JAL1杂交瘤细胞的批量培养研究

研究了不同葡萄糖、谷氨酰胺浓度下JAL1细胞的生长、糖耗、乳酸及氨的生成、单抗合成等代谢过程及该株细胞的基本代谢规律，同时对该株细胞生长和单抗生产的动力学方面进行了研究，在细胞培养箱中，采用方瓶批量培养杂交瘤细胞，培养条件为pH7.0-7.5，温度37℃，5％CO2。实验表明，在不同浓度葡萄糖、谷氨酰胺的培养液中，细胞的活性细胞密度、总细胞密度、细胞活性上均有不同，相应地，对细胞的最大比生长速率、葡萄糖最大比消耗速率、乳酸最大比生成速率以及单抗最大比合成速率也有不同程度的影响。实验结果还表明，该株细胞的单抗分泌是属于负生长耦联型的。     

搅拌转速对Bacillus subtilis分批发酵碱性果胶裂解酶的影响

在5L小型发酵罐上，考察了不同搅拌转速对细胞生长和碱性果胶裂解酶生产的影响。根据细胞生物量、酶活水平、比细胞生长速率和比产物合成速率的变化情况，提出了两阶段搅拌转速控制策略：0～5h搅拌转速500r／min;5h后搅拌转速600r／min。PGL和PIVIGL酶活分别提高5．3％和15．1％；FGL和PMGL最大平均比生成速率分别提高15．9％和23．1％。     

巴戟天细胞悬浮培养生产蒽醌类物质的研究

巴戟天细胞在含NAA0．25mg／L，Kt0．025mg／t,的B5培养基中进行悬浮培养，细胞比生长速率为0．140天^-1，倍增时问为118．8小时，蒽醌含量可达151．27mg／L，为细胞干重的0．81％。巴戟天细胞中蒽醌含量是巴戟天根的2．17倍，蒽醌的比生产速率是巴戟天根的79．3倍。在固体培养愈伤组织中其蒽醌含量和比产率则分别是巴戟天根的6．1倍和209倍。     

人胚肺细胞系(MU-L1)生物学特性研究

目的：对新建人胚肺细胞系(MU-L1)的生物学特性进行评价，以期建立可用于疫苗生产的人二倍体细胞株.方法：使用不同培养基及血清、不同血清浓度和传代比例培养MU-L1细胞，通过细胞形态、增殖速率和生长动力学等进行比较分析，筛选出较适宜的培养条件，用适宜的培养条件连续培养细胞至生命周期结束.传代过程中检查无菌、支原体和外源病毒因子，并进行染色体核型分析.结果：在常用培养基(MEM、DMEM、M199、DME/F12和PRMI1640)、胎牛血清和新生牛血清中MU-L1细胞均良好生长；按1∶4传代比例，使用含10%新生牛血清的MEM培养基培养，可培养至67代(世代),在生命周期的不同阶段经液氮冻存，复苏活率在91.56%～98.92%,生长良好.染色体核型为正常人二倍体核型，2n=46,无菌、支原体和外源病毒因子检查均为阴性.结论：MU-L1为正常人二倍体细胞系，具备作为病毒性疫苗基质进一步研究和生产应用的价值.     

葡萄糖和谷氨酰胺浓度对杂交瘤细胞生长代谢的影响

在生物反应器的批培养过程中考察了葡萄糖及谷氨酰胺浓度对杂交瘤细胞生长及代谢的影响。当葡萄糖浓度降至1～4mmol／L，谷氨酰胺浓度降至0．4～2mmol／L时，细胞生长并未受到明显影响，但细胞代谢途径发生转换，乳酸及氨的生成显著减少。葡萄糖和谷氨酰胺浓度的比例对杂交瘤细胞的生长及代谢也有影响，葡萄糖相对较多时，其细胞得率小，乳酸得率大；而当谷氨酰胺相对较多时，其细胞得率小，氨得率大。实验结果表明谷氨酰胺与葡萄糖的能量代谢在某种程度上可进行相互补充。     

红豆杉细胞悬浮培养及动力学研究

对红豆杉细胞在５Ｌ通气机械搅拌式反应器中的培养过程及动力学进行了研究．经２４ｄ培养，细胞生物量增加３倍，紫杉醇含量可达细胞干重的１．０３５×１０－３．建立了描述细胞生长过程的模型，采用分段多项式函数逼近关联ｕ与ｕｍ的函数Ｆ（ｓ），建立了描述产物合成的动力学方程，采用多项式函数逼近关联产物合成速率与细胞生长速率的函数，确定了部分动力学参数     

