发菜中麦芽寡糖基海藻糖合成酶的抗体制备及鉴定

通过PCR法从发菜总DNA中克隆到编码麦芽寡糖基海藻糖合成酶基因前645bp的催化位点保守序列的片段，将该基因片段在大肠杆菌中表达，得到符合预期大小的重组蛋白．将该重组蛋白纯化回收用于制备该酶的特异性抗体．检测表明抗体具有较高效价．利用该抗体检测干旱胁迫下发菜藻丝体中该酶的表达量表明干旱胁迫条件下该酶的表达量增加：且与海藻糖积累量呈正相关，可能参与发菜的抗逆性保护作用．     

发菜悬浮细胞对低温胁迫的生理响应机制

以人工培养的发菜悬浮细胞为研究对象,通过分析低温胁迫下细胞的生长状态和生理特性的变化,阐释发菜在极端环境下得以生存的适应机制.结果表明:4℃低温胁迫处理15天后,发菜悬浮细胞的相对生长量显著降低,而质膜相对透性和细胞活性在低温胁迫处理3天较对照有明显的变化,处理5天后细胞逐渐适应.与对照相比,低温胁迫处理5天使发菜细胞内的脯氨酸质量分数和海藻糖质量分数显著上升,同时显著抑制了光合系统Ⅱ的活性,而叶绿素a的质量分数在低温处理初期上升.由此可以发现,低温胁迫使发菜悬浮细胞的质膜完整件和光合作用受到伤害,而细胞内的脯氨酸和海藻糖迅速积累起着积极的渗透调节作用,从而使细胞逐渐适应低温,生长得以恢复.     

水分和热胁迫对苗木针叶可溶性糖含量的影响

以杉木、马尾松、花旗松和北美乔柏为对象，研究了在水分和热胁迫下，苗木生长期间针叶内可溶性糖含量的变化。结果表明：(1)水分和热胁迫处理对杉木针叶果糖含量的影响不明显，但对杉木针叶葡萄糖和蔗糖的含量却有显影响。水分胁迫和热胁迫的交互作用对杉苗针叶的蔗糖含量也有显影响。随着水分胁迫程度的加深，葡萄糖含量提高了11．80％，蔗糖含量提高幅度达318．86％。随着热胁迫程度的加深，葡萄糖含量提高了16．54％，蔗糖含量提高幅度为169．83％；(2)水分胁迫处理对马尾松苗木针叶葡萄糖和蔗糖含量的影响显，而热胁迫则对葡萄糖和果糖含量影响显。水分和热胁迫处理对马尾松苗木针叶3种可溶性糖含量的影响均呈上升趋势，其中水分胁迫条件下葡萄糖含量提高了45．92％，果糖含量提高了34．01％，蔗糖含量提高了138．32％。热胁迫条件下葡萄糖含量提高了36．07％，果糖含量提高了28．01％，蔗糖含量提高了22．82％；(3)水分和热胁迫尽管对花旗松苗木针叶的3种可溶性糖含量均有较显影响，但随着水分胁迫程度的加深，3种可溶性糖含量均未表现出明显的上升趋势。只有随着热胁迫程度的加深，花旗松苗木针叶的3种可溶性糖含量才呈现出上升趋势；(4)水分和热胁迫对北美乔柏苗木针叶可溶性糖含量均有显影响。其中随着水分胁迫程度的加深，葡萄糖含量提高了89．46％，果糖含量提高了90．32％，蔗糖含量提高了71.68％。随着热胁迫程度的加深，葡萄糖含量提高了21.18％，果糖含量提高了45．97％，蔗糖含量提高了107．67％。水分胁迫和热胁迫的交互作用对北美乔柏苗木针叶的蔗糖含量有显影响。     

中华芦荟在不同胁迫下的丙二醛和可溶性糖含量的变化

以中华芦荟（Aloe vera L.var Chinensis（Haw．）Berger）为材料，进行干旱、高盐和低温胁迫处理，测定丙二醛和可溶性糖含量的变化．结果表明，中华芦荟在三种胁迫处理下，丙二醛和可溶性糖含量都随着处理时间的延长而增加，低温胁迫下的增长幅度最大，这可能暗示芦荟对低温胁迫更敏感，进一步表明芦荟耐干旱耐高盐但不耐低温．     

低温胁迫下烟草海藻糖与海藻糖酶的动态关系研究

研究了低温胁迫下烟草品种K326的海藻糖和海藻糖酶等指标的变化,结果表明:⑴低温锻炼、海藻糖和井冈霉素A处理均可引起烟草体内海藻糖含量增加,海藻糖酶活性降低,这种此消彼涨的关系反映了海藻糖可能是调节植物体抵抗逆境的一类应激物;⑵不同处理可使低温胁迫下烟草可溶性蛋白质代谢发生相应变化,SDS-PAGE结果证明三种处理均可能诱导低温胁迫相关蛋白的合成或表达增强.     

