧化物酶标记的山羊抗小鼠IgG抗体和以3,3'5,5-四甲基联苯胺(TMB)为底物,建立了快速测定McAb培养上清中鼠源IgG的双抗体夹心ELISA方法.该方法的检测线性范围是7.02ng/mL至449.38ng/mL之间,回收率在94.83%-115.15%之间,变异系数在1.45%-9.94%之间.显然用该方法测定MeAb培养上清中鼠源IgG质量浓度是可行的.  相似文献   

7.
本文介绍了以亲和层析纯化的免抗鼠IgG类抗体及其酶标物作为捕获及检测抗体进行鼠杂交瘤培养上清及腹水中IgG类单克隆抗体的ELISA定量测定方法。结果表明:小牛血清(BS)、免血清(RS)、马血滑(HS)、人血清(HuS)及非抗体产生细胞的培养上清对本项εLISA实验无干扰,使测定的结果较可靠,测定的鼠IgG各亚类的标准曲线的线性范围均在5~100ng/ml之间,因此这个快速、可靠的方法可为鼠IgG类单克隆抗体的定量测定提供一种实用的手段。  相似文献   

8.
来源于金黄色葡萄球菌(Staphlococcus aureus)细胞壁的A蛋白(Staph ptotein A,简作SpA)能与各种抗体球蛋白G(IgG)的Fc区相结合,且不减弱抗体抗原的结合。V.Ghetie等人认为SpA是作为多价交联剂作用于IgG受体的。Jrgen Sjahl曾用胰蛋白酶(Trypsin,TR)和溶金黄色葡萄球菌酶(Lysostaphin,Ls)两种酶水解A蛋白,测  相似文献   

9.
金黄色葡萄球菌A蛋白(Staphylococcal Protein A,简称SPA)能特异地结合许多高等动物和人的免疫球蛋白,因此常作为第二抗体应用在免疫化学研究及临床免疫学上。由于SPA是菌壁蛋白,分离高纯度的样品难度较大。本文采用金黄色葡萄球菌Cowan Ⅰ菌株为实验材料,比较了几种制备SPA粗品的方法,并以亲和层析及制备电泳方法提纯SPA,获得电泳单点纯的样品。  相似文献   

10.
本研究以长白猪(Landrace)肺cDNA为模板,扩增获得猪骨形态发生蛋白BMP-2和BMP-3基因的cDNA全长.BMP-2基因cDNA全长为1742bp,编码395个氨基酸的前体蛋白,与人、牛、绵羊、大鼠、小鼠等的BMP-2基因的氨基酸序列一致性分别94.18%,95.4%,95.2%,90.3%,90.60%;BMP-3基因cDNA全长为1639bp,编码475个氨基酸的前体蛋白,猪与人、牛、绵羊、大鼠、小鼠等的BMP-3氨基酸序列的一致性分别是84.7%、87.7%、82.3%、80.4%、79.5%.采用RT-PCR方法,对BMP-2、3基因在家猪主要组织的表达进行探究.结果显示:BMP-2在所有组织中均有表达;而BMP-3在脑、肺、小肠中表达量较高,其他组织中表达量弱.  相似文献   

11.
饥饿对黄鳝性腺发育及血清褪黑激素水平的影响   总被引:7,自引:0,他引:7  
研究了饥饿对黄鳝对性腺发育的影响,并试图与血清中褪黑激素水平的变化相联系,实验结果表明,6周饥饿促进黄鳝性转变,6周和1周饥饿皆导致血清褪黑激素水平的午夜值明显高对照组(P〈0.05和P〈0.001),由此推论,饥饿促进黄鲜性转变可能是通过提高血清褪黑激素水平实现的。  相似文献   

12.
褪黑激素在黄鳝体内分布与生殖季节性变化   总被引:2,自引:0,他引:2  
选用处于不同性腺发育阶段的黄鳝,采用放射免疫技术测定了脑、眼、小肠、肝、肾、脾、心、皮肤和肌肉等组织以及血清中褪黑激素的含量.结果表明,褪黑激素在黄鳝体内的多数组织中存在(皮肤和肌肉除外),其含量顺序为:眼>全脑>血清>肝>小肠>肾>脾>心.黄鳝脑内,以下丘脑和垂体的褪黑激素水平最高,嗅叶、视盖与小脑居中,端脑及延髓最低.黄鳝体内各组织中褪黑激素水平皆显示出生殖季节性变化  相似文献   