微好氧条件下好氧颗粒污泥的培养

在微好氧条件下(曝气槽中溶解氧量在0．2～0．7mg／L之间)对好氧颗粒污泥的培养进行了研究．以厌氧颗粒污泥为接种污泥，考察了培养过程中厌氧污泥外观、尺寸、反应器中絮状污泥的MLSS(混合固体悬浮物)、SV(污泥体积)、SVI(污泥体积指数)和VSS(挥发性固体悬浮物)，以及颗粒化污泥体积的变化．发现培养5d后，厌氧颗粒污泥完全解体，培养10d后出现新的颗粒污泥，培养40d后污泥完全颗粒化．培养成熟的颗粒污泥呈浅褐色，粒径主要集中于500～3000μm之间，SVI达18．147mL／g，比重达1．020g／cm^3，含水率(质量分数)达95．7％，有机组分的质量分数达74．1％，沉降速率达52m／h，各项指标均优于普通活性污泥和常规曝气条件下培养的好氧颗粒污泥．     

谷氨酰胺限制对rCHO细胞生长和代谢的影响

考察了rCHO细胞(Ch inese ham ster ovary,中国仓鼠卵巢细胞)在批培养和谷氨酰胺限制流加培养过程中的生长、代谢特性。实验发现随着谷氨酰胺浓度的下降,谷氨酰胺的比消耗速率以及氨和丙氨酸的比生成速率显著下降。与批培养相比,在谷氨酰胺限制流加培养过程中,培养时间延长,活细胞密度增加,达到2.4×106cells/mL;谷氨酰胺的代谢途径发生改变,代谢副产物生成明显减少,YAmm/G ln由1.04 mm o l/mm o l略微下降到0.92 mm o l/mm o l,YA la/G ln由0.35 mm o l/mm o l下降到0.08 mm o l/mm o l,YX/G ln由0.383×109cells/mm o l增加至0.504×109cells/mm o l,YAmm/X由2.59×1-0 9mm o l/cell下降到1.85×1-0 9mm o l/cell,表明谷氨酰胺代谢的能量利用率显著提高,也证明其参与细胞合成代谢的分率增加。     

姜黄素促进紫杉醇抑制肿瘤细胞的增殖

培养的人喉癌细胞 Hep‐2及肝癌细胞HepG‐2,分别用不同浓度姜黄素（CUR ,0～50μmol／L）和紫杉醇（PTX ,0～5 nmol／L ）单独处理或联合处理（5μmol／L CUR＋0．5 nmol／L PTX、10μmol／L CUR＋0．5 nmol／L PTX）．处理48 h后,用WST‐1细胞增殖试剂盒检测细胞增殖情况,再用结晶紫染色检测活细胞的密度,最后用Hoechst 33258凋亡染色试剂盒检测细胞凋亡情况．结果显示：姜黄素或紫杉醇单独处理对 Hep‐2细胞和 H epG‐2细胞的增殖均有抑制作用,并呈现出一定剂量效应关系;姜黄素与紫杉醇联合处理后细胞的增殖速率要比紫杉醇单独处理的明显降低;同时,姜黄素与紫杉醇联合处理后细胞的凋亡要比紫杉醇单独处理的更为明显．上述研究结果说明,姜黄素对紫杉醇抑制肿瘤细胞H ep‐2和H epG‐2的增殖有促进作用,并能促进紫杉醇诱导细胞的凋亡．     

悬浮培养型 BHK -21 细胞的生长规律和不同接种密度培养效果的研究

为探索悬浮培养型BHK-21细胞的生长规律和最佳接种密度,以3．0×10^5个／mL、4．0×10^5个／mL、5．0×10^5个／mL、6．0×10^5个/mL和7．0×10^5个／mL等5个接种密度培养了悬浮培养型BHK-21细胞,绘制了细胞生长曲线和活力变化曲线．结果显示,悬浮培养型BHK-21细胞生长曲线呈“S”型,接种培养前24h细胞处于适应期,生长曲线上密度增长不大,期后细胞进入对数增长期,生长密度呈指数增长．以3．0×10^5个／mL和4．0×10^5个／mL接种培养的在120h达到最大增殖密度,分别为4．65×100个／mL和5．59×10^6个／mL,倍增时间分别为26．9h和26．7h;以5．0×10^6个／mL、6．0×10^6个/mL和7．0×10^6个／mL接种培养的在96h就达到最大增殖密度,分别为5．14×10^6个／mL、5．36×10^6个／mL和5．1×10^6个／mL,倍增时间分别为22．4h、24．1h和25．2h．各组在培养的96h以前细胞活力均在90％以上且变化较小,120h和144h时细胞活力开始下降,且接种密度越高活力下降越快．该细胞以4．0×10^5个／mL、5．0×10^5个／mL、6．0×10^5个／mL接种培养能达到较高培养密度,细胞生长快,且细胞峰值持续时间长．     

