“索邦”百合茎尖培养及植株再生的研究

以“索邦”百合的小鳞茎作为外植体，分别对外植体的表面消毒、茎尖脱毒、小鳞茎增殖与生根培养等进行研究。结果表明：用酒精（30s）＋次氯酸钠（10min）＋升汞（6min）交替消毒，外植体存活率达68．1％；热水处理30min结合茎尖培养，脱毒效果显著，脱毒率可达80％；小鳞茎在6-BA0．5mg·L^-1＋IBA0．2mg·L^-1激素组合下，平均增殖系数达6．3；用1／2MS＋NAA0．6mg·L^-1培养基诱导生根，生根率100％，且根系粗壮。脱毒试管苗移栽应在防虫网室内进行，基质选用经过严格消毒的泥炭土和珍球岩混合基质（体积比为3：1），移栽成活率可达95％以上。     

甘薯茎尖培养

报道了甘薯茎尖培养的实验工作,证明在MS附加IAA mg/L+BA 0.1mg/L+GA_3 0.05mg/L的条件下能促进茎尖生长,但基部形成愈伤组织,因此必须适时转入无激素的MS培养基上,停止愈伤组织的继续生长,以加速成苗过程,成苗度可达80％左右。甘薯的基因型显著影响培养茎尖的成苗率,脱毒植株进行单节茎段微型快速繁殖,每月繁殖系数为4～5。     

湖北麦冬脱毒苗的生长发育与产量效应研究

通过田间试验和盆栽对比试验对湖北麦冬茎尖脱毒苗与未脱毒苗的生长发育和产量进行了比较．结果表明，茎尖脱毒苗的产量极显著地高于未脱毒苗；单株分蘖数、块根数、根系活力均显著地高于未脱毒苗；茎尖脱毒苗和未脱毒苗的折干率差异不显著．     

枸杞脱毒苗的诱导及光合特性的分析研究

利用茎尖分生组织（0．2－0．4mm)培养和花药培养,获得了枸杞脱毒苗。茎尖培养脱毒率在72．7％－87．5％之间,花药培养脱毒率在70．0％－76．5％间。进行38℃下热处理茎尖生分组织组培苗,可提高脱毒效果。叶绿素含量和光合强度测定表明,脱毒苗与对照相比,叶绿素含量增加2．3－26．9％,光合强度增加6．9－12．1％。     

马铃薯脱毒种薯的工厂化生产研究

以马铃薯的茎尖为外殖体，经脱毒处理，并检测无病毒的苗进行快速繁殖，生产种薯，组培生产的培养基分别为：（1）茎尖培养基：MS＋GA30.1mg/L 6-BA0.5mg/L NAA0.01mg/L；（2）壮苗培养基：MS＋B90.8g/L。     

淀粉加工型甘薯茎尖的成分分析与利用研究

系统地筛选了甘薯茎尖蛋白质最适的提取酶解条件，比较了淀粉加工型和蔬菜专用型甘薯茎尖的营养成分，研究结果表明:用新鲜甘薯茎尖质量2倍体积的0.1%NaHSO₃溶液、30 ℃下搅拌30 min，水溶性蛋白质的提取率可达52%；在此条件下加入木瓜蛋白酶、50 ℃下搅拌水解4 h，水溶性蛋白质的提取率可提高到75%，茎尖蛋白质的水解度可达24.8%.该方法制备的富含功能多肽的甘薯茎尖粉末的蛋白质、游离氨基酸和黄酮类物质的质量分数分别为24.19%、5.41%和3.31%，与蔬菜专用型甘薯茎尖制备的产品无显著差异.该研究开发了利用淀粉加工型甘薯茎尖制备富含营养和功能多肽的保健食品的工艺，为利用田间废弃的甘薯茎尖开辟了新的途径.     

脱毒甘薯的组织培养、快速繁殖和增产技术研究

甘薯为无性繁殖作物，已查明受多种病毒感染．造成严重减产，本试验选取带有l-2个叶原基的甘薯茎尖，经组织培养谤导出试管苗。试管苗脱毒率高达86．7％，取脱毒试管苗快繁，繁殖系数达每月5倍以上。试管苗在大棚内多次扩繁后，移栽到大田．增产效果达30%以上。     

加快脱毒甘薯推广的设想

通过茎尖剥离和组织培养的高新技术,脱去植株体内的各种病毒,恢复甘薯的优良种性,大幅度提高产量,显著增强抗性,这种技术叫甘薯脱毒,各地都在大力推广应用。但事实上此项高新技术从80年代后期投入生产应用至今,实际推广应用的范围和面积不大,进度也不快。我们在几年的工作实践中,对制约甘薯脱毒高新技术推广应用的因素进行了初步探讨。     

