CaCl2浓度对感受态细胞转化效率的影响

对于E.coli菌株用8种不同浓度的CaC l2制备感受态细胞,然后转化各浓度的感受态细胞。实验结果表明,不同浓度CaC l2溶液处理所得到的感受态细胞,其转化效率有很大的不同。随着CaC l2浓度增高,转化效率也随之提高,在80m mol/L~100m mol/L时达到峰值,进一步提高CaC l2的浓度,转化效率急剧下降。还探讨了-70℃贮存时间对转化效率的影响。     

感受态细胞制备和质粒转化冰浴时间对大肠埃希菌转化效率的影响

通过研究转化实验中加入质粒DNA的量、大肠埃希菌感受态细胞制备和质粒转化过程中冰置时间长短对感受态细胞最终转化效率的影响,分析其最佳转化效率参数,优化感受态制备和转化方法.结果表明,加入质粒（pBR322）DNA量为1～10ng,感受态制备过程中菌液冰浴时间在30～60min,以及感受态细胞加入质粒DNA并混匀后的冰置...     

一种制备高效感受态细胞的方法

感受态是细菌最易吸收外源DNA的状态,感受态细胞是基因工程中外源DNA转化必不可少的材料,通常是用新鲜的CaCl2溶液诱导产生,但制备时对实验条件要求较高,本方法制备感受态细胞操作简便,价格便宜,而且转化效率高.     

三种大肠杆菌高效感受态的制备及转化

描述了一种改良的高效细菌感受态的制备和感受态细胞的保藏及细菌的转化方法.三种不同的大肠杆菌分别是DH5α,TG1和XL1blue,其中最有效的是XL1blue.每种菌株的感受态细胞制备的最佳光密度(OD600值)不同.对感受态细胞的存储时间及其与转化效率之间的关系也进行了研究,结果显示感受态细胞可以在-20℃存储7d,在-70℃存储15d.将常见的方法做了三种改进:首先是将CaCl2溶液改为TB溶液;其次是将培养基由LB换成S.O.C;再就是在质粒对感受态细胞的转化过程中加入DMSO或PEG8000.改良的细菌转化系统比常见的方法能提高转化效率约1000倍,是一种高效的细菌转化系统.     

酿酒酵母细胞四种转化方法的比较

1978年 ,Hinnen等和 Begges首先报道了酵母原生质体转化方法 [1 ,2 ] .该方法的优点是转化效率较高 ,但此方法容易形成多倍体细胞 ,且细胞再生困难 .后有人在此基础上进行改进[3] ,虽提高了转化效率 ,减少了多倍体细胞的形成 ,但菌落再生时间较长 ( 4～ 6d) .Ito等提出了不完全破坏细胞膜的完整酵母细胞的转化方法 ,并对多种金属离子对转化效率的影响进行研究 [4] .进入 90年代后 ,人们在 Li Ac的加入量、热冲击时间、PEG4 0 0 0的浓度等方面进行了改进 [5～ 7] .本文选取了四种不同的转化方法进行比较 ,以期找到最佳的转化方法 .1　材…     

枯草芽孢杆菌高效转化及其转化子验证方法

用构建好的重组质粒转化枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis）WB600感受态细胞,进行不同时间预培养后,涂布于抗生素平板培养,研究一种更高效的转化方法。用载体与外源片段的连接产物转化WB600感受态细胞,进行最佳预培养时间培养后,涂布于抗生素平板培养,培养得到的转化子用PCR快速验证和双酶切鉴定,研究一种转化子的快速验证方法。     

大肠杆菌DH5α感受态细胞转化率的改进

针对实验材料E．coli DH5α,对该菌株在不同生长时期的转化效率进行测定,确立了一个能制备高转化率感受态细胞的实验方案．结果表明：在细菌的生长繁殖过程中,其转化率有很大变化;得到了E．coli DH5α菌株制备感受态细胞的最佳条件．     

脱细胞角膜基质制备方法研究进展

脱细胞角膜基质作为组织工程角膜的研究新热点,不仅保持了天然角膜的结构特征和力学性能,且含有人工合成支架所不具备的细胞生长因子等,为种子细胞生长提供了理想的环境,同时也去除了组织中可能引发免疫排斥反应的细胞成分。本文对最近几年异种脱细胞角膜基质的制备方法进行综述,并指出了各种方法的优缺点。     

外源基因转化烟草悬浮细胞方法的改进

烟草悬浮培养细胞作为一种重要的实验材料已有较多的研究,将外源基因通过克隆进行载体构建,转化入悬浮培养的烟草细胞并进行表达,在带有相应筛选抗性的抗生素固体培养基中进行培养,再将愈伤组织转入液体培养基中进行培养,得到转入外源基因的液体悬浮培养烟草细胞.我们通过对此法作一些改进,使其便于操作、省时,适合在一般实验室条件下进行操作,且烟草悬浮培养细胞传代培养快,取材方便的特性对实验的开展也有很大的促进.     