长阻抗管过渡过程对于测量声学参数的影响研究

提出了用单传声器以扫频获得传递函数来精确测量长阻抗管末端试件声学参数的测量方法．用正弦信号代替随机信号作为测试信号，可以显的提高测量精度．但是对于长阻抗管，因为过渡过程时间较长，所以要消除过渡过程的不利影响．首先从理论上证明了冲击响应与扫频测量过渡过程时间之间的关系，接着提出根据冲击响应用施罗德积分来计算过渡过程时间的方法，然后从理论上分析了过渡过程时间与试件声学参数之间的关系，最后对多种试件进行测试，确定了过渡过程时间同声学参数之间的定量关系．理论分析和实验结果都表明，长阻抗管过渡过程时间随着试件吸声系数的增加而减小．为了保证测量精度，需要合理设定测量系统的延迟时间，以避免过渡过程的不利影响。     

用有限元法解决平板壳元问题

介绍了解决壳体问题最简单有效的方法就是把它转化成二维单元再进行计算,运用有限元法对单元壳体进行分析,通过对单元壳体的多次组合最终解决平板壳体问题,在计算壳体问题时能够发挥相当重要的作用.     

Hydrogen Production with High Evolution Rate and High Yield by Immobilized Cells of Hydrogen-producing Bacteria Strain B49 in a Column Reactor

To improve the hydrogen evolution rate in continuous hydrogen production of a novel fermentative hydrogen-producing bacteria strain B49 (AF481148 in EMBL), 4 % immobilized cells by polyvinyl alcohol-boric acid method, with the addition of a small amount of calcium alginate in a column reactor obtain hydrogen yield of 2.31 mol H2/mol glucose and hydrogen evolution rate of 1435.4 ml/L culture*h respectively at medium retention time of 2.0 h with a medium containing 10g glucose/L. Moreover, as the cell density in gel beads is increased to 8%, hydrogen yield and hydrogen evolution rate for 10g glucose/L are 2.34 mol H2/mol glucose and 2912.4 ml/L culture*h respectively at medium retention time of 1.0 h, and for molasses wastewater COD of 7505.9 mg/L hydrogen production potential of 205.6 ml/g COD and hydrogen evolution rate of 2057.7 ml/L culture*h at hydraulic retention time of 0.75 h are observed. In the continuous culture pH value keeps around 3.9 by self-regulating.     

用开路电压衰减法测量p-n结太阳电池少子寿命的若干问题

本文根据p-n结电容放电理论为采用开路电压衰减法测量太阳电池异常少子寿命提出修正计算公式,分析指出,电池光致注入与电致注入少于寿命不同是由于p-n结基区少于寿命中的有效分量不同造成的。此外,还讨论了电致注入少子寿命测量技术。     

Transgenic plant aequorin reports the effects of touch and cold-shock and elicitors on cytoplasmic calcium

Methods for measuring plant cytoplasmic calcium using microelectrodes or microinjected fluorescent dyes are associated with extensive technical problems, so measurements have been limited to single or small groups of cells in tissue strips or protoplasts. Aequorin is a calcium-sensitive luminescent protein from the coelenterate Aequorea victoria (A. forskalea) which is formed from apoaequorin, a polypeptide of relative molecular mass approximately 22,000, and coelenterazine, a hydrophobic luminophore. Microinjected aequorin has been widely used for intracellular calcium measurement in animal cells, but its use in plants has been limited to exceptionally large cells. We show here that aequorin can be reconstituted in transformed plants and that it reports calcium changes induced by touch, cold-shock and fungal elicitors. Reconstituted aequorin is cytoplasmic and nonperturbing; measurements can be made on whole plants and a calcium indicator can be constituted in every viable cell. Now that apoaequorin can be targeted to specific organelles, cells and tissues, with the range of coelenterazines with differing calcium sensitivities and properties available, this new method could be valuable for determining the role of calcium in intracellular signalling processes in plants.     