不同脱毒方法下马铃薯脱毒效果的比较研究

为探索马铃薯脱毒的最佳方法,提高马铃薯脱毒效率及脱毒苗成苗率,采用超低温疗法＋茎尖剥离技术和热处理法＋ 茎尖剥离技术 ２ 种脱毒方法进行脱毒效果的比较研究。 结果表明:相比于超低温疗法,热处理法处理的马铃薯成苗率和脱毒 效率更高,其最佳处理方式为 ３８ ℃温度条件下热处理 ６ ｈ 后再进行茎尖剥离;同时,在该处理条件下,进一步探索了缩短脱毒 苗培养周期的最适激素配比,并发现 ＭＳ 培养基中添加 ０.５０ ｍｇ / Ｌ ＧＡ３＋０.５０ ｍｇ / Ｌ ６－ＢＡ＋０.０１ ｍｇ / Ｌ ＮＡＡ 激素后茎尖成苗率 较高,达到 ８４.６２％。     

文旦柚和下河蜜柚组织培养快速无性繁殖

对两种柚类的茎尖和幼嫩的茎段进行组织培养快速无性繁殖，研究结果表明：不同柚类的培养结果不同，文旦柚的繁殖系数大于蜜柚的，为386．2％；文旦柚不同外植体的培养结果是带腋芽的茎段的繁殖系数大于茎尖，差异达到极显著；茎段在附加激素的基本培养基MS上培养诱导形成不定芽，低浓度的奈乙酸（NAA）和6-苄基嘌呤（6-BA）对外植体的成活率没有显著影响，激素浓度升高则会显著影响外植体的成活率；培养基以MS添加6-BA0．5mg/L和NAA0．2mg/L的培养效果最好，繁殖系数达到407．1％，与其它处理差异达到极显著水平；     

超低温保存脱除两种马铃薯病毒

采用超低温保存的方法对马铃薯病毒PVY和PVS进行了脱除研究.结果显示:经过超低温保存后,材料的存活率可达71.6%,比传统的茎尖培养脱毒材料的成活率在52%左右高;超低温保存后PVY病毒脱除率达到83%,比传统脱毒方法脱毒率(62%)和热处理脱毒率(65%)要高,且操作上也较简单;对于马铃薯PVS病毒脱除率在47%左右,而采用茎尖培养病毒的脱除率仅有17%左右.     

利用柑橘茎段诱导不定芽改进微芽嫁接技术的研究

试验以成年态纽荷尔脐橙茎段为外植体，诱导产生不定芽改进微芽嫁接成活率与脱毒率．结果表明：半木质化茎段作为培养外植体污染率最低，不定芽诱导的最佳培养基为MT＋＋6-BA1．0mg／L＋NAA0．2mg／L＋GA30．2mg／L．将诱导的嫩芽进行微芽嫁接，成活率超过80．8％，对照成活率为61．3％，聚合酶链式反应（PCR）检测脱毒率达100％．     

玻璃粉创伤棉花茎尖分生组织遗传转化的研究

评估玻璃粉创伤棉胚茎尖分生组织的转化效率及初步建立其遗传转化体系。高速涡旋的玻璃粉创伤棉胚茎尖分生组织,利用农杆菌介导法将报告基因gusA导入棉花,GUS组织化学染色后观察棉胚转化情况,探讨不同转化条件对转化的影响。结果表明：0。2g玻璃粉创伤棉胚,茎尖分生组织的较多细胞被转化,成活12株幼苗,较适宜。涡旋90S转化条件下获得2株GUS阳性苗,涡旋时间越长茎尖分生组织创伤程度越严重,能提高转化效率,但成苗量降低。此外．转化效率受菌液浓度及菌种的影响,OD600为0．8的农杆菌LBA4404菌液侵染棉胚,较多细胞能表达gusA的活性且表达水平较高,而被农杆菌GV3101侵染后的棉胚染色效果较差。     

非洲菊的组织培养

针对非洲菊自然繁殖率低下的情况,探讨了利用组织培养方法解决生产中繁殖的问题. 结果显示: 在茎段、 茎尖和叶柄3种外植体中,茎尖的出愈率最高, 是理想的快速繁殖材料,较适宜的诱导愈伤组织的培养基为MS+ BA 1. 0 mg•L^-1+IBA 0. 0 5 mg•L^-1+庶糖3. 0%,诱导不定芽的培养基为MS+ BA 2. 0 mg•L^-1+IAA 0. 5 mg•L^-1+ 庶糖3. 0%或MS+ Kt 3. 0+ IAA0. 05 mg•L^-1+ 庶糖3. 0%, 而根的诱导则是在 MS+ NAA 0. 3 mg•L^-1+ IBA 0. 3 mg•L^-1+庶糖3. 0%的培养基上进行.     