干旱胁迫下红砂渗透调节和抗氧化保护系统的响应研究

采用盆栽试验,测定了在不同土壤水分胁迫下红砂一些渗透调节物质和抗氧化保护酶,探讨渗透调节物质和抗氧化保护系统对干旱胁迫的响应。结果表明:叶绿素、类胡萝卜素和可溶性糖含量在中度干旱条件下增加,在重度干旱胁迫下减少并且低于对照;POD活性和CAT活性在中度和重度干旱胁迫下上升,但中度干旱胁迫高于重度;随着干旱胁迫程度的加强,脯氨酸含量、MDA含量、SOD活性一直呈上升趋势。研究表明,可溶性糖在中度干旱胁迫下起到了很重要的渗透调节作用,但在重度干旱胁迫下没有起到积极的作用;无论在中度还是重度干旱胁迫下,脯氨酸都起到了很重要的渗透调节作用。胡萝卜素、MDA、脯氨酸、SOD、POD和CAT在防御干旱引起的氧化胁迫中起到了显著保护作用,POD和CAT在中度干旱胁迫的保护作用更显著;无论在中度还是重度干旱胁迫下,MDA、脯氨酸和SOD都有显著的保护作用。     

几种糖对纤维素酶热稳定性影响的研究

研究了几种糖对纤维素酶热稳定性的影响。研究发现，20℃下海藻糖和葡萄糖都能较好地保护酶的活性，蔗糖次之，而葡聚糖则不起作用。高温下葡萄糖和蔗糖不但不能保护酶的活性，反而起到破坏作用，而海藻糖和葡聚糖则对酶有较强的保护作用。初步分析，海藻糖作用机理是羟基能替代水分子同酶结合，并且能在酶分子空隙中和酶分子周围形成玻璃态，将酶分子支撑和包裹起来。因此海藻糖能在较宽的温度范围内阻止酶分子空间结构发生变化，从而提高了酶的热稳定性。     

耐热酿酒酵母海藻糖代谢途径对热胁迫的响应

为深入探讨酵母的热响应机制,测定了热胁迫条件下耐热酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)中海藻糖含量的变化,并通过实时定量聚合酶链式反应,分析了热胁迫下参与海藻糖代谢的相关基因的表达.结果表明:在42℃热胁迫下,酿酒酵母细胞内的海藻糖含量显著提高,在处理240min时达到0.20g/g(以细胞干重计),约为热胁迫前的4倍;随着胁迫时间的增加,胞内海藻糖的含量开始下降。参与海藻糖代谢的基因表达变化与海藻糖含量变化高度一致,说明海藻糖在酵母适应高温的过程中起重要作用.     

海藻糖的生理功能、生物合成及应用前景

海藻糖是一种非还原性双糖,它广泛存在于真菌、植物、昆虫和无脊椎动物中。其主要功能是作为抗胁迫的保护剂。热击、高渗或其它胁迫均可有效地提高其含量。现在,海藻糖可在体内或体外合成,其应用领域也越来越广泛。     

干旱胁迫下开花期玉米消减文库的构建及分析

分别以1d干旱和7d干旱处理的开花期玉米顶叶cDNA为tester，正常生长的玉米顸叶cDNA为driver，利用抑制性差减杂交技术构建了两个干旱胁迫下开花期玉米消减文库．两个文库的重组率均高于95％，插入片段集中在300—600bp之间．对两个文库部分克隆进行测序发现，文库中含有脱水素、蔗糖合成酶、甜菜碱醛脱氢酶。DRE结合因子等大量的抗旱相关基因，说明两个干旱胁迫下开花期玉米抑制性消减文库已经构建成功。且具有重要意义．     

顽拗型种子贮藏和脱水过程中碳水化合物、脂肪和蛋白质的生化变化

顽拗型种子通常不能干燥到较低含水量或贮藏较长时间而不受伤害。导致这一问题的生化机制因属不同甚至同一属中的种不同而异。笔者测定了栎属、槭属和七叶树属顽拗型种子在室温下贮藏或干燥过程中的生化变化。虽然贮藏脂肪组成的变化是不确定的，但膜脂肪和蛋白质的结构以及蔗糖含量发生了变化。用两份白橡树种子在室温下贮藏12d的实验表明，脱水样品的蔗糖含量发生很大变化，而保持水分的样品中蔗糖含量变化很小。因此，保持水分种子的蔗糖用于正常的生长和发育，而干燥种子的蔗糖则用作糖保护剂。尽管如此，蔗糖的存在也许能保护干燥橡实的细胞膜不致破裂，但蔗糖不能保持橡实的生活力。     

嗜酸氧化亚铁硫杆菌冷冻保藏保护剂的正交法优化

以甘油、海藻糖、蔗糖和二甲亚砜为考察因素,采用正交实验方法,对嗜酸氧化亚铁硫杆菌冷冻保藏保护剂的优化配比进行研究.直接分析、因素指标分析和方差分析结果表明：在由甘油、海藻糖、蔗糖、二甲亚砜4种保护剂组成的混合保护剂中,对冷冻存活率影响由大至小的顺序为：甘油,海藻糖,蔗糖,二甲亚砜.最佳保护剂组合为100g/L甘油＋100g/L海藻糖＋180 g/L蔗糖＋50 g/L二甲亚砜,该组合能使冷冻存活率达到89%.     