高精度平面光栅尺测量系统减振技术研究

高精度平面光栅尺测量系统的测量精度直接影响浸没光刻机硅片台的定位精度和稳定时间.考虑到安装在平面光栅尺载体上的平面光栅尺因其载体固有频率较低,易受到主基板残余振动和高速硅片台气压扰动而产生振动,因此研究平面光栅尺载体的减振技术意义重大.文中阐述了一种新型平面光栅尺载体减振方法,围绕热解耦技术和粘滞阻尼吸振技术,进行理论建模、仿真分析和测试评价.结果表明粘滞阻尼器和柔性结构并联系统可以显著改善平面光栅尺载体结构动态特性,提升平面光栅尺测量系统的测量精度及缩短硅片台的稳定时间.      

人胎儿骨髓间充质干细胞的分离及生物学鉴定

通过原代细胞培养,从引产胎儿骨髓组织中分离干细胞,然后进行生物学鉴定,旨在体外建立培养胎儿骨髓干细胞的有效方法,为进一步研究干细胞奠定基础．本研究对四个月的引产胎儿骨髓组织进行原代细胞培养,采用贴壁筛选法,在含有15％胎牛血清的L-DMEM／IMDM(1:1)混和培养液中培养,7 d后细胞可长满瓶底．显微镜下观察,细胞形态均一,呈长梭形．传代后,在8代以内的细胞贴壁能力较强,生长速度较快．将其命名为BMMS-03．在第3代时,对培养的细胞进行了于细胞标志物的生物学鉴定,采用流式细胞仪对经免疫荧光染色的细胞进行检测．结果显示:97．2％的细胞呈CD105阳性反应,66．0％的细胞呈CD106阳性反应, 9．2％的细胞呈CD34阳性反应．阴性对照组阳性反应为0．5％．生物学鉴定的初步结果提示,从胎儿骨髓组织中分离培养成功的细胞为骨髓间充质干细胞,其细胞形态学特征、CD105 、CD106 和CD34-的检测结果均符合间充质干细胞的特征．本研究成功地建立了体外培养胎儿骨髓间充质干细胞的有效方法,所获得的间充质干细胞纯度较高,增殖较快,适用于干细胞生物学和组织工程学的研究．     

碱性成纤维细胞生长因子对骨髓基质细胞的生物学效应

目的探讨碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)对骨髓基质细胞(BMSC)粘附、增殖和分化等生物学效应的影响.方法利用体视学计数、MTT法及ALP试剂盒分别测定不同浓度bFGF诱导一定时间后BMSG的粘附特性、增殖和分化情况的变化.结果10n/mLbFGF明显促进BMSG的粘附,但是200ng/mLbFGF反而不利于细胞粘附;在细胞增殖和分化测定中,100ng/mLbFGF明显促进细胞增殖,但细胞碱性磷酸酶含量也最低.结论碱性成纤维细胞生长因子对骨髓基质细胞的生物效应是复杂和多方面的,可以作用于骨髓基质细胞的粘附、增殖和分化等多个环节,这种影响与碱性成纤维细胞生长因子的剂量有关.     

基于批沉降实验研究活性污泥沉降速率

运用批沉降实验研究了活性污泥的区域沉降和压缩沉降规律，确定了沉降特性参数．考察了经验公式法确定区域沉降速率参数，发现其与实验测定值存在较大的差异．建立了一个关于压缩沉降过程中污泥层高度与时间的数学模型，给出了模型中参数的估计方法；运用批沉降实验数据对模型进行了验证，结果表明模型能够较为理想地描述压缩沉降过程．并在该模型的基础上，提出了判断区域沉降到压缩沉降临界点的理论公式，导出了一个新的压缩沉降速率公式，表明压缩沉降速率不仅和沉降时间有关．还和污泥的初始浓度及污泥层初始高度有关．     

路基不均匀沉降引起有砟轨道沉降的计算方法

针对路基不均匀沉降引起有砟轨道的沉降问题,以钢轨沉降变形的连续弹性点支承梁模型矩阵解法为基础,引入描述余弦型路基不均匀沉降的非线性边界条件及相关假定条件,提出了基于连续弹性点支承梁模型的路基不均匀沉降引起轨面沉降计算方法,并编制了C++计算程序.并通过上海市轨道交通2号线西延伸工程盾构法隧道下穿沪昆铁路线工程,结合路基实测沉降数据,采用该方法计算了路基沉降引起的轨面沉降,并与实测轨面沉降数据进行对比分析,结果表明:计算所得钢轨面的沉降槽宽度与实测结果基本相同,沉降幅值比实测值略小,但相差不超过1mm(约为轨面沉降值的4%).