斑节对虾白斑综合症的防治

报道海南省临高县文科虾场、广西北海横路山虾场、北海市海水养殖综合实验场斑节对虾白斑综合症的防治实验。认为放苗前用二氧化氯消灭病毒,用漂白粉消灭病毒和细菌,用孔雀石绿杀死真菌和原生动物,用石灰中和酸性,用尿素和过磷酸钙培养浮游植物。养殖期用光合细菌净化水质,用水质稳定剂净化底质,合理投饵,科学管理,保持养殖水体生态平衡,恶化病原体繁衍条件,优化斑节对虾生存环境,可以成功地预防斑节对虾白斑综合症,对早期轻病者有一定的治疗作用。     

重组痘苗病毒对不同哺乳动物细胞株的感染效率及EGFP表达水平研究

研究重组痘苗病毒对不同哺乳动物细胞的感染效率及表达水平，可为痘苗病毒表达系统宿主细胞的正确选择提供依据．本研究利用重组绿色荧光蛋白基因的痘苗病毒WR—EGFP同时感染不同的哺乳动物细胞株，利用流式细胞仪检测EGFP的表达强度．共使用20种哺乳动物细胞株，其中10种人类组织细胞，2种猴组织细胞。8种小鼠组织细胞．结果表明，重组痘苗病毒wR-EGFP对鼠细胞系BHK21和人细胞系A-549的感染效率和表达效率最佳；整体看，痘苗病毒对多数灵长类动物细胞的感染效率和表达效率优于鼠细胞；对贴壁细胞的感染效率和表达效率明显优于悬浮细胞；但没有特别的组织偏嗜性。     

全息图的转印及效率研究

本文叙述了全息图转印的原理和转印方式，同时介绍了转印所用材料和怎样提高转印效率．     

多瘤病毒的培养特性及血清抗体的检查

多瘤病毒最适宜的培养条件为接种病毒吸附1.5h,培养第4天换液1次,用无牛血清维持液培养12天,其血凝素达高峰。当培养物出现血凝素时,即有细胞内抗原的存在。应用血凝抑制试验(HI)和酶免疫法(EIA)两种方法进行对比性试验,检查实验感染多瘤病毒的10只SPF小鼠和192只普通小鼠血清多瘤病毒抗体的出现,实验结果表明HI较EIA敏感。多瘤病毒存在于我国普通饲养的实验小鼠群中。     

乙,丙型病毒性肝炎血清影响淋巴细胞集落形成的研究

病毒对造血有一定的抑制作用，用乙．丙烯肝炎病毒血清加入培养的正常细胞的上清中，研究其对淋巴细胞集落形成的作用，结果提示：乙、丙型病毒性肝炎血清，对有分裂原ＣｏｎＡ和ＰＷＭ激活的辅助Ｔ淋巴细胞和非Ｔ淋巴细胞，均有明显的抑制作用，对植物凝集素ＰＨＡ激活的总Ｔ淋巴细胞有一定的抑制作用，但不显著。乙－丙型肝炎病毒可能是引起某些造血细胞抑制的原因之一。     

大鼠细小病毒KRV株培养方法的建立

目的 建立用大鼠胶质瘤细胞系( Rat glial cell line C6)替代大鼠原代胚细胞(Primary rat embryo cells,RE)来 培养大鼠细小病毒（Kilham Rat Virus,KRV）的方法。方法 将500 TCID50 KRV培养物接种到75T-C6细胞培养瓶 中（ 细胞接种量为2×105/mL）, 培养过夜, 待细胞病变CPE达++～+++时, 分别用免疫荧光(FITC)鉴定所培 养病毒的特异抗原,用血球凝集试验(HA)测定培养物上清的效价,用DNA测序鉴定所培养的病毒,最后用96孔 板培养法测定KRV的TCID50。结果 KRV在接种到C6细胞的第4～5天, 细胞发生明显的病变,CPE可达++++, FITC鉴定呈KRV抗原阳性, 病毒的培养上清中HA效价为1:5 120,测序结果表明, 该病毒序列与NCBI中KRV序 列同源性达98％ , 确定为KRV。收获的KRV的TCID50为104.6/0.1 mL。结论 通过对C6细胞系培养KRV方法 的标准化和对所培养病毒的一系列鉴定表明,用大鼠胶质瘤细胞系可以替代大鼠原代胚细胞系进行大鼠细小病毒 的培养。