不同糖对纤维素酶保护的机理研究

旨在通过测量海藻糖、葡萄糖、蔗糖、葡聚糖、纤维素酶以及纤维素酶分别与这些糖的混合物的红外光谱和差示扫描量热谱图，研究糖和纤维素酶分子间的相互作用，推测海藻糖对纤维素酶保护的机理。结果表明，海藻糖的羟基同酶分子以氢键的形式结合提高了酶的热变性温度，增加了酶的热稳定性。另一方面，海藻糖分子包裹在酶分子周围，或填充在酶分子的空间结构内，特别是酶的活性部位附近，并形成玻璃态，将酶蛋白的空间结构固定住而避免酶的失活。     

天然发菜与人工发菜的鉴别研究

人工发菜与天然发菜的形态非常相近似 .本文介绍的显微鉴别、腐蚀鉴别、灼烧鉴别和直观形态鉴别等方法 ,可以准确、迅速地对发菜样品做出鉴定结论 ,为发菜营销和商检提供了科学、可靠的检测方法     

气相色谱检测芦荟中海藻糖方法的建立

用1-甲基咪唑、氯化羟胺、乙酸酐将海藻糖衍生化，以气相色谱法作为定量分析手段，建立了植物组织中微量海藻糖定量检测方法.用该方法对同一种糖类衍生物进行多次分析，其特征峰保留时间误差在3 s内；能将D-葡萄糖、乳糖、蔗糖和海藻糖进行分离.海藻糖在（3.697～28.661）×10^-9 g检测量范围内其相关系数为0.998 6.利用本实验建立的植物组织中微量海藻糖定量检测的方法，分别对3年生、5年生库拉索芦荟和半年生海藻糖合成酶基因转化芦荟凝胶中海藻糖的含量进行测定，结果表明：5年生库拉索芦荟凝胶中海藻糖含量是3年生的1.59倍，每10 g凝胶匀浆中分别为1.103×10^-5 g和6.905×10^-6 g；每10 g半年生海藻糖合成酶基因转化芦荟凝胶匀浆中海藻糖含量为1.614×10^-5 g，是3年生的2.33倍.证明目的基因成功转入芦荟并已经表达.     

发菜中红色蛋白的研究

研究发菜中一种红色蛋白(Rx)的分离纯化及其光谱学性质.采用超声法破碎发菜细胞,盐析法初步纯化藻胆蛋白,利用DEAE-DE52交换介质得到藻胆蛋白纯品;测定室温和低温(液氮)下的荧光激发光谱和发射光谱.Rx的吸收峰在520 nm,室温与低温下的荧光发射峰分别在625和630 nm,室温与低温下的荧光激发峰分别在615和610 nm,室温下,Rx在藻胆体中的荧光上升时间和荧光寿命分别为495和2 200 ps.结果表明,Rx既可以把它吸收的光能传递给藻蓝蛋白(PC),再经由PC传递给别藻蓝蛋白(APC),又可以直接将能量传递给APC.     

糖的浓度和种类对人血小板冷冻干燥保存的影响

以海藻糖、蔗糖、麦芽糖、乳糖、葡萄糖作为冻干血小板的保护剂,研究糖的浓度和种类对血小板冻干保存的影响.结果表明,冻干血小板的保存效果随海藻糖浓度的增加而提高,当海藻糖质量分数增加到20%时,非活化血小板的恢复率达到85.7%;对于质量分数均为20%不同种类的糖保护剂,非活化血小板的恢复率都达到70%以上,海藻糖略优于其他几种糖,但它们之间没有显著性差异.     

血红蛋白(Hb)的低温保护剂

通过 ３ 种糖对血红蛋白（ Ｈｂ）在冷冻贮藏中的影响, 表明这些糖对 Ｈｂ 的变性沉淀具有抑制作用, 并能维持其诱导形态的稳定, 防止其由氧化型向高铁氧化型转化, 同时对 Ｈｂ 的氧合功能具有较好的保护作用     

脂质体冷冻干燥及其对药品的包封率

利用差示扫描量热仪(DSC)测量了以葡萄糖、蔗糖、甘露醇、海藻糖作为保护剂的脂质体悬浮液的玻璃化转变温度Tg，研究了冷冻干燥工艺对脂质体质量的影响，并讨论了上述保护剂对脂质体在冷冻干燥过程中的保护效果，结果表明：以海藻糖作为保护剂的脂质体的玻璃化转变温度Tg最高为-30．4℃，而以葡萄糖作为保护剂的取最低为-39℃；在冻结和冷冻干燥过程中，以海藻糖作为保护剂的脂质体的粒径变化最小，以葡萄糖为保护剂的脂质体粒径变化最大。还对脂质体包封水溶性药物喃氟啶和脂溶性药物维生素A进行了冻干研究，并利用WATERS高效液相色谱仪测量了冻干后脂质体对药物的包封率。结果显示：以海藻糖为保护剂的脂质体对药品的包封率较高，泄露少，而以葡萄糖为保护剂的脂质体对药品的包封率较低，泄露多。通过研究得出海藻糖是一种较好的保护剂，并优化了脂质体冷冻干燥工艺。