tritordeum花粉特异性表达的遗传分析

为明确转基因tritordeum中被外源uidA基因标记的启动子的调控特异性,对筛选到的一株标记材料进行了两代uidA基因的遗传表达分析,结果表明,后代材料基因组中都含有uidA基因,没有发生分离,且都只在花粉中检测到GUS活性,在其他组织没有检测到GUS活性.进一步RT-PCR分析显示uidA基因在根和叶中没有发生转录,说明该株材料为花粉特异性启动子被uidA基因标记的阳性纯合体,实验证明该特异性能稳定遗传.     

水稻花药特异表达基因启动子的扩增及克隆

采用ＤＮＡ聚合酶链式反应扩增技术，以水稻黄化苗总ＤＮＡ为模板成功地扩增到水稻花约特异表达基因扇动２子Ｏｓｇ６Ｂ的７７０ｂｐ和９６０ｂｐ两个片段Ｏｓｇ６Ｂａ和Ｏｓｇ６Ｂｂ。并将其克隆到ｐＵＣ１８上形成完整的Ｏｓｇ６Ｂ，这为通过基因工程方法进行水稻杂种优势利用奠定了基础。     

丝状真菌启动子的基因工程改造进展

丝状真菌是重要的工业酶生产菌,具有优异的蛋白表达和分泌能力,如里氏木霉在工业发酵中其内源纤维素酶产量可高达100g/L。目前,丝状真菌已被成功用于表达外源基因,但与内源基因相比,外源基因的表达效率常常不高。使用强启动子来驱动基因转录可有效提高外源基因的表达水平,因此本文就通过基因工程的方法对丝状真菌的启动子进行改造以提高内、外源基因的转录效率的研究进行总结与展望。     

通过瞬间表达测定植物花药花粉特异基因启动子的时空表达式

通过瞬间表达快速测定了ＴＡ２９和Ｚｍ１３启动子在一些植物中的时空表达性，结果表明，ＴＡ２９启动子在烟草和番茄的花药中具有地空表达性，而Ｚｍ１３启动子在油菜花粉中无任何表达，这为一些植物构建或转化不育和恢复基因提供了理论依据。     

转基因动物的研究现状及展望

介绍了转基因鼠、转基因猪、转基因鱼、转基因牛的研究现状和产生的效益,展望了转基因动物的发展前景,并对其未来发展提出了建议。     

pACT E3质粒的构建及其在转基因烟草中的表达

将1个从棉花中分离的新的启动子ACT E3插入质粒pBI101,ACT E3与GUS基因融合,构建成pACT E3表达载体。通过农杆菌介导转化法将ACT E3/GUS融合基因导入烟草。GUS组织化学染色分析表明,在ACT E3启动子控制下,GUS基因仅在叶片及茎等组织中特异表达。     

转基因农作物的研究现状及安全性

综述了近20年来国内外转基因农作物的发展现状，对转基因农作物可能带来的环境和食品安全性问题进行了讨论，提示正确评价转基因农作物的安全性是目前农业技术革命中一个不容忽视的问题。     

从基因工程分析转基因食品的安全性

近年来,转基因食品不再是科技工作者争论的课题,而成为大众所关注的话题。文章从基因工程技术出发分析了转基因食品的食用安全性。从基因工程的技术程序上看,转基因食品的食用安全性是可以保障的。从基因工程技术讲,病原菌和病毒就会对转基因产品的安全性产生影响,而且就目前的科学水平对基因认识以及基因工程技术的不足带来的问题是不可预见的。需要建立一套科学的评价标准,对转基因食品进行长时间的安全性评估。     

博来霉素对转基因椭圆球藻(Chloroidium ellipsoideum)生长及油脂积累的影响

为了探究博来霉素对野生型椭圆球藻(Chloroidium ellipsoideum,SD-0701)和导入外源基因Gus的转基因椭圆球藻(SD-0702)生长以及油脂积累的影响,在Knap培养基中添加不同质量的博来霉素,测量2个藻株在不同处理下的细胞密度、藻粉产量以及油脂产量.结果发现,培养基中不添加博来霉素时,SD-...     

黄颡鱼(Pelteobagrus fulvidraco,Richardson)同功酶分析

采用聚丙烯酰胺凝胶垂直板电泳法对产自黑龙江水系的黄颡鱼同功酶进行了分析.结果表明:在黄颡鱼的性腺、眼、肌肉、肝、心、肾6种组织中,10种酶(ADH,EST,GDH,IDH,MDH,LDH,POD,-αAMY,G-6-PDH和SOD)的同功酶谱均存在明显的组织特异性.其中的5种酶在雌雄性别间也存在着显著的差异.这种雌雄性别间存在的较为明显、稳定的酶谱差异可以作为黄颡鱼性别鉴定的一项参考指标.10种酶共记录出25个基因位点,其中Adh-1,Adh-3,Gdh-1,Gdh-2,Pod-2和Est-1为多态位点.黄颡鱼群体的多态位点百分数为24.00%(P0.99),平均预期杂合度和平均实际杂合度分别为0.096 2和0.005 0,极显著地偏离了Hardy-Weinberg平衡;平均有效等位基因数为1.24,在目前硬骨鱼类多样性研究资料中处于下限值;多态位点的固定指数为0.983 5,杂合子处于较深程度的缺失状态.从以上数据可以看出,这批引自黑龙江水系的黄颡鱼群体的种质较为纯化.     