甘肃省科研项目成果转化效率评价研究

科技创新是提升国家核心竞争力的必由之路,是实现区域经济协调、稳定、快速发展的重要手段,要充分发挥科技对经济的推动和引领作用,有效推动科技成果的转化。本研究通过梳理国内外科研项目成果转化及效率的研究情况,对甘肃省2011—2020年48 004项技术市场交易合同和11 676项科技成果进行深入细致的分析研究,总结甘肃省技术市场交易和科技成果的总体特点与发展变化趋势,科研项目在技术市场交易中的表现,以及应用技术类科技成果的转化特征,同时从年度、创新主体、地域等不同维度和层面进行了深入分析。在数据特点分析的基础上,研究并构建了一套甘肃省科研项目成果转化效率评价指标体系,测算全省及各市州科研项目成果转化效率综合指数。最后对甘肃省科技成果转化的模式与机制进行了案例分析,并提出了促进科技成果转化的对策建议。     

乳酸乳球菌电转化条件的研究

以质粒pTRKH2为材料,对乳酸乳球菌MG1614进行电转化条件的研究.实验结果表明,在电转化过程中,电场强度、电阻大小、细胞生长状态和电击后菌株复苏时间均对转化效率有明显影响,得到了乳酸乳球菌的最适电转化条件为:对数生长中期的细胞,经1%甘氨酸处理,在10kVcm电场强度、400Ω电阻下电转化,转化后细胞在SGM17培养液中培养2h后涂布选择性培养基,转化率(转化子个数与DNA质量之比)可达1.2×103个μg,比优化前的转化效率提高近100倍.     

注射用水飞蓟宾的制剂研究

对注射用水飞蓟宾的制剂进行研究．水飞蓟宾和葡甲胺分别于水浴温度为82℃下以无水乙醇溶解,混合两相溶液于45℃下旋转回收无水乙醇得水飞蓟宾葡甲胺（物质的量的比为1：1）复合物,此复合物与葡甲胺共同溶于水中制成含水飞蓟宾葡甲胺复合物20mg／mL,葡甲胺10mg／mL的药液．药液进行冻干．试验证明此制剂方法在实际生产中可行．     

TiO2纳米管阵列的制备及其光催化效率研究

以质量分数（下同）0.3%NH4F＋ethylene glycol＋1%H2O为电解液采用阳极氧化法制备了TiO2纳米管,研究了阳极氧化时间和退火温度对TiO2纳米管表面形貌、晶体结构和光催化效率的影响,比较了不同电解液制备的TiO2纳米管和溶胶凝胶法制备的TiO2薄膜的光催化效率.应用X射线衍射（XRD）和场发射扫描电镜（FESEM）对TiO2纳米管的形貌和结构进行了分析.结果表明：在阳极氧化恒电压50 V、阳极氧化48 h、450℃退火4 h条件下制备的TiO2纳米管具有最高的光催化效率,其光催化效率明显高于溶胶凝胶法制备的TiO2薄膜（4.4倍）,也高于0.5%HF电解液和弱酸水溶性电解液（0.5%HF＋1 mol/L NH4H2PO4）制备的TiO2纳米管的光催化效率.     

静息细胞法转化天麻素的研究

目的研究微生物细胞对天麻素的转化作用。方法采用静息细胞转化法,对天麻素进行转化,并通过理化性质和波谱分析鉴定转化产物的结构。结果转化产物经NMR,EI-MS等的测定证明为天麻苷元(对羟基苯甲醇)。结论利用兰色梨头霉Absidia coerulea3.338 9的静息细胞转化天麻素,在底物质量浓度为2.8 mg/mL,pH 6,28℃条件下转化48 h,转化率可达95.7%。     

抗肺炎链球菌工程多肽的制备研究

目的:制备和纯化抗肺炎链球茵工程多肽(Ph-SP).方法:将重组质粒转化入工程茵TGl表达工程多肽,经透析、离子交换柱纯化后,SDS-PAGE凝胶电泳鉴定融合蛋白,微平板法测定蛋白浓度.结果:经透析、离子交换柱纯化后可获得较为单一的目的蛋白,蛋白浓度为0.18mg/ml.结论:本文的操作流程可以获得相对单一的目的蛋白.