13.
DNA样品检测结果表明:彭泽鲫基因组DNA的平均产率为735,洞庭青鲫基因组DNA的平均产率为447.1;从80个随机引物中筛选出5个引物对彭泽鲫和洞庭青鲫两个群体进行了RAPD分析.结果发现彭泽鲫群体多态位百分率为57.5%,群体内遗传相似度和遗传距离分别为0.850和0.150;洞庭青鲫群体多态位点百分率为56.65%,遗传相似度和遗传距离分别为0.927和0.073;两群体间相似率和遗传距离分别为0.811和0.189.这表明洞庭青鲫群体具有较低的遗传多样性,彭泽鲫群体内的遗传多样性相对较高,但洞庭青鲫与彭泽鲫两群体间存在遗传差异.  相似文献   

14.
刘可春  王霁 《山东科学》1990,3(2):27-31
在紫露草的根、茎、叶、花中都检测到凝集素,凝集素对酸、碱、热不稳定,能凝集人的A、B、O型血球及兔和小白鼠的红血球。D—半乳糖、N—乙酰氨基半乳糖和D—岩藻糖能抑制其凝集活性。  相似文献   

15.
重金属铅对实验红鲫生理生化指标影响的研究   总被引:1,自引:0,他引:1  
为了检测重金属铅离子对实验红鲫的生物毒性效应,以实验红鲫为受试鱼类,观察实验红鲫在不同浓度重金属铅溶液中的生长情况、死亡率、异常状态以及血红细胞微核和核异常情况,并检测血液中乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)的变化情况指标,分析不同浓度的铅对实验红鲫生理状态的影响。结果发现与空白对照组相比,实验红鲫在安全浓度范围内未出现死亡,生长状态良好,随着重金属铅浓度的不断增加,核异常率明显发生变化,血液中的乳酸脱氢酶也有明显的变化。  相似文献   

16.
通过对复合鲫血细胞DNA含量的测定,探讨了其倍性和产生机制等方面的问题.结果显示,复合鲫的DNA含量明显多于母本种彭泽鲫的DNA含量,且所测14尾中多数个体的DNA含量超过或接近四倍体的DNA含量,少数个体的DNA含量介于三倍体和四倍体之间.推测多数复合鲫个体为复合四倍体异育彭泽鲫,其染色体组包含母本彭泽鲫的全套染色体和父本单倍染色体组所产生的子代,少数个体可能为非整倍体.  相似文献   

17.
18.
用钙离子选择电极和分光光度法研究了鲫鱼后鳃体对大白鼠血钙的影响。注射鲫鱼后鳃体匀浆2小时后引起大白鼠血钙显著降低,证明鲫鱼后鳃体对哺乳动物有降钙作用。实验表明,鲫鱼后鳃体引起的这种降钙效应,完全是离子化钙的降低。  相似文献   

19.
复合四倍体彭泽鲫是在尖鳍鲤精子刺激的彭泽鲫雌核发育子代中发现的少数特殊个体.本文分别用母本种彭泽鲫和父本种尖鳍鲤的精子与复合四倍体彭泽鲫的卵子受精,得到两种胚胎FP和FS.采用聚丙烯酰胺凝胶垂直板电泳技术对两种胚胎10个时期的5种同工酶(LDH、MDH、ME、SOD和EST)进行比较分析.结果表明:两种胚胎的5种同工酶表型在谱带上完全一致,不同来源的精子对胚胎的同工酶表型没有影响.表明复合四倍体彭泽鲫可能继承了母本种的雌核发育生殖方式.  相似文献   

20.
应用松果腺细胞改良染色法,证实了黄鳝脑部存在松果腺复合体,光镜及电镜切片的研究结果表明,黄鳝松果腺复合体由终囊,松果体柄和背囊三部分组成;  相似文献   

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