Functional analysis of cis-acting sequences regulating root-specific expression in transgenic tobacco

Two different length fragments, RSF1 and RSF2 which contained the cis-acting sequences of root-spe- cific gene TobRB7, were isolated from tobacco genome. The abilities of these fragments to direct root-specific expression were studied by fusing them to the β-glucuronidase (GUS) report gene with different directions. After the recombined vectors were transformed into tobacco, the expression pattern was performed by histochemical staining and the quantitative analysis of GUS activity. The data suggested that the cis-acting element of TobRB7 gene direct GUS expression not only as root-specific but also as bidirectional. In our studies, the short fragment, RSF2, performed stronger activity than RSF1 with any direction. The stronger activity of GUS expression was determined by reverse inserting of RSF1 or RSF2 than positive inserting.     

基因工程菌的发酵条件研究

为了获得商品化基因工程产品，要求所选用的基因工程菌高效表达重组蛋白．然而，随着发酵规模的扩大，诸多因素影响基因工程菌蛋白的表达．成功的大规模发酵有两个问题是重要的．一是质粒的稳定性，二是高密度发酵．本文从理论上阐明了ｐＨ，温度、溶氧、比生长速率等条件对重组蛋白产生影响的研究进展．     

δ-氨基-γ-酮戊酸合成酶(ALAS)基因的克隆与原核表达

为获得ALAS的重组表达蛋白,以人肝脏组织cDNA为模板,通过PCR扩增得到ALAS全长片段并测序,成功构建了pET30a(+)-ALAS融合表达载体并转化大肠杆菌Rosetta(DE).IPTG诱导融合蛋白表达.SDS变性凝胶电泳结果显示,融合蛋白的分子量约70kDa,并且在上清液中有少量表达.经镍柱一步纯化得到His6-ALAS融合蛋白.     

诱导小麦花药愈伤组织耐盐突变体的遗传参数

选用耐盐与丰产、不耐盐两套亲本品种,按不完全双列杂交设计,组配杂交组合,其F_1花药在筛选培养基(加0.3％NaCl)上诱导筛选耐盐突变体,摸清在诱导筛选过程中的主要遗传参数。结果表明:诱导筛选耐盐突变体的频率高低与亲本品种耐盐特性关系密切。就亲本品种耐盐性诱导率性状而言、亲本品种间的一般配合力高低差异明显。耐盐性诱导率的广义遗传力为97.9％,说明F_1的耐盐突变体诱导率的变异,是以遗传变异为主,受环境影响甚微;狭义遗传力为65.87％,表明加性遗传方差(遗传变异的可固定部分)占表现型方差比例中的比重较大。因此,依品种耐盐特性的表现选配杂交亲本,提高耐盐突变体诱导效率是有明显效果的。     

球孢白僵菌工程菌株构建及其环境安全性分析

以球孢白僵菌（Beauveriabassiana）Bb202作为出发菌株,同时引入外源毒力基因,即北非蝎（Androctonusaustralis）昆虫特异性神经毒素多肽基因AalT（GI：69545）,构建高毒力的工程菌株Bb202T-7,并用SPSS软件统计分析,结果显示,Bb202T-7对松墨天牛（Monochamusalternatus）的杀虫效率提高了11．11％。研究目的是为生物防治提供性能良好的出发茵株,为高效杀虫剂的研制提供基础资源,克服真菌杀虫剂击倒昆虫所需时间长,对环境条件要求高等缺点,加速真菌杀虫剂的产业化步伐。同时对基因工程重组菌株的安全性问题进行分析,并提出解决方案。     

基于遗传算法的启动子序列多粒度结构分析

采用遗传算法对启动子序列数据集抽取不同长度的最优模糊子序列模式,以此分析启动子的结构。实验发现：适当调整子序列模式与样本序列的匹配程度阈值,可以发现局部频繁模式,除较长的TATA盒外还发现了其他一些模式,而在阈值较低时算法得到CpG岛。     

藏黄牛褪黑激素合成酶AA-NAT基因cDNA克隆及序列的比较分析

哺乳动物季节性繁殖主要受褪黑激素调控, 而褪黑激素的分泌受其2个合成酶HIOMT和AA-NAT调控. 分布于青藏高原的藏黄牛和牦牛是典型的季节性繁殖动物, 普通黄牛繁殖则季节性不明显. 比较分析它们三者的AA-NAT序列, 从而进一步研究它们繁殖的季节性. 采用RT-PCR技术,从2个公藏黄牛个体的松果体组织总RNA中分别克隆到AA-NAT基因的表达序列, 并对其进行生物信息学分析. 结果表明:藏黄牛AA-NAT基因的表达序列全长为624bp, 开放阅读框(ORF)为621 bp, 编码207个氨基酸, 预测其表达蛋白分子量为52.3005kDa, 等电点为5.06, 不具有信号肽, 有两个具有较高可能性的跨膜区, 存在4个O连接糖基化位点, 而不存在N连接糖基化位点, 有3个潜在的Ser和3个Thr磷酸化位点. 藏黄牛该基因表达序列核苷酸及编码氨基酸与亲缘关系较远的牦牛一致, 而与亲缘关系较近的普通黄牛却有一定差异, 这可能与繁殖的季节